Nasal LPS-utfordring i friske frivillige

STUDIEDESIGN OG METODOLOGI Dette er en enkeltsenterstudie som vil bli utført ved Imperial Clinical Respiratory Research Unit (ICRRU) ved St Mary's Hospital i London Paddington.

REKRUTTERING Studien skal rekruttere totalt 15 friske deltakere.

STUDIEBESØK Studien vil omfatte totalt 11 polikliniske besøk. Screeningbesøket er det første besøket hvor studien diskuteres med deltakeren og skriftlig informert samtykke innhentes av PI eller hans utpekte. Dette gjøres før noen studierelaterte prosedyrer utføres. Deltakeren vil ha hatt studieinformasjonsarket i minst 24 timer før besøket.

Besøket vil inkludere innsamling av demografiske data, høyde og vekt, fysisk undersøkelse av en lege, sykehistorie, vitale tegn, kroppstemperatur, 12 avlednings-EKG, laboratorievurderinger (sikkerhetsblod), urinmedisiner for misbrukstest og graviditetstester for kvinner. Deltakeren vil også bli bedt om å indikere tilstedeværelsen av eventuelle nesesymptomer ved å fylle ut et modifisert totalresultat for nesesymptomer og utføre en PNIF-test (peak nasal inspiratory flow).

Hvis de er kvalifisert, vil deltakerne bli bedt om å komme tilbake for ytterligere studiebesøk. Deltakerne vil få 4 forskjellige doser LPS og placebo på en randomisert måte.

Det er totalt 5 behandlingsperioder. Hver behandlingsperiode består av et besøk på 11 timer den første dagen og et besøk på 20 minutter neste dag. Det er totalt 12-28 dagers intervall mellom hvert behandlingsperiodebesøk.

Under behandlingsperiodebesøkene vil studiedeltakerne gjennomgå følgende studieprosedyrer:

1. Neseskylling til begge neseborene og kast med 5 ml 0,9 % saltvann for å rense nesen før nese-LPS-utfordring.
2. Neseutfordring med LPS (placebo, 1,10, 30 eller 100 µg per nesebor)
3. Nasosorpsjon (høyre nesebor) ved -30m, +30m, +1t, deretter hver time til 10t og 24t
4. Neseskylling (venstre nesebor) ved -30m, +2t, +4t, +8t, +24t
5. Neseskraping (venstre nesebor) ved -30m, +3t, +6t, +24t
6. Modifisert total nasal symptomscore (TNSS) ved -30m, +30m, +1t, deretter hver time til 10t og 24t
7. Maksimal nasal inspiratorisk strømningshastighet (PNIF) ved -30m, +2t, +4t, +8t, 24t
8. Systemiske bivirkninger
9. Temperatur (oral) ved -30m, +2t, +4t, +8t
10. Blodtrykk og hjertefrekvens ved -30m
11. Kvinner i fertil alder vil få utført en graviditetstest.

NASALE PROSEDYRER I STUDIEN

1. Neseskylling (neseskylling): Neseskylling i nesen utføres ved å føre et lite volum saltvann (saltvann) inn i nesen. En neseadapter formet som en oliven er plassert inne i neseboret. Deltakeren blir deretter bedt om å sitte fremover og saltvannsløsningen (saltvann) brukes til å skylle inn og ut av nesen over en periode på ett minutt. Denne prosedyren utføres på begge neseborene for å rense nesen ved det første studiebesøket og deretter gjentas kun på venstre nesebor ved hvert behandlingsbesøk.
2. Absorpsjon av neseslimhinnevæske (nasosorpsjon eller SAM): En liten stripe av absorberende materiale, som ser ut og føles som mykt silkepapir, vil bli brukt til å absorbere fuktighet fra innsiden av neseboret. Det spesielle absorberende papiret vil bli plassert inne i neseboret og la det stå i en periode på 2 minutter for å absorbere neseslimhinnevæsken før det fjernes, og suger forsiktig opp væske som tøypapir. Å putte papiret inn i nesen kan kile, og få øynene til å renne litt. Nasosorpsjonen gjør imidlertid ikke vondt, og etterforskernes metode har vist seg å tolereres godt hos babyer, barn og voksne. Papiret absorberer nesevæsken og mange stoffer som produseres av nesecellene kan deretter trekkes ut av papiret og måles i laboratoriet.
3. Neseskraping (nesekuretasje eller nesesonde): En liten steril engangsplastprobe settes inn i nesen og presses forsiktig mot innsiden av neseborets overflate. Den 3 tommer lange sonden har en liten scoop på enden, som knapt kan ses. 24 bittesmå prøver fra hvert nesebor (et knappenålshode, 2 mm, vev) vil bli tatt fra en del av nesen som har redusert nervetilførsel for å begrense eventuell ubehag. Å ta denne prøven forårsaker ikke blødning, men kan forårsake noe mildt ubehag, og kan få øynene til å renne litt. Sonden vil samle neseceller fra overflaten av neseboret som deretter sendes til analyse. Denne metoden har blitt utført på mange voksne, barn og babyer, og har blitt veldig godt tolerert.

STATISTISK ANALYSE Hvert av tiltakene vil bli oppsummert beskrivende etter dose og tid ved bruk av passende oppsummeringsstatistikk. Hvis det er hensiktsmessig, vil responsvariabler bli transformert (f.eks. log-transformert). Genekspresjonsdata vil bli normalisert av husholdergenet. TNSS vil bli beregnet ved å summere skårene for neseblokkering, neseutflod/rhinoré, brennende nese/kløe/smertefølelse og nysing på hvert tidspunkt. Vektet gjennomsnitt av symptomskåre vil bli beregnet over tidsintervallet 0 til 10 timer.

TNSS, nasale sniff-trykk, nasosorpsjonsmål og genekspresjonsdata fra neseskrapene vil hver plottes mot tid, med et eget plott for hvert forsøksperson og mål, og med LPS-dose og placebo representert ved separate linjer på plottene. Sammendragsstatistikk (f.eks. gjennomsnitt +/- 95 % konfidensintervall eller median og interkvartilt område) for neseskylling og genekspresjonsdata vil bli plottet etter dose mot tid.

Korrelasjoner vil bli utforsket ved hjelp av spredningsplott for følgende mål:

• Vektet betyr TNSS vs. maksimal TNF-α
• Vektet betyr TNSS vs. maksimal IL-8
• Vektet betyr TNSS vs. maksimum s-ICAM-1
• Maksimal ICAM-1-ekspresjon vs. maksimal TNF-α

Reproduserbarheten av den nasale LPS-utfordringen for ICAM-1-ekspresjon og TNF-α vil bli utforsket ved å bruke følgende undergrupper av data:

• Forhåndsdoser data for hver periode for å utforske intra-subjekt variabilitet. Parameter vs. periodenummer vil bli plottet med en egen linje for hvert emne for å utforske om det er en periodeeffekt. Boks- og værhårplott vil også bli brukt for å oppsummere parameteren etter periode.
• Placeboperiodedata - Parameter vs tid vil bli plottet med en egen linje for hvert individ for å utforske om det er en tidsforløpseffekt. Boks- og whiskerplott vil også bli brukt for å oppsummere parameteren over tid.

Boks- og whiskerplott for ICAM-1-ekspresjon og TNF-α og dose og tid vil bli presentert for å undersøke om disse målene går tilbake til baseline etter 24 timer.

Ytterligere utforskende analyser kan utføres for ytterligere å karakterisere ekspresjonsprofilen til ICAM etter nasal LPS-utfordring.