Défi LPS nasal chez des volontaires sains

CONCEPTION ET MÉTHODOLOGIE DE L'ÉTUDE Il s'agit d'une étude monocentrique qui sera menée à l'Imperial Clinical Respiratory Research Unit (ICRRU) du St Mary's Hospital à Londres Paddington.

RECRUTEMENT L'étude recrutera un total de 15 participants en bonne santé.

VISITES D'ÉTUDE L'étude impliquera un total de 11 visites de patients externes. La visite de dépistage est la visite initiale où l'étude est discutée avec le participant et le consentement éclairé écrit est obtenu par le PI ou son délégué. Ceci est fait avant d'effectuer toute procédure liée à l'étude. Le participant aura eu la fiche d'information sur l'étude au moins 24 heures avant la visite.

La visite comprendra la collecte de données démographiques, la taille et le poids, un examen physique par un médecin, les antécédents médicaux, les signes vitaux, la température corporelle, un ECG à 12 dérivations, des évaluations de laboratoire (sangs de sécurité), des tests d'abus de drogues dans l'urine et des tests de grossesse pour les femmes. Il sera également demandé au participant d'indiquer la présence de tout symptôme nasal en remplissant une feuille de score modifiée des symptômes nasaux totaux et d'effectuer un test de débit inspiratoire nasal de pointe (PNIF).

S'ils sont éligibles, les participants seront invités à revenir pour d'autres visites d'étude. Les participants recevront 4 doses différentes de LPS et un placebo de manière aléatoire.

Il y a un total de 5 périodes de traitement. Chaque période de traitement consiste en une visite de 11h le premier jour et une visite de 20 minutes le lendemain. Il y a un intervalle total de 12 à 28 jours entre chaque visite de la période de traitement.

Au cours des visites de la période de traitement, les participants à l'étude subiront les procédures d'étude suivantes :

1. Lavage nasal aux deux narines et jeter avec 5 ml de solution saline à 0,9 % afin de nettoyer le nez avant le défi nasal LPS.
2. Provocation nasale au LPS (placebo, 1,10, 30 ou 100µg par narine)
3. Nasosorption (narine droite) à -30m, +30m, +1h, puis horaire à 10h et 24h
4. Lavage nasal (narine gauche) à -30m, +2h, +4h, +8h, +24h
5. Raclage nasal (narine gauche) à -30m, +3h, +6h, +24h
6. Score total modifié des symptômes nasaux (TNSS) à -30m, +30m, +1h, puis horaire à 10h et 24h
7. Débit inspiratoire nasal maximal (PNIF) à -30 m, +2 h, +4 h, +8 h, 24 h
8. Événements indésirables systémiques
9. Température (orale) à -30m, +2h, +4h, +8h
10. Tension artérielle et fréquence cardiaque à -30m
11. Les femmes en âge de procréer subiront un test de grossesse.

