Nasale LPS-uitdaging bij gezonde vrijwilligers

ONDERZOEKSOPZET EN METHODOLOGIE Dit is een onderzoek in één centrum dat zal worden uitgevoerd in de Imperial Clinical Respiratory Research Unit (ICRRU) in het St Mary's Hospital in London Paddington.

REKRUTERING De studie zal in totaal 15 gezonde deelnemers rekruteren.

STUDIEBEZOEKEN Het onderzoek omvat in totaal 11 poliklinische bezoeken. Het screeningsbezoek is het eerste bezoek waarbij de studie met de deelnemer wordt besproken en schriftelijke geïnformeerde toestemming wordt verkregen door de PI of zijn vertegenwoordiger. Dit wordt gedaan voorafgaand aan het uitvoeren van studiegerelateerde procedures. De deelnemer heeft het studie-informatieblad minimaal 24 uur voorafgaand aan het bezoek gehad.

Het bezoek omvat het verzamelen van demografische gegevens, lengte en gewicht, lichamelijk onderzoek door een arts, medische geschiedenis, vitale functies, lichaamstemperatuur, 12-lead ECG, laboratoriumbeoordelingen (veiligheidsbloed), urinetest voor drugsmisbruik en zwangerschapstesten voor vrouwen. De deelnemer wordt ook gevraagd om de aanwezigheid van neussymptomen aan te geven door een aangepast scoreblad voor totale neussymptomen in te vullen en een pieknasale inspiratoire flow (PNIF) -test uit te voeren.

Als ze in aanmerking komen, zullen deelnemers worden gevraagd om terug te komen voor verdere studiebezoeken. Deelnemers krijgen op willekeurige wijze 4 verschillende doses LPS en een placebo.

Er zijn in totaal 5 behandelperiodes. Elke behandelingsperiode bestaat uit een bezoek van 11 uur op de eerste dag en een bezoek van 20 minuten op de volgende dag. Er is een interval van in totaal 12-28 dagen tussen elk bezoek aan de behandelingsperiode.

Tijdens de bezoeken aan de behandelingsperiode ondergaan de studiedeelnemers de volgende studieprocedures:

1. Neusspoeling naar beide neusgaten en weggooien met 5 ml 0,9% zoutoplossing om de neus te reinigen voorafgaand aan de nasale LPS-provocatie.
2. Neusprovocatie met LPS (placebo, 1,10, 30 of 100 µg per neusgat)
3. Nasosorptie (rechter neusgat) op -30 m, +30 m, +1 uur, daarna elk uur tot 10 uur en 24 uur
4. Neusspoeling (linker neusgat) op -30 m, +2 uur, +4 uur, +8 uur, +24 uur
5. Neusschrapen (linker neusgat) op -30m, +3u, +6u, +24u
6. Gewijzigde totale nasale symptoomscore (TNSS) op -30 m, +30 m, +1 uur, vervolgens elk uur tot 10 uur en 24 uur
7. Piek nasale inspiratiestroom (PNIF) bij -30 m, +2 uur, +4 uur, +8 uur, 24 uur
8. Systemische bijwerkingen
9. Temperatuur (oraal) bij -30m, +2u, +4u, +8u
10. Bloeddruk en hartslag bij -30m
11. Vrouwtjes die zwanger kunnen worden, zullen een zwangerschapstest laten uitvoeren.

