Nasal LPS Challenge i friska volontärer

STUDIEDESIGN OCH METODOLOGI Detta är en encenterstudie som kommer att genomföras vid Imperial Clinical Respiratory Research Unit (ICRRU) vid St Mary's Hospital i London Paddington.

REKRYTERING Studien kommer att rekrytera totalt 15 friska deltagare.

STUDIEBESÖK Studien kommer att omfatta totalt 11 polikliniska besök. Screeningbesöket är det första besöket där studien diskuteras med deltagaren och skriftligt informerat samtycke erhålls av PI eller dennes utsedda. Detta görs innan några studierelaterade procedurer utförs. Deltagaren kommer att ha haft studieinformationsbladet i minst 24 timmar före besöket.

Besöket kommer att omfatta insamling av demografiska data, längd och vikt, fysisk undersökning av en läkare, sjukdomshistoria, vitala tecken, kroppstemperatur, 12 avlednings-EKG, laboratoriebedömningar (säkerhetsblod), urindroger för missbrukstest och graviditetstester för kvinnor. Deltagaren kommer också att bli ombedd att indikera förekomsten av några nasala symtom genom att fylla i ett modifierat resultatblad för totala nasala symptom och utföra ett PNIF-test (peak nasal inspiratory flow).

Om de är berättigade kommer deltagarna att bli ombedda att återvända för ytterligare studiebesök. Deltagarna kommer att ges 4 olika doser av LPS och en placebo på ett randomiserat sätt.

Det finns totalt 5 behandlingsperioder. Varje behandlingsperiod består av ett 11 timmars besök första dagen och ett 20 minuters besök följande dag. Det är totalt 12-28 dagars intervall mellan varje behandlingsperiodbesök.

Under behandlingsperiodens besök kommer studiedeltagarna att genomgå följande studieprocedurer:

1. Nässköljning till båda näsborrarna och kassera med 5 ml 0,9 % koksaltlösning för att rengöra näsan före näsans LPS-utmaning.
2. Nasal utmaning med LPS (placebo, 1,10, 30 eller 100 µg per näsborre)
3. Nasosorption (höger näsborre) vid -30m, +30m, +1h, sedan varje timme till 10h och 24h
4. Nässköljning (vänster näsborre) vid -30m, +2h, +4h, +8h, +24h
5. Nässkrapa (vänster näsborre) vid -30m, +3h, +6h, +24h
6. Modifierad total nasal symptompoäng (TNSS) vid -30m, +30m, +1h, sedan varje timme till 10h och 24h
7. Högsta näsinandningsflöde (PNIF) vid -30m, +2h, +4h, +8h, 24h
8. Systemiska biverkningar
9. Temperatur (oral) vid -30m, +2h, +4h, +8h
10. Blodtryck och puls vid -30m
11. Kvinnor i fertil ålder kommer att få ett graviditetstest utfört.

NASALA PROCEDURER I STUDIEN

1. Nässköljning (nässköljning): Nässköljning i näsan utförs genom att en liten volym saltvatten (saltlösning) släpps in i näsan. En näsadapter formad som en oliv placeras inuti näsborren. Deltagaren uppmanas sedan att sitta framåt och saltvattenlösningen (saltlösning) används för att spola in och ut ur näsan under en minuts period. Denna procedur utförs på båda näsborrarna för att rensa upp näsan vid det första studiebesöket och upprepas sedan endast på vänster näsborre vid varje behandlingsbesök.
2. Näsfodervätskeabsorption (nasosorption eller SAM): En liten remsa av absorberande material, som ser ut och känns som mjukt silkespapper, kommer att användas för att absorbera fukt från näsborrens insida. Det speciella absorberande papperet kommer att placeras inuti näsborren och lämnas i 2 minuter för att absorbera nässlemhinnan innan det tas bort, och suger försiktigt upp vätska som läskpapper. Att stoppa in papperet i näsan kan kittla och få ögonen att vattnas lite. Nasosorptionen gör dock inte ont och utredarnas metod har visat sig tolereras väl av spädbarn, barn och vuxna. Papperet absorberar näsvätskan och många ämnen som produceras av näscellerna kan sedan extraheras från papperet och mätas i laboratoriet.
3. Nässkrapning (nässkrapning eller noshörning): En liten steril engångssond av plast förs in i näsan och trycks försiktigt mot näsborrens insida. Den 3 tum långa sonden har en liten skopa på änden, som knappt kan ses. 24 små prover från varje näsborre (ett knappnålshuvud, 2 mm, vävnad) kommer att tas från en del av näsan som har en minskad nervtillförsel för att begränsa eventuella obehag. Att ta detta prov orsakar ingen blödning, men kan orsaka lite lätt obehag och kan få ögonen att vattnas något. Sonden kommer att samla näsceller från ytan av näsborren som sedan skickas för analys. Denna metod har utförts på många vuxna, barn och spädbarn och har tolererats mycket väl.

STATISTISK ANALYS Var och en av åtgärderna kommer att sammanfattas beskrivande efter dos och tid med hjälp av lämplig sammanfattande statistik. Om det är lämpligt kommer svarsvariabler att transformeras (t.ex. log-transformerad). Genuttrycksdata kommer att normaliseras av hushållargenen. TNSS kommer att beräknas genom att summera poängen för nästäppa, nasala flytningar/rhinorré, nasal brännande känsla/klåda/smärta och nysningar vid varje tidpunkt. Viktade medelvärden för symtompoäng kommer att beräknas över tidsintervallet 0 till 10 timmar.

TNSS, nasala snifftryck, nasosorptionsmått och genuttrycksdata från nässkraporna kommer var och en att plottas mot tiden, med en separat plot för varje individ och åtgärd, och med LPS-dos och placebo representerade av separata linjer på plotten. Sammanfattande statistik (t.ex. medelvärde +/- 95 % konfidensintervall eller median- och interkvartilintervall) för nässköljning och genuttrycksdata kommer att plottas efter dos mot tid.

Korrelationer kommer att undersökas med hjälp av spridningsdiagram för följande mått:

• Viktat betyder TNSS mot maximal TNF-α
• Viktat betyder TNSS mot maximal IL-8
• Viktat betyder TNSS vs. maximal s-ICAM-1
• Maximalt ICAM-1-uttryck vs. maximalt TNF-a

Reproducerbarheten av den nasala LPS-utmaningen för ICAM-1-uttryck och TNF-α kommer att undersökas med hjälp av följande undergrupper av data:

• Fördosera data för varje period för att utforska variabiliteten inom individen. Parameter vs periodnummer kommer att plottas med en separat rad för varje ämne för att undersöka om det finns en periodeffekt. Box- och morrhårsdiagram kommer också att användas för att sammanfatta parametern efter period.
• Placeboperioddata - Parameter vs tid kommer att plottas med en separat rad för varje försöksperson för att undersöka om det finns en tidsförloppseffekt. Box- och morrhårsdiagram kommer också att användas för att sammanfatta parametern över tiden.

Box- och whiskerplots för ICAM-1-uttryck och TNF-α och dos och tid kommer att presenteras för att undersöka om dessa mätningar återgår till baslinjen efter 24 timmar.

Ytterligare utforskande analyser kan utföras för att ytterligare karakterisera uttrycksprofilen för ICAM efter nasal LPS-utmaning.