Új széklet alapú qPCR értékelése gyermekek és HIV-fertőzött emberek tuberkulózisának diagnosztizálására (Stool4TB)

A tuberkulózis (TB) továbbra is a gyermekek és a HIV-fertőzöttek (PLHIV) megbetegedésének és halálozásának vezető oka. A tbc-diagnosztika terén elért jelentős előrehaladás ellenére a gyermekkori tbc-diagnózis javítása továbbra is komoly kihívást jelent, és a WHO „TBC-vége stratégiájának” kulcsfontosságú pillére. A tbc laboratóriumi megerősítése különösen nagy kihívást jelent a gyermekek és a PLHIV-fertőzöttek esetében, tekintettel a köpetminták beszerzésének nehézségeire, valamint a betegség pauci-baciláris jellegére. Következésképpen a kisgyermekek tüdő-tbc és az immunszupprimált PLHIV bakteriológiai igazolása továbbra is kiábrándítóan alacsony. A tuberkulózis bakteriológiai megerősítésének képtelensége i) aluldiagnózist eredményez, ami rosszabb kimenetelhez vezet, beleértve a megnövekedett mortalitást és ii) a diagnózis túl- vagy alulmaradását, valamint az erőforrások rossz allokációját. Tekintettel a jelenleg rendelkezésre álló köpet alapú diagnosztikai tesztek korlátaira ezekben a sérülékeny populációkban, új eszközök kifejlesztésére van szükség, és könnyen gyűjthető nem légzési minták azonosítására van szükség, amelyek együttesen javíthatják a bakteriológiai megerősítést. Az előzetes adatok azt sugallják, hogy egy új platform, egy innovatív széklethomogenizációs és DNS-izolálási módszer a meglévő köpet alapú diagnosztika értékét növeli azáltal, hogy növeli a bakteriológiai megerősítés arányát, és a kezelési válasz monitorozásaként is hasznos lehet. Ez a platform alkalmas az ellátási pontok (POC) diagnosztikájára való adaptálására, és így könnyen megvalósítható a korlátozott erőforrásokkal rendelkező alapvető egészségügyi központokban.

Célkitűzés: A projekt célja a székletgyöngy-alapú, valós idejű kvantitatív PCR (qPCR) platform diagnosztikai teljesítményének értékelése a tuberkulózis diagnosztizálására gyermekeknél és PLHIV-nél. Ezt a mozambiki, eswatini és ugandai magas tbc- és HIV-terhek körülményei között fogják értékelni, azzal a hipotézissel, hogy csökkenteni fogja a tbc-es esetek kimutatásában tapasztalható nagy különbséget azáltal, hogy javítja a tbc-megerősítési arányt a gyermekek és a PLHIV esetében, miközben megvalósíthatónak és elfogadhatónak bizonyul.

Az elsődleges célkítűzés:

• Értékelje a Mycobacterium tuberculosis DNS (MTB qPCR) DNS kimutatására szolgáló székletalapú valós idejű kvantitatív PCR diagnosztikai pontosságát egy összetett referenciastandardhoz (köpet és széklet Xpert Ultra, köpetkultúra és vizelet TB-LAM) összehasonlítva.

Másodlagos célok:

• Értékelje a széklet alapú Mtb qPCR diagnosztikai pontosságát az egyedi köpet és széklet Xpert Ultra, vizelet LAM, köpetkenet és köpetkultúra (MGIT) eredményeire, referencia standardként konszenzusos klinikai esetdefiníciót használva.
• Értékelje a kvantitatív széklet alapú MTB qPCR platform hasznosságát a gyermekek és a PLHIV kezelési válaszának nyomon követésére.
• Jól jellemzett gyermekgyógyászati ​​minták biorepozitóriumának létrehozása minden egyes vizsgálati helyszínen, hogy támogassa az új biomarker kutatások jövőbeli fejlesztését és értékelését.

Módszertan: Ez egy prospektív diagnosztikai kiértékelő vizsgálat, beágyazott longitudinális kohorsz értékeléssel. A 30 hónapos toborzási időszak alatt a feltételezett tbc-ben szenvedők egymás után két vizsgálati csoportba kerülnek: 8 évnél fiatalabb gyermekek HIV-státuszától függetlenül (N=1295) és HIV-fertőzött felnőttek, immunológiai állapotuktól függetlenül. N=650). Hatvan további személy vesz részt egészséges (tünetmentes) kontrollként. A klinikai, radiológiai és bakteriológiai értékelést követően a tuberkulózisos eseteket a nemzeti irányelvek szerint kezelik. A TB-vel diagnosztizált résztvevőket a kezelés megkezdése óta 6 hónapig nyomon követik, hogy felmérjék a kezelésre adott választ és az eredményeket. A klinikai esetdefiníciót referencia standardként határozzák meg, és minden olyan résztvevőként határozzák meg, akinél döntés születik az ATT megkezdéséről (a tuberkulózisos eseteket megerősítettnek vagy meg nem erősítettnek minősítik). Konkrétan, a gyermekeket 3 különböző gyermekgyógyászati ​​végpont kategóriába sorolják (megerősített TB, nem megerősített tbc és nem valószínű tbc) bakteriológiai, radiológiai és klinikai kritériumok alapján, a nemzetközi konszenzusos iránymutatásokat követve.