NASALE PROCEDURES IN DE STUDIE

1. Neusspoeling (neusspoeling): Neusspoelingen in de neus worden uitgevoerd door een kleine hoeveelheid zoutwater (zoutoplossing) vloeistof in de neus te laten stromen. Een neusadapter in de vorm van een olijf wordt in het neusgat geplaatst. De deelnemer wordt vervolgens gevraagd om naar voren te gaan zitten en de zoutoplossing (zoutoplossing) wordt gebruikt om gedurende een minuut in en uit de neus te spoelen. Deze procedure wordt uitgevoerd op beide neusgaten om de neus schoon te maken tijdens het eerste studiebezoek en vervolgens alleen herhaald op het linker neusgat bij elk behandelingsbezoek.
2. Vloeistofabsorptie van de neusvoering (nasosorptie of SAM): een kleine strook absorberend materiaal, dat eruitziet en aanvoelt als zacht tissuepapier, zal worden gebruikt om vocht van het binnenoppervlak van het neusgat te absorberen. Het speciale absorberende papier wordt in het neusgat geplaatst en gedurende 2 minuten gelaten om de vloeistof van het neusslijmvlies te absorberen voordat het wordt verwijderd, waarbij vloeistof zoals vloeipapier voorzichtig wordt opgezogen. Het papier in de neus stoppen kan kriebelen en ervoor zorgen dat je ogen een beetje gaan tranen. De nasosorptie doet echter geen pijn en de methode van de onderzoeker is goed verdragen door baby's, kinderen en volwassenen. Het papier absorbeert de neusvloeistof en veel stoffen die door de neuscellen worden geproduceerd, kunnen vervolgens uit het papier worden gehaald en in het laboratorium worden gemeten.
3. Neusschrapen (neuscurettage of Rhinoprobe): een kleine steriele plastic wegwerpsonde wordt in de neus gestoken en wordt voorzichtig tegen de binnenkant van het neusgat gedrukt. De 3 inch lange sonde heeft een klein bolletje aan het uiteinde, dat nauwelijks te zien is. Er zullen 24 kleine monsters uit elk neusgat (een speldenknop, 2 mm weefsel) worden genomen uit een deel van de neus met een verminderde zenuwtoevoer om ongemak te beperken. Het nemen van dit monster veroorzaakt geen bloedingen, maar kan een licht ongemak veroorzaken en kan de ogen lichtjes doen tranen. De sonde verzamelt neuscellen van het oppervlak van het neusgat, die vervolgens voor analyse worden verzonden. Deze methode is bij veel volwassenen, kinderen en baby's uitgevoerd en wordt zeer goed verdragen.

STATISTISCHE ANALYSE Elk van de maatregelen zal beschrijvend worden samengevat per dosis en tijd met gebruikmaking van geschikte samenvattende statistieken. Indien van toepassing worden responsvariabelen getransformeerd (bijv. log-getransformeerd). Gegevens over genexpressie zullen worden genormaliseerd door het gen van de huishoudster. De TNSS wordt berekend door de scores van neusblokkade, loopneus/rinorroe, neusbrand/jeuk/pijnsensatie en niezen op elk tijdstip op te tellen. Gewogen gemiddelden van symptoomscores worden berekend over het tijdsinterval van 0 tot 10 uur.

TNSS, nasale snuifdruk, nasosorptiemetingen en genexpressiegegevens van de neusschaafwonden zullen elk worden uitgezet tegen de tijd, met een afzonderlijke plot voor elk onderwerp en elke maatregel, en met LPS-dosis en placebo weergegeven door afzonderlijke lijnen op de plots. Overzichtsstatistieken (bijv. gemiddelde +/- 95% betrouwbaarheidsintervallen of mediaan en interkwartielbereik) voor neusspoeling en genexpressiegegevens zullen worden uitgezet per dosis tegen de tijd.

Correlaties zullen worden onderzocht met behulp van spreidingsdiagrammen voor de volgende maatregelen:

• Gewogen betekent TNSS vs. maximum TNF-α
• Gewogen betekent TNSS vs. maximale IL-8
• Gewogen betekent TNSS vs. maximale s-ICAM-1
• Maximale ICAM-1-expressie vs. maximale TNF-α

Reproduceerbaarheid van de nasale LPS-uitdaging voor ICAM-1-expressie en TNF-α zal worden onderzocht met behulp van de volgende subsets van gegevens:

• Predose-gegevens voor elke periode om variabiliteit tussen proefpersonen te onderzoeken. Parameter vs. periodenummer wordt uitgezet met een aparte lijn voor elk onderwerp om te onderzoeken of er een periode-effect is. Box- en whiskerplots worden ook gebruikt om de parameter per periode samen te vatten.
• Placebo-periodegegevens - Parameter versus tijd wordt uitgezet met een afzonderlijke lijn voor elk onderwerp om te onderzoeken of er een tijdsverloopeffect is. Box- en whiskerplots zullen ook worden gebruikt om de parameter in de loop van de tijd samen te vatten.

Box- en whisker-plots voor ICAM-1-expressie en TNF-α en dosis en tijd zullen worden gepresenteerd om te onderzoeken of deze metingen na 24 uur terugkeren naar de basislijn.

Aanvullende verkennende analyses kunnen worden uitgevoerd om het expressieprofiel van ICAM na nasale LPS-provocatie verder te karakteriseren.