Nasal LPS Challenge i sunde frivillige

STUDIEDESIGN OG METODOLOGI Dette er et enkelt-center studie, som vil blive udført på Imperial Clinical Respiratory Research Unit (ICRRU) på St Mary's Hospital i London Paddington.

REKRUTTERING Studiet vil rekruttere i alt 15 raske deltagere.

STUDIEBESØG Undersøgelsen vil omfatte i alt 11 ambulante besøg. Screeningsbesøget er det indledende besøg, hvor undersøgelsen diskuteres med deltageren og skriftligt informeret samtykke indhentes af PI eller dennes udpegede. Dette gøres inden udførelse af undersøgelsesrelaterede procedurer. Deltageren vil have haft studieinformationsarket i mindst 24 timer før besøget.

Besøget vil omfatte indsamling af demografiske data, højde og vægt, fysisk undersøgelse af en læge, sygehistorie, vitale tegn, kropstemperatur, 12-aflednings-EKG, laboratorievurderinger (sikkerhedsblod), urinmedicin af misbrugstest og graviditetstest for kvinder. Deltageren vil også blive bedt om at angive tilstedeværelsen af ​​eventuelle nasale symptomer ved at udfylde et modificeret resultatskema for total nasale symptomer og udføre en peak nasal inspiratory flow (PNIF) test.

Hvis de er kvalificerede, vil deltagerne blive bedt om at vende tilbage til yderligere studiebesøg. Deltagerne får 4 forskellige doser LPS og placebo på en randomiseret måde.

Der er i alt 5 behandlingsperioder. Hver behandlingsperiode består af et 11 timers besøg den første dag og et 20 minutters besøg den efterfølgende dag. Der er i alt 12-28 dages interval mellem hvert behandlingsperiodebesøg.

Under behandlingsperiodens besøg vil deltagerne i undersøgelsen gennemgå følgende undersøgelsesprocedurer:

1. Næseskylning til begge næsebor og kasseres med 5 ml 0,9 % saltvand for at rense næsen før næse-LPS-provokation.
2. Næseudfordring med LPS (placebo, 1, 10, 30 eller 100 µg pr. næsebor)
3. Nasosorption (højre næsebor) ved -30m, +30m, +1t, derefter hver time til 10t og 24t
4. Næseskylning (venstre næsebor) ved -30m, +2t, +4t, +8t, +24t
5. Næseafskrabning (venstre næsebor) ved -30m, +3t, +6t, +24t
6. Modificeret total nasal symptom score (TNSS) ved -30m, +30m, +1t, derefter hver time til 10t og 24t
7. Maksimal nasal inspiratorisk flow (PNIF) hastighed ved -30m, +2t, +4t, +8t, 24t
8. Systemiske bivirkninger
9. Temperatur (oral) ved -30m, +2t, +4t, +8t
10. Blodtryk og puls ved -30m
11. Kvinder i den fødedygtige alder vil få udført en graviditetstest.

NASALE PROCEDURER I UNDERSØGELSEN

1. Næseskylning (næseskylning): Næseskylninger i næsen udføres ved at lede en lille mængde saltvand (saltvand) væske ind i næsen. En næseadapter formet som en oliven er placeret inde i næseboret. Deltageren bliver derefter bedt om at sidde frem, og saltvandsopløsningen (saltvand) bruges til at skylle ind og ud af næsen over en periode på et minut. Denne procedure udføres på begge næsebor for at rense næsen ved det indledende undersøgelsesbesøg og gentages derefter kun på venstre næsebor ved hvert behandlingsbesøg.
2. Absorption af væske i næsebeklædningen (nasosorption eller SAM): En lille strimmel af absorberende materiale, der ser ud og føles som blødt silkepapir, vil blive brugt til at absorbere fugt fra den indvendige overflade af næseboret. Det specielle absorberende papir vil blive placeret inde i næseboret og efterlades i en periode på 2 minutter for at absorbere næseslimhinden, før det fjernes, og forsigtigt suger væske op som duppepapir. At putte papiret ind i næsen kan kilde og få øjnene til at løbe lidt i vand. Nasosorptionen gør dog ikke ondt, og efterforskernes metode har vist sig at være veltolereret hos babyer, børn og voksne. Papiret absorberer næsevæsken, og mange stoffer produceret af næsecellerne kan derefter udvindes fra papiret og måles i laboratoriet.
3. Næseskrab (næsekurettage eller Rhinoprobe): En lille steril engangsplastiksonde indsættes i næsen og presses forsigtigt mod den indvendige overflade af næseboret. Den 3 tommer lange sonde har en lille scoop på enden, som næsten ikke kan ses. 24 bittesmå prøver fra hvert næsebor (et knappenålshoved, 2 mm, væv) vil blive taget fra en del af næsen, som har en reduceret nerveforsyning for at begrænse ethvert ubehag. At tage denne prøve forårsager ikke blødning, men kan forårsage mildt ubehag og kan få øjnene til at løbe lidt i vand. Sonden vil opsamle næseceller fra overfladen af ​​næseboret, som derefter sendes til analyse. Denne metode er blevet udført på mange voksne, børn og babyer og er blevet meget godt tolereret.

STATISTISK ANALYSE Hver af foranstaltningerne vil blive opsummeret beskrivende efter dosis og tid ved hjælp af passende opsummerende statistik. Hvis det er relevant, vil responsvariabler blive transformeret (f.eks. log-transformeret). Genekspressionsdata vil blive normaliseret af husholdergen. TNSS vil blive beregnet ved at summere scorerne for næseblokering, næseflåd/rhinoré, brændende næse/kløe/smertefornemmelse og nysen på hvert tidspunkt. Vægtet gennemsnit af symptomscore vil blive beregnet over tidsintervallet 0 til 10 timer.

TNSS, nasale sniff-tryk, nasosorptionsmålinger og genekspressionsdata fra næseafskrabningerne vil hver blive plottet mod tid, med et separat plot for hvert individ og mål, og med LPS-dosis og placebo repræsenteret ved separate linjer på plottene. Oversigtsstatistikker (f.eks. middel +/- 95 % konfidensintervaller eller median- og interkvartilområde) for næseskylning og genekspressionsdata vil blive plottet efter dosis mod tid.

Korrelationer vil blive undersøgt ved hjælp af scatterplot for følgende mål:

• Vægtet betyder TNSS vs. maksimal TNF-α
• Vægtet betyder TNSS vs. maksimum IL-8
• Vægtet betyder TNSS vs. maksimum s-ICAM-1
• Maksimal ICAM-1-ekspression vs. maksimal TNF-a

Reproducerbarheden af ​​den nasale LPS-udfordring for ICAM-1-ekspression og TNF-α vil blive udforsket ved hjælp af følgende undersæt af data:

• Foruddosisdata for hver periode for at udforske variabiliteten mellem individet. Parameter vs