Reto de LPS nasal en voluntarios sanos

DISEÑO Y METODOLOGÍA DEL ESTUDIO Este es un estudio de centro único que se llevará a cabo en la Unidad de Investigación Clínica Respiratoria Imperial (ICRRU) en el Hospital St Mary's en London Paddington.

RECLUTAMIENTO El estudio reclutará un total de 15 participantes sanos.

VISITAS DE ESTUDIO El estudio implicará un total de 11 visitas ambulatorias. La visita de selección es la visita inicial en la que se analiza el estudio con el participante y el IP o su designado obtienen el consentimiento informado por escrito. Esto se hace antes de realizar cualquier procedimiento relacionado con el estudio. El participante habrá tenido la hoja de información del estudio por lo menos 24 horas antes de la visita.

La visita incluirá la recopilación de datos demográficos, altura y peso, examen físico por un médico, historial médico, signos vitales, temperatura corporal, ECG de 12 derivaciones, evaluaciones de laboratorio (sangre de seguridad), prueba de drogas de abuso en orina y pruebas de embarazo para mujeres. También se le pedirá al participante que indique la presencia de cualquier síntoma nasal al completar una hoja de puntuación de síntomas nasales totales modificada y realizar una prueba de flujo inspiratorio nasal máximo (PNIF).

Si son elegibles, se les pedirá a los participantes que regresen para más visitas de estudio. Los participantes recibirán 4 dosis diferentes de LPS y un placebo de forma aleatoria.

Hay un total de 5 períodos de tratamiento. Cada período de tratamiento consta de una visita de 11 horas el primer día y una visita de 20 minutos el día siguiente. Hay un intervalo total de 12 a 28 días entre cada visita del período de tratamiento.

Durante las visitas del período de tratamiento, los participantes del estudio se someterán a los siguientes procedimientos del estudio:

1. Lave nasal en ambas fosas nasales y deseche con 5 ml de solución salina al 0,9 % para limpiar la nariz antes de la prueba con LPS nasal.
2. Provocación nasal con LPS (placebo, 1, 10, 30 ó 100 µg por fosa nasal)
3. Nasosorción (fosa nasal derecha) a -30m, +30m, +1h, luego cada hora a 10h y 24h
4. Lavado nasal (fosa nasal izquierda) a -30m, +2h, +4h, +8h, +24h
5. Raspado nasal (fosa nasal izquierda) a -30m, +3h, +6h, +24h
6. Puntuación total de síntomas nasales modificada (TNSS) a -30m, +30m, +1h, luego cada hora a 10h y 24h
7. Tasa de flujo inspiratorio nasal máximo (PNIF) a -30 m, +2 h, +4 h, +8 h, 24 h
8. Eventos adversos sistémicos
9. Temperatura (oral) a -30m, +2h, +4h, +8h
10. Presión arterial y frecuencia cardíaca a -30m
11. A las mujeres en edad fértil se les realizará una prueba de embarazo.

