Evaluatie van een nieuwe op ontlasting gebaseerde qPCR voor de diagnose van tuberculose bij kinderen en mensen die leven met hiv (Stool4TB)

Tuberculose (tbc) blijft een belangrijke oorzaak van morbiditeit en mortaliteit bij kinderen en mensen met hiv (PLHIV). Ondanks aanzienlijke vooruitgang op het gebied van tbc-diagnostiek, blijft de verbetering van de tbc-diagnose bij kinderen een grote uitdaging en vormt het een belangrijke pijler van de "End TB Strategy" van de WHO. Bevestiging door tbc-laboratoria is met name een uitdaging bij kinderen en PLHIV, gezien de moeilijkheid om sputummonsters te verkrijgen en de pauci-bacillaire aard van de ziekte. Bijgevolg blijft de bacteriologische bevestiging van longtuberculose bij jonge kinderen en PLHIV met immunosuppressie teleurstellend laag. Het onvermogen om tuberculose bacteriologisch te bevestigen, resulteert in zowel i) onderdiagnose, wat leidt tot slechtere resultaten, waaronder verhoogde mortaliteit, en ii) over- of onderdiagnose en slechte toewijzing van middelen. Gezien de beperkingen van de momenteel beschikbare op sputum gebaseerde diagnostische tests in deze kwetsbare populaties, is er behoefte aan het ontwikkelen van nieuwe hulpmiddelen en het identificeren van gemakkelijk te verzamelen niet-respiratoire monsters die, gecombineerd, de bacteriologische bevestiging zouden kunnen verbeteren. Voorlopige gegevens suggereren dat een nieuw platform, een innovatieve ontlastingshomogenisatie en DNA-isolatiemethode, waarde toevoegt aan bestaande op sputum gebaseerde diagnostiek door de bacteriologische bevestiging te verhogen, en ook nuttig zou kunnen zijn als monitoringtool voor behandelingsrespons. Dit platform heeft het potentieel om te worden aangepast aan een point-of-care (POC)-diagnose en dus gemakkelijk te worden geïmplementeerd in basisgezondheidszorgcentra met beperkte middelen.

Doelstelling: Het doel van dit project is de evaluatie van de diagnostische prestaties van het real-time kwantitatieve PCR (qPCR)-platform op ontlastingskorrels voor de diagnose van tuberculose bij kinderen en PLHIV. Dit zal worden geëvalueerd in de gebieden met een hoge tbc- en hiv-last in Mozambique, Eswatini en Oeganda, in de hypothese dat het de grote tbc-detectiekloof zal verkleinen door de tbc-bevestigingspercentages bij kinderen en PLHIV te verbeteren, terwijl het haalbaar en acceptabel zal blijken te zijn.

Hoofddoel:

• Evalueer de diagnostische nauwkeurigheid van een op ontlasting gebaseerde kwantitatieve PCR in real time voor het detecteren van DNA van Mycobacterium tuberculosis (MTB qPCR), vergeleken met een samengestelde referentiestandaard (sputum en ontlasting Xpert Ultra, sputumkweek en urine TB-LAM).

Secundaire doelstellingen:

• Evalueer de diagnostische nauwkeurigheid van de op ontlasting gebaseerde Mtb qPCR voor individueel sputum en stoelgang Xpert Ultra, urine LAM, sputumuitstrijkje en sputumcultuur (MGIT) resultaten met behulp van een consensus klinische casusdefinitie als referentiestandaard.
• Evalueer het nut van het kwantitatieve op ontlasting gebaseerde MTB qPCR-platform als een hulpmiddel om de behandelingsrespons voor kinderen en PLHIV te volgen.
• Het creëren van een biorepository van goed gekarakteriseerde pediatrische monsters op elk van de onderzoekslocaties ter ondersteuning van de toekomstige ontwikkeling en evaluatie van nieuw biomarkeronderzoek.

Methodologie: Dit is een prospectief diagnostisch evaluatieonderzoek met een geneste longitudinale cohortevaluatie. Gedurende een rekruteringsperiode van 30 maanden zullen mensen met vermoedelijke tuberculose achtereenvolgens deelnemen aan twee onderzoeksgroepen: kinderen jonger dan 8 jaar, ongeacht hun hiv-status (N=1295) en volwassenen met hiv, ongeacht hun immunologische status ( N=650). Zestig extra mensen zullen deelnemen als gezonde (asymptomatische) controles. Na klinische, radiologische en bacteriologische evaluatie worden tbc-gevallen volgens de landelijke richtlijnen behandeld. Deelnemers met de diagnose tuberculose zullen gedurende 6 maanden na de start van de behandeling worden gevolgd om de respons op de behandeling en de resultaten te beoordelen. Er zal een klinische casusdefinitie worden opgesteld als referentiestandaard en gedefinieerd als elke deelnemer bij wie een beslissing is genomen om ATT te starten (tbc-gevallen zullen worden geclassificeerd als bevestigd of onbevestigd). Concreet zullen kinderen worden geclassificeerd in 3 verschillende pediatrische eindpuntcategorieën (bevestigde tbc, onbevestigde tbc en onwaarschijnlijke tbc) op basis van bacteriologische, radiologische en klinische criteria, volgens internationale consensusrichtlijnen.