Назальный LPS Challenge у здоровых добровольцев

ДИЗАЙН И МЕТОДОЛОГИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ Это одноцентровое исследование, которое будет проводиться в Имперском отделе клинических респираторных исследований (ICRRU) в больнице Святой Марии в лондонском Паддингтоне.

НАБОР В исследовании примут участие 15 здоровых участников.

ВИЗИТЫ ДЛЯ ОБУЧЕНИЯ Исследование будет включать в себя в общей сложности 11 амбулаторных посещений. Скрининговый визит — это первоначальный визит, во время которого исследование обсуждается с участником, и PI или назначенное им лицо получает письменное информированное согласие. Это делается до выполнения любых процедур, связанных с исследованием. Участник должен иметь информационный лист исследования как минимум за 24 часа до визита.

Визит будет включать в себя сбор демографических данных, рост и вес, медицинский осмотр у врача, историю болезни, показатели жизненно важных функций, температуру тела, ЭКГ в 12 отведениях, лабораторные оценки (безопасность крови), анализ мочи на наркотики и тесты на беременность для женщин. Участника также попросят указать наличие каких-либо назальных симптомов, заполнив измененный лист оценки общих назальных симптомов и выполнив тест пиковой скорости носового вдоха (PNIF).

Если они соответствуют требованиям, участникам будет предложено вернуться для дальнейших ознакомительных поездок. Участникам случайным образом будут даны 4 разные дозы LPS и плацебо.

Всего 5 периодов лечения. Каждый период лечения состоит из 11-часового посещения в первый день и 20-минутного посещения на следующий день. Интервал между визитами в период лечения составляет в общей сложности 12-28 дней.

Во время визитов в период лечения участники исследования будут проходить следующие процедуры исследования:

1. Назальный промывание обеих ноздрей и сброс с 5 мл 0,9% физиологического раствора для очистки носа до назальной провокации LPS.
2. Назальная провокация ЛПС (плацебо, 1, 10, 30 или 100 мкг в ноздрю)
3. Назосорбция (правая ноздря) при -30м, +30м, +1ч, затем ежечасно до 10ч и 24ч
4. Промывание носа (левая ноздря) при -30 м, +2 ч, +4 ч, +8 ч, +24 ч
5. Соскоб из носа (левая ноздря) на -30м, +3ч, +6ч, +24ч
6. Модифицированная общая оценка назальных симптомов (TNSS) при -30 м, +30 м, +1 ч, затем ежечасно до 10 ч и 24 ч
7. Пиковая скорость носового вдоха (PNIF) при -30 м, +2 ч, +4 ч, +8 ч, 24 ч
8. Системные нежелательные явления
9. Температура (оральная) на -30м, +2ч, +4ч, +8ч
10. Артериальное давление и частота сердечных сокращений на -30 м
11. Женщинам детородного возраста будет проведен тест на беременность.

НАЗАЛЬНЫЕ ПРОЦЕДУРЫ В ИССЛЕДОВАНИИ

1. Промывание носа (промывание носа): Промывания носа в нос осуществляют путем пропускания в нос небольшого объема соленой воды (физиологического раствора). В ноздрю помещается носовой адаптер в форме оливы. Затем участника просят сесть вперед, и раствор соленой воды (физиологический раствор) используется для промывания носа в течение одной минуты. Эта процедура проводится на обеих ноздрях для очистки носа во время первого исследовательского визита, а затем повторяется только на левой ноздре при каждом лечебном визите.
2. Абсорбция жидкости слизистой носа (назосорбция или SAM): небольшая полоска абсорбирующего материала, которая выглядит и на ощупь напоминает мягкую папиросную бумагу, будет использоваться для поглощения влаги с внутренней поверхности ноздри. Специальную абсорбирующую бумагу помещают внутрь ноздри и оставляют на 2 минуты для впитывания жидкости, выстилающей нос, а затем удаляют, осторожно всасывая жидкость, как промокательную бумагу. Помещение бумаги в нос может вызвать щекотку и вызвать слезотечение. Однако назосорбция безболезненна, а метод исследователей хорошо переносится младенцами, детьми и взрослыми. Бумага поглощает носовую жидкость, и многие вещества, вырабатываемые клетками носа, затем могут быть извлечены из бумаги и измерены в лаборатории.
3. Соскоб из носа (кюретаж или ринозонд): в нос вводится небольшой стерильный одноразовый пластиковый зонд, который аккуратно прижимается к внутренней поверхности слизистой оболочки ноздри. Зонд длиной 3 дюйма имеет крошечный совок на конце, который едва можно разглядеть. 24 крошечных образца из каждой ноздри (булавочная головка, 2 мм ткани) будут взяты из части носа, которая имеет уменьшенную иннервацию, чтобы ограничить любой дискомфорт. Взятие этого образца не вызывает кровотечения, но может вызвать легкий дискомфорт и небольшое слезотечение. Зонд собирает носовые клетки с поверхности ноздри, которые затем отправляются на анализ. Этот метод применялся на многих взрослых, детях и младенцах и очень хорошо переносился.

СТАТИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ Каждая из мер будет описана описательно по дозе и времени с использованием соответствующих сводных статистических данных. При необходимости переменные ответа будут преобразованы (например, логарифмическое преобразование). Данные экспрессии гена будут нормализованы по гену экономки. TNSS будет рассчитываться путем суммирования показателей заложенности носа, выделений из носа/ринореи, ощущения жжения/зуда/боли в носу и чихания в каждый момент времени. Средневзвешенные оценки симптомов будут рассчитываться за временной интервал от 0 до 10 часов.

TNSS, назальное давление при вдохе, показатели назосорбции и данные экспрессии генов из соскобов из носа будут отображаться в зависимости от времени, с отдельным графиком для каждого субъекта и измерения, а доза LPS и плацебо представлены отдельными линиями на графиках. Сводная статистика (например, средние +/- 95% доверительные интервалы или медиана и межквартильный диапазон) для назального лаважа и данные экспрессии генов будут нанесены на график по дозе в зависимости от времени.

Корреляции будут изучаться с использованием точечных диаграмм для следующих показателей:

• Взвешенные средние значения TNSS по сравнению с максимальным TNF-α
• Взвешенные средние значения TNSS по сравнению с максимальным IL-8
• Взвешенные средние значения TNSS по сравнению с максимальным значением s-ICAM-1
• Максимальная экспрессия ICAM-1 по сравнению с максимальной экспрессией TNF-α

Воспроизводимость назального заражения LPS для экспрессии ICAM-1 и TNF-α будет исследована с использованием следующих подмножеств данных:

• Предварительные данные для каждого периода, чтобы изучить внутрисубъектную изменчивость. Параметр по сравнению с номером периода будет нанесен отдельной линией для каждого субъекта, чтобы выяснить, есть ли эффект периода. Диаграммы с ячейками и усами также будут использоваться для обобщения параметра по периодам.
• Данные о периоде плацебо. Параметр в зависимости от времени будет нанесен на график отдельной линией для каждого субъекта, чтобы выяснить, существует ли временной эффект. Ящики и диаграммы с усами также будут использоваться для суммирования параметра во времени.

Будут представлены графики прямоугольников и усов для экспрессии ICAM-1 и TNF-α, а также дозы и времени, чтобы выяснить, вернутся ли эти показатели к исходному уровню через 24 часа.

Дополнительные исследовательские анализы могут быть выполнены для дальнейшей характеристики профиля экспрессии ICAM после назального введения LPS.