Evaluering af en ny afføring baseret qPCR til diagnosticering af tuberkulose hos børn og mennesker, der lever med hiv (Stool4TB)

Tuberkulose (TB) er fortsat en førende årsag til sygelighed og dødelighed blandt børn og mennesker, der lever med hiv (PLHIV). På trods af betydelige fremskridt inden for TB-diagnostik, er forbedring af børns TB-diagnose fortsat en stor udfordring og er en nøglepille i WHO's "End TB Strategy". TB-laboratoriebekræftelse er særligt udfordrende hos børn og PLHIV på grund af vanskeligheden ved at få sputumprøver og sygdommens pauci-bacilære karakter. Som følge heraf forbliver bakteriologisk bekræftelse af lunge-TB hos små børn og immunsupprimeret PLHIV skuffende lav. Manglende evne til bakteriologisk at bekræfte TB, resulterer i både i) under diagnose, hvilket fører til værre resultater, herunder øget dødelighed og ii) over eller under diagnose og dårlig ressourceallokering. I betragtning af begrænsningerne af aktuelt tilgængelige sputum-baserede diagnostiske tests i disse sårbare populationer, er der behov for at udvikle nye værktøjer og identificere let at indsamle ikke-respiratoriske prøver, som tilsammen kunne forbedre bakteriologisk bekræftelse. Foreløbige data tyder på, at en ny platform, en innovativ afføringshomogeniserings- og DNA-isoleringsmetode, tilføjer værdi til eksisterende sputum-baseret diagnostik ved at øge antallet af bakteriologisk bekræftelse og også kunne være nyttig som et overvågningsværktøj til behandlingsrespons. Denne platform har potentiale til at blive tilpasset til en point of care (POC) diagnostik og dermed let implementeret i ressourcebegrænsede basale sundhedscentre.

Formål: Formålet med dette projekt er at evaluere den diagnostiske ydeevne af den afføringsperle-baserede real-time kvantitative PCR (qPCR) platform til TB diagnose hos børn og PLHIV. Dette vil blive evalueret i de høje TB- og HIV-byrder i Mozambique, Eswatini og Uganda, under den hypotese, at det vil indsnævre det store TB-tilfældedetekteringsgab ved at forbedre TB-bekræftelsesraten hos børn og PLHIV, samtidig med at det viser sig gennemførligt og acceptabelt.

Primært mål:

• Evaluer den diagnostiske nøjagtighed af en afføringsbaseret real-time kvantitativ PCR til påvisning af DNA fra Mycobacterium tuberculosis (MTB qPCR), sammenlignet med en sammensat referencestandard (sputum og afføring Xpert Ultra, sputumkultur og urin TB-LAM).

Sekundære mål:

• Evaluer den diagnostiske nøjagtighed af den afføringsbaserede Mtb qPCR til individuelle sputum og fæces Xpert Ultra, urin LAM, sputum smear og sputum kultur (MGIT) resultater ved hjælp af en konsensus klinisk case definition som referencestandard.
• Evaluer anvendeligheden af ​​den kvantitative afføringsbaserede MTB qPCR-platform som et værktøj til at overvåge behandlingsrespons for børn og PLHIV.
• At skabe et biodepot af velkarakteriserede pædiatriske prøver på hvert af undersøgelsesstederne for at understøtte den fremtidige udvikling og evaluering af ny biomarkørforskning.

Metode: Dette er en prospektiv diagnostisk evalueringsundersøgelse med en indlejret longitudinel kohorte-evaluering. I løbet af en 30-måneders rekrutteringsperiode vil personer med formodet TB fortløbende tilmelde sig to undersøgelsesgrupper: Børn under 8 år, uanset hiv-status (N=1295) og voksne, der lever med hiv, uanset immunologisk status ( N=650). Tres ekstra personer vil deltage som raske (asymptomatiske) kontroller. Efter klinisk, radiologisk og bakteriologisk vurdering vil TB-tilfælde blive behandlet efter nationale retningslinjer. Deltagere diagnosticeret med TB vil blive fulgt op i 6 måneder efter behandlingsstart for at vurdere behandlingsrespons og -resultater. En klinisk case-definition vil blive etableret som en referencestandard og defineret som enhver deltager, hos hvem der træffes en beslutning om at starte ATT (TB-tilfælde vil blive klassificeret som bekræftede eller ubekræftede). Specifikt vil børn blive klassificeret i 3 distinkte pædiatriske endepunktskategorier (bekræftet TB, ubekræftet TB og Usandsynlig TB) baseret på bakteriologiske, radiologiske og kliniske kriterier, efter internationale konsensusretningslinjer.