Perfil de Proteogenômica Imune e Microambiental para Classificação de Pacientes com Câncer de Pulmão

O acúmulo excessivo de líquido entre as membranas que envolvem o pulmão, uma condição clínica comumente referida como "derrame pleural", é causado por um de três fatores: aumento da produção de líquido pleural, diminuição da capacidade de reabsorver líquido pleural ou uma mistura de ambos.

A base do acúmulo de derrame pleural pode ter origem em múltiplas patologias: desde condições benignas e extrapulmonares até patologia pleural intrínseca (inflamatória ou neoplásica primária ou metastática) em que o acúmulo de líquido no espaço pleural se deve principalmente a alterações na estrutura do pleural membrana (perda de integridade e/ou infiltração por células neoplásicas).

Um exemplo de condições extrapulmonares é o derrame pleural observado em pacientes com insuficiência cardíaca congestiva em que há aumento da pressão capilar hidrostática, devido à falha da bomba cardiocirculatória.

A distinção entre causas benignas e malignas é atualmente um desafio diagnóstico que geralmente requer a coleta de material (células imersas no líquido pleural ou mesmo uma amostra histológica).

O primeiro passo desta investigação é atualmente a avaliação citológica do líquido pleural, ou seja, a observação de células, de uma amostra inicial do líquido pleural. Este procedimento está associado a uma sensibilidade média de 62%, enquanto uma segunda amostra por toracocentese melhora a sensibilidade do diagnóstico em 10%. Em certos casos, porém, não é possível diagnosticar pela análise do líquido pleural e, via de regra, recomenda-se um método diagnóstico mais invasivo, como a biópsia pleural (coletada por punção com agulha "cega", ecoguiada ou computadorizada tomografia guiada ou obtida por visualização direta da cavidade pleural por pleuroscopia).

O rendimento diagnóstico desta abordagem pode chegar a 97% (no caso de biópsia pleural obtida por toracoscopia médica). Porém, implica maior morbidade e maior consumo de recursos (materiais e humanos). O desenvolvimento de um método diagnóstico mais sensível e específico e ao mesmo tempo menos invasivo para o líquido pleural pode contribuir para uma triagem mais eficaz dos pacientes, limitando o uso de métodos mais invasivos, apenas para pacientes com maior risco de patologia maligna.

Objetivos do estudo:

Este projeto consiste num estudo pré-clínico onde iremos explorar novas metodologias de avaliação clínica, baseadas na análise proteômica das características imunológicas e do microambiente do tumor no líquido pleural de pacientes cujo diagnóstico não foi confirmado. Os resultados obtidos serão utilizados na implementação de um algoritmo para a classificação do líquido pleural nos seguintes grupos: a) baixo risco ou benigno; b) alto risco ou maligno. Se o algoritmo tiver boa sensibilidade e especificidade para diagnósticos malignos, pode ser útil distinguir os pacientes nos grupos: a) adiar o teste invasivo e fazer vigilância ativa por imagem; b) proceder a testes invasivos.

Avaliação de benefício/risco:

A coleta do líquido pleural será realizada por meio de procedimentos utilizados no atendimento padrão e diagnóstico da doença, não constituindo assim riscos adicionais aos participantes. Os resultados desta investigação não trazem efeitos clínicos diretamente aplicáveis ​​aos participantes envolvidos. No entanto, no futuro, os resultados obtidos podem beneficiar outros usuários por meio de uma melhor compreensão do microambiente tumoral.

Modalidades de Recrutamento:

Através de entrevista ao médico investigador, o participante deste estudo toma conhecimento dos termos do tratamento dos seus dados pessoais no âmbito do projeto de investigação. Além disso, os titulares dos dados assinam consentimento informado para participação no estudo. A notificação inclui uma explicação dos procedimentos envolvidos na investigação e o papel dos dados pessoais coletados no contexto da investigação. Na entrevista com o médico investigador e mediante a assinatura do consentimento informado para participação no estudo, o titular dos dados toma conhecimento do seu direito de desistir do estudo e/ou retirar o seu consentimento informado.

A coleta de amostras biológicas para o estudo de coorte prospectivo comparativo será realizada em todos os hospitais colaboradores deste projeto em um período de dois a três anos. Com base na variância e no poder estatístico observados em estudo anterior do proteoma do exossomo do líquido pulmonar, estimou-se 200 amostras como o número mínimo para a classificação de amostras biológicas. A análise de poder estatístico baseia-se na variância observada em 10 amostras nas quais aproximadamente 3500 proteínas foram identificadas e quantificadas em fluidos pulmonares. A análise de poder estatístico considera a correção para testes múltiplos de acordo com o número de proteínas identificadas e quantificadas.

