Avaliando um novo qPCR baseado em fezes para diagnóstico de tuberculose em crianças e pessoas vivendo com HIV (Stool4TB)

A tuberculose (TB) continua a ser uma das principais causas de morbidade e mortalidade entre crianças e pessoas vivendo com HIV (PVHIV). Apesar do progresso significativo no diagnóstico da TB, a melhoria do diagnóstico da TB infantil continua a ser um grande desafio e é um pilar fundamental da "Estratégia End TB" da OMS. A confirmação laboratorial da TB é particularmente desafiadora em crianças e PVHIV devido à dificuldade em obter amostras de escarro e à natureza pauci-bacilar da doença. Em consequência, a confirmação bacteriológica de TB pulmonar em crianças pequenas e PVHIV imunossuprimidas permanece decepcionantemente baixa. A incapacidade de confirmar bacteriologicamente a TB resulta em i) subdiagnóstico, o que leva a piores resultados, incluindo aumento da mortalidade e ii) sobre ou subdiagnóstico e má alocação de recursos. Dadas as limitações dos testes diagnósticos baseados em escarro atualmente disponíveis nessas populações vulneráveis, há necessidade de desenvolver novas ferramentas e identificar amostras não respiratórias fáceis de coletar que, combinadas, possam melhorar a confirmação bacteriológica. Dados preliminares sugerem que uma nova plataforma, um método inovador de homogeneização de fezes e isolamento de DNA, agrega valor aos diagnósticos baseados em escarro existentes, aumentando as taxas de confirmação bacteriológica e também pode ser útil como ferramenta de monitoramento da resposta ao tratamento. Esta plataforma tem potencial para ser adaptada a um diagnóstico de ponto de atendimento (POC) e, portanto, facilmente implementada em centros de cuidados básicos de saúde com recursos limitados.

Objetivo: O objetivo deste projeto é avaliar o desempenho diagnóstico da plataforma de PCR quantitativo em tempo real (qPCR) baseada em contas de fezes para o diagnóstico de TB em crianças e PVHIV. Isso será avaliado nos cenários de alta carga de TB e HIV de Moçambique, Eswatini e Uganda, sob a hipótese de que reduzirá a grande lacuna de detecção de casos de TB ao melhorar as taxas de confirmação de TB em crianças e PVHIV, ao mesmo tempo em que se mostra viável e aceitável.

Objetivo primário:

• Avaliar a precisão diagnóstica de uma PCR quantitativa em tempo real baseada em fezes para detectar DNA de Mycobacterium tuberculosis (MTB qPCR), em comparação com um padrão de referência composto (escarro e fezes Xpert Ultra, cultura de escarro e urina TB-LAM).

Objetivos secundários:

• Avalie a precisão diagnóstica do Mtb qPCR baseado em fezes para resultados individuais de escarro e fezes Xpert Ultra, urina LAM, esfregaço de escarro e cultura de escarro (MGIT) usando uma definição de caso clínico consensual como padrão de referência.
• Avaliar a utilidade da plataforma quantitativa MTB qPCR baseada em fezes como uma ferramenta para monitorar a resposta ao tratamento para crianças e PVHIV.
• Criar um biorrepositório de amostras pediátricas bem caracterizadas em cada um dos locais de estudo para apoiar o futuro desenvolvimento e avaliação de novas pesquisas de biomarcadores.

Metodologia: Este é um estudo prospectivo de avaliação diagnóstica com uma avaliação de coorte longitudinal aninhada. Durante um período de recrutamento de 30 meses, as pessoas com tuberculose presumida serão consecutivamente incluídas em dois grupos de estudo: crianças com menos de 8 anos de idade, independentemente do status de HIV (N = 1295) e adultos vivendo com HIV, independentemente do status imunológico ( N=650). Sessenta pessoas extras participarão como controles saudáveis ​​(assintomáticos). Após avaliação clínica, radiológica e bacteriológica, os casos de TB serão tratados de acordo com as diretrizes nacionais. Os participantes diagnosticados com TB serão acompanhados por 6 meses desde o início do tratamento, a fim de avaliar a resposta e os resultados do tratamento. Uma definição de caso clínico será estabelecida como um padrão de referência e definida como qualquer participante no qual é tomada a decisão de iniciar ATT (os casos de TB serão classificados como confirmados ou não confirmados). Especificamente, as crianças serão classificadas em 3 categorias distintas de desfechos pediátricos (TB confirmada, TB não confirmada e TB improvável) com base em critérios bacteriológicos, radiológicos e clínicos, seguindo diretrizes de consenso internacional.