Evaluierung eines neuen stuhlbasierten qPCR zur Diagnose von Tuberkulose bei Kindern und Menschen mit HIV (Stool4TB)

Tuberkulose (TB) ist nach wie vor eine der Hauptursachen für Morbidität und Mortalität bei Kindern und Menschen mit HIV (PLHIV). Trotz erheblicher Fortschritte in der Tuberkulosediagnostik stellt die Verbesserung der Tuberkulosediagnose bei Kindern weiterhin eine große Herausforderung dar und ist eine wichtige Säule der „End TB Strategy“ der WHO. Die Laborbestätigung von Tuberkulose ist bei Kindern und Menschen mit HIV aufgrund der Schwierigkeit, Sputumproben zu erhalten, und der paucibazillären Natur der Erkrankung eine besondere Herausforderung. Infolgedessen bleibt die bakteriologische Bestätigung von Lungentuberkulose bei Kleinkindern und immunsupprimierten Menschen mit HIV weiterhin enttäuschend niedrig. Die Unfähigkeit, Tuberkulose bakteriologisch zu bestätigen, führt sowohl dazu, dass i) eine Unterdiagnose vorliegt, was zu schlechteren Ergebnissen, einschließlich erhöhter Mortalität, führt, als auch ii) eine Über- oder Unterdiagnose und eine schlechte Ressourcenallokation. Angesichts der Einschränkungen der derzeit verfügbaren sputumbasierten Diagnosetests in diesen gefährdeten Bevölkerungsgruppen besteht die Notwendigkeit, neue Instrumente zu entwickeln und einfach zu entnehmende nicht respiratorische Proben zu identifizieren, die zusammen die bakteriologische Bestätigung verbessern könnten. Vorläufige Daten deuten darauf hin, dass eine neue Plattform, eine innovative Methode zur Stuhlhomogenisierung und DNA-Isolierung, einen Mehrwert für die bestehende sputumbasierte Diagnostik darstellt, indem sie die Rate der bakteriologischen Bestätigung erhöht, und auch als Überwachungsinstrument für das Ansprechen auf die Behandlung nützlich sein könnte. Diese Plattform hat das Potenzial, an eine Point-of-Care-Diagnostik (POC) angepasst zu werden und somit problemlos in ressourcenbeschränkten Basisgesundheitszentren implementiert zu werden.

Ziel: Das Ziel dieses Projekts besteht darin, die diagnostische Leistung der auf Stuhlkügelchen basierenden Echtzeit-Quantifizierungs-PCR (qPCR)-Plattform für die TB-Diagnose bei Kindern und Menschen mit HIV zu bewerten. Dies wird in den Gebieten mit hoher Tuberkulose- und HIV-Belastung in Mosambik, Eswatini und Uganda unter der Hypothese evaluiert, dass es die große Lücke bei der Erkennung von Tuberkulosefällen durch eine Verbesserung der Tuberkulose-Bestätigungsraten bei Kindern und Menschen mit HIV verringern und sich gleichzeitig als machbar und akzeptabel erweisen wird.

Hauptziel:

• Bewerten Sie die diagnostische Genauigkeit einer stuhlbasierten quantitativen Echtzeit-PCR zum Nachweis von DNA von Mycobacterium tuberculosis (MTB qPCR) im Vergleich zu einem zusammengesetzten Referenzstandard (Sputum und Stuhl Xpert Ultra, Sputumkultur und Urin TB-LAM).

Sekundäre Ziele:

• Bewerten Sie die diagnostische Genauigkeit der stuhlbasierten Mtb-qPCR für einzelne Ergebnisse von Sputum und Stuhl Xpert Ultra, Urin-LAM, Sputumabstrich und Sputumkultur (MGIT) unter Verwendung einer konsensbasierten klinischen Falldefinition als Referenzstandard.
• Bewerten Sie den Nutzen der quantitativen stuhlbasierten MTB-qPCR-Plattform als Instrument zur Überwachung des Behandlungsansprechens bei Kindern und Menschen mit HIV.
• Erstellung eines Biorepositorys mit gut charakterisierten pädiatrischen Proben an jedem der Studienstandorte, um die zukünftige Entwicklung und Bewertung neuartiger Biomarkerforschung zu unterstützen.

Methodik: Es handelt sich um eine prospektive diagnostische Evaluationsstudie mit einer verschachtelten longitudinalen Kohortenauswertung. Während eines 30-monatigen Rekrutierungszeitraums werden Menschen mit vermuteter Tuberkulose nacheinander in zwei Studiengruppen aufgenommen: Kinder unter 8 Jahren, unabhängig vom HIV-Status (N=1295) und Erwachsene mit HIV, unabhängig vom immunologischen Status ( N=650). Als gesunde (asymptomatische) Kontrollpersonen werden 60 zusätzliche Personen teilnehmen. Nach klinischer, radiologischer und bakteriologischer Beurteilung werden TB-Fälle gemäß den nationalen Richtlinien behandelt. Teilnehmer, bei denen Tuberkulose diagnostiziert wurde, werden seit Beginn der Behandlung sechs Monate lang nachbeobachtet, um das Ansprechen und die Ergebnisse der Behandlung zu beurteilen. Eine klinische Falldefinition wird als Referenzstandard erstellt und als jeder Teilnehmer definiert, bei dem die Entscheidung getroffen wird, mit der ATT zu beginnen (TB-Fälle werden als bestätigt oder unbestätigt klassifiziert). Konkret werden Kinder anhand bakteriologischer, radiologischer und klinischer Kriterien und nach internationalen Konsensrichtlinien in drei verschiedene pädiatrische Endpunktkategorien (bestätigte Tuberkulose, unbestätigte Tuberkulose und unwahrscheinliche Tuberkulose) eingeteilt.