PROCÉDURES NASALES DANS L'ÉTUDE

1. Lavage nasal (lavage nasal): Les lavages nasaux dans le nez sont effectués en faisant passer un petit volume d'eau salée (solution saline) dans le nez. Un adaptateur nasal en forme d'olive est placé à l'intérieur de la narine. Le participant est ensuite invité à s'asseoir vers l'avant et la solution d'eau salée (solution saline) est utilisée pour rincer et sortir le nez sur une période d'une minute. Cette procédure est effectuée sur les deux narines pour nettoyer le nez lors de la visite d'étude initiale, puis répétée uniquement sur la narine gauche à chaque visite de traitement.
2. Absorption du liquide de la muqueuse nasale (nasosorption ou SAM) : une petite bande de matériau absorbant, qui ressemble et se sent comme du papier de soie doux, sera utilisée pour absorber l'humidité de la surface intérieure de la narine. Le papier absorbant spécial sera placé à l'intérieur de la narine et laissé pendant une période de 2 minutes pour absorber le liquide de la muqueuse nasale avant d'être retiré, en aspirant doucement le liquide comme du papier buvard. Mettre le papier dans le nez peut chatouiller et faire pleurer un peu vos yeux. Cependant, la nasosorption ne fait pas mal et la méthode des investigateurs s'est avérée bien tolérée chez les bébés, les enfants et les adultes. Le papier absorbe le liquide nasal et de nombreuses substances produites par les cellules nasales peuvent ensuite être extraites du papier et mesurées en laboratoire.
3. Grattage nasal (curetage nasal ou Rhinoprobe) : Une petite sonde en plastique jetable stérile sera insérée dans le nez et sera doucement pressée contre la paroi interne de la narine. La sonde de 3 pouces de long a une petite cuillère à l'extrémité, qui peut à peine être vue. 24 minuscules échantillons de chaque narine (une tête d'épingle, 2 mm, de tissu) seront prélevés sur une partie du nez dont l'innervation est réduite pour limiter tout inconfort. La prise de cet échantillon ne provoque pas de saignement, mais peut causer un léger inconfort et peut faire pleurer légèrement les yeux. La sonde recueillera des cellules nasales à la surface de la narine qui seront ensuite envoyées pour analyse. Cette méthode a été pratiquée sur de nombreux adultes, enfants et bébés et a été très bien tolérée.

ANALYSE STATISTIQUE Chacune des mesures sera résumée de manière descriptive par dose et durée à l'aide de statistiques récapitulatives appropriées. Le cas échéant, les variables de réponse seront transformées (par ex. log-transformé). Les données d'expression génique seront normalisées par gène domestique. Le TNSS sera calculé en additionnant les scores d'obstruction nasale, d'écoulement nasal/rhinorrhée, de sensation de brûlure nasale/démangeaison/douleur et d'éternuement à chaque instant. Les moyennes pondérées des scores des symptômes seront calculées sur l'intervalle de temps de 0 à 10h.

Le TNSS, les pressions de reniflement nasal, les mesures de nasosorption et les données d'expression génique des éraflures nasales seront chacun tracés en fonction du temps, avec un tracé séparé pour chaque sujet et mesure, et avec la dose de LPS et le placebo représentés par des lignes séparées sur les tracés. Statistiques récapitulatives (par ex. moyennes des intervalles de confiance +/- 95 % ou médiane et intervalle interquartile) pour le lavage nasal et les données d'expression génique seront tracées par dose en fonction du temps.

Les corrélations seront explorées à l'aide de diagrammes de dispersion pour les mesures suivantes :

• Moyennes pondérées TNSS vs TNF-α maximum
• Moyenne pondérée TNSS vs IL-8 maximum
• Moyenne pondérée TNSS vs s-ICAM-1 maximum
• Expression maximale d'ICAM-1 par rapport au TNF-α maximal

La reproductibilité de la provocation nasale au LPS pour l'expression d'ICAM-1 et du TNF-α sera explorée à l'aide des sous-ensembles de données suivants :

• Données de prédose pour chaque période pour explorer la variabilité intra-sujet. Le paramètre par rapport au numéro de période sera tracé avec une ligne distincte pour chaque sujet afin d'explorer s'il existe un effet de période. Des diagrammes en boîte et moustaches seront également utilisés pour résumer le paramètre par période.
• Données de la période placebo - Le paramètre en fonction du temps sera tracé avec une ligne distincte pour chaque sujet afin d'explorer s'il existe un effet temporel. Des diagrammes en boîte et moustaches seront également utilisés pour résumer le paramètre au fil du temps.

Des diagrammes en boîte et moustaches pour l'expression d'ICAM-1 et de TNF-α et la dose et le temps seront présentés pour déterminer si ces mesures reviennent à la ligne de base après 24h.

Des analyses exploratoires supplémentaires peuvent être effectuées pour caractériser davantage le profil d'expression de l'ICAM après une provocation par le LPS nasal.