PROCEDIMIENTOS NASALES EN EL ESTUDIO

1. Lavado nasal (lavado nasal): Los lavados nasales en la nariz se realizan pasando un pequeño volumen de líquido de agua salada (solución salina) por la nariz. Se coloca un adaptador nasal con forma de aceituna dentro de la fosa nasal. Luego se le pide al participante que se siente hacia adelante y la solución de agua salada (solución salina) se usa para enjuagar la nariz dentro y fuera durante un período de un minuto. Este procedimiento se lleva a cabo en ambas fosas nasales para limpiar la nariz en la visita inicial del estudio y luego se repite solo en la fosa nasal izquierda en cada visita de tratamiento.
2. Absorción de líquido del revestimiento nasal (nasosorción o SAM): se utilizará una pequeña tira de material absorbente, que se ve y se siente como un pañuelo de papel suave, para absorber la humedad de la superficie interior de la fosa nasal. El papel absorbente especial se colocará dentro de la fosa nasal y se dejará durante un período de 2 minutos para que absorba el líquido del revestimiento nasal antes de retirarlo, succionando suavemente el líquido como si fuera papel secante. Poner el papel en la nariz puede hacerle cosquillas y hacer que sus ojos lagrimeen un poco. Sin embargo, la nasosorción no duele y el método de los investigadores ha demostrado ser bien tolerado en bebés, niños y adultos. El papel absorbe el fluido nasal y muchas sustancias producidas por las células nasales pueden extraerse del papel y medirse en el laboratorio.
3. Raspado nasal (legrado nasal o rinosonda): se insertará una pequeña sonda plástica desechable estéril en la nariz y se presionará suavemente contra el revestimiento de la superficie interior de la fosa nasal. La sonda de 3 pulgadas de largo tiene una pequeña pala en el extremo, que apenas se puede ver. Se tomarán 24 pequeñas muestras de cada fosa nasal (una cabeza de alfiler, 2 mm de tejido) de una parte de la nariz que tiene un suministro nervioso reducido para limitar cualquier molestia. Tomar esta muestra no causa sangrado, pero puede causar una leve molestia y puede hacer que los ojos lagrimeen un poco. La sonda recolectará células nasales de la superficie de la fosa nasal que luego se enviarán para su análisis. Este método se ha realizado en muchos adultos, niños y bebés, y ha sido muy bien tolerado.

ANÁLISIS ESTADÍSTICO Cada una de las medidas se resumirán de forma descriptiva por dosis y tiempo utilizando estadísticas de resumen apropiadas. Si corresponde, las variables de respuesta se transformarán (p. transformada logarítmicamente). Los datos de expresión génica serán normalizados por el gen ama de llaves. El TNSS se calculará sumando las puntuaciones de obstrucción nasal, secreción nasal/rinorrea, sensación de ardor/picazón/dolor nasal y estornudos en cada punto de tiempo. Las medias ponderadas de las puntuaciones de los síntomas se calcularán durante el intervalo de tiempo de 0 a 10 h.

El TNSS, las presiones de olfato nasal, las medidas de nasosorción y los datos de expresión génica de los raspados nasales se representarán en función del tiempo, con un gráfico separado para cada sujeto y medida, y con la dosis de LPS y el placebo representados por líneas separadas en los gráficos. Estadísticas resumidas (p. ej., media +/- intervalos de confianza del 95 % o mediana y rango intercuartílico) para el lavado nasal y los datos de expresión génica se representarán gráficamente por dosis frente al tiempo.

Las correlaciones se explorarán utilizando diagramas de dispersión para las siguientes medidas:

• Medias ponderadas de TNSS frente a TNF-α máximo
• Medias ponderadas de TNSS frente a IL-8 máxima
• Medias ponderadas TNSS vs. s-ICAM-1 máximo
• Máxima expresión de ICAM-1 frente a máxima TNF-α

La reproducibilidad del desafío con LPS nasal para la expresión de ICAM-1 y TNF-α se explorará utilizando los siguientes subconjuntos de datos:

• Datos previos a la dosis para cada período para explorar la variabilidad intra-sujeto. El parámetro frente al número de período se trazará con una línea separada para cada sujeto para explorar si existe un efecto de período. También se utilizarán diagramas de caja y bigotes para resumir el parámetro por período.
• Datos del período de placebo: el parámetro frente al tiempo se trazará con una línea separada para cada sujeto para explorar si existe un efecto de curso de tiempo. También se utilizarán diagramas de caja y bigotes para resumir el parámetro a lo largo del tiempo.

Se presentarán gráficos de caja y bigotes para la expresión de ICAM-1 y TNF-α y la dosis y el tiempo para investigar si estas medidas vuelven a la línea base después de 24 horas.

Se pueden realizar análisis exploratorios adicionales para caracterizar aún más el perfil de expresión de ICAM después del desafío con LPS nasal.