Especificações de coleta de dados:

Durante a consulta será realizada uma entrevista clínica, que permitirá a recolha de dados pessoais, nomeadamente dados genéticos, dados relacionados com a saúde e origem racial ou étnica. Também será realizado um exame objetivo para avaliar peso, altura, pressão arterial e frequência cardíaca. Serão recolhidos dados relativos aos resultados dos exames complementares de diagnóstico, nomeadamente: 1. Radiografia do tórax (localização, extensão e características do derrame pleural); 2. ultrassonografia de tórax (localização, extensão, caracterização da ecoestrutura - homogênea/heterogênea; com/sem septações visíveis); 3. Tomografia Computadorizada Torácica (localização, extensão, aspecto morfológico da pleura - aumento de espessura, nódulos, etc.); 4. Avaliação citológica do líquido pleural; 5. Estudo bioquímico sérico: glicemia; dosagem de proteínas totais e albumina sérica; nível de lactato desidrogenase.

O método diagnóstico de referência será baseado na avaliação histológica do tecido. Os resultados das análises proteômicas obtidos neste projeto não serão levados em consideração para o diagnóstico final dos participantes.

Especificação de coleta e destino final de amostras biológicas:

De acordo com a decisão do clínico, o líquido pleural será obtido para diagnóstico (através de toracocentese ou durante o curso de biópsia pleural ou pleuroscopia). A amostra obtida seguirá a via usual de investigação clínica (avaliação citológica e/ou histopatológica, avaliação bioquímica, avaliação microbiológica) conforme registrado em cada instituição. Para os pacientes que concordarem em participar do estudo, apenas uma amostra adicional de líquido pleural será enviada para o estudo que nos propomos a realizar. Estas últimas amostras serão armazenadas no CEDOC.

Texto das informações a serem fornecidas aos voluntários:

O estudo para o qual pedimos o seu consentimento visa desenvolver um método de diagnóstico com maior especificidade e sensibilidade na identificação de diferentes patologias associadas à acumulação excessiva de líquido pleural (condição vulgarmente conhecida como derrame pleural). Atualmente, a avaliação citológica, ou seja, a observação de células, de uma amostra inicial do líquido pleural tem sensibilidade média de 62% enquanto uma segunda coleta por toracocentese (consiste na aspiração do líquido da pleura através da punção do parede torácica) melhora a sensibilidade do diagnóstico em 10%. Em certos casos não é possível diagnosticar pela análise do líquido pleural e por via de regra recomenda-se um método diagnóstico mais invasivo, como a biópsia pleural ou a pleuroscopia (técnica cirúrgica que permite visualizar diretamente o interior da caixa torácica) com biópsia (sensibilidade 98%). O desenvolvimento de um método de diagnóstico com maior especificidade e sensibilidade do líquido pleural, evitando assim métodos invasivos, pode melhorar a eficácia no rastreio de doentes com derrame pleural, limitando o estudo invasivo a uma parcela selecionada de doentes com risco efetivamente maior de patologia maligna . Sua participação neste estudo não envolve procedimentos adicionais além daqueles que seu médico considera necessários para o diagnóstico da doença ou prescrição de medicamentos específicos para o estudo em questão. As amostras recolhidas serão anonimizadas com um código, ou seja, não será possível aos investigadores fazer corresponder as amostras com os dados pessoais dos respetivos pacientes. Qualquer um dos dados recolhidos será confidencial, de acordo com o novo Regulamento Geral de Proteção de Dados (RGPD) que entrou em vigor em maio de 2018 (Regulamento (UE) n.º 2016/679).

CONSENTIMENTO INFORMADO DO PACIENTE:

(NOME) _____________________________________________________, concordo voluntariamente em participar do projeto de pesquisa intitulado "Estudo clínico no contexto do diagnóstico de pacientes com derrame pleural".

Declaro que fui informado sobre os objetivos e metodologia deste estudo, bem como sobre as condições de participação, tendo recebido informações orais e escritas, as quais ouvi, li e compreendi.

Este documento foi assinado após todas as dúvidas terem sido esclarecidas com o médico investigador e após reflexão sobre esta proposta de participação com tempo ilimitado.

As amostras e dados serão criptografados, para proteger minha identidade. Sou livre para recusar a doação de minhas amostras e, mesmo após ter dado meu consentimento, poderei retirá-lo a qualquer momento se assim o desejar. Minha decisão não afetará em nada a qualidade do meu acompanhamento clínico nem alterará meus direitos como paciente da ________________________________________________________ (unidade hospitalar).

A qualquer momento, posso solicitar informações genéricas sobre o estudo para o qual as amostras estão sendo usadas. No entanto, não serei informado dos resultados concretos obtidos em minhas amostras, pois esses dados não são relevantes para meu acompanhamento clínico.

Também autorizo ​​o uso de amostras biológicas e dados coletados, de forma anônima e confidencial, em projetos de pesquisa posteriores, desde que autorizados pelo Comitê de Ética competente.

Assinatura do Participante: _______________________________________

Data: __ / __ / _____

Assinatura do Investigador: _______________________________________

Data: __ / __ / _____

Titularidade e proteção de dados dos participantes/confidencialidade:

As medidas de segurança na proteção de dados pessoais que serão implementadas incluem 1. Pseudonimização e encriptação de dados pessoais; 2. Capacidade de restabelecer a disponibilidade e o acesso aos dados pessoais em tempo hábil em caso de incidente; 3. Processo para testar, avaliar e avaliar regularmente a eficácia das medidas técnicas e organizacionais para garantir a segurança do processamento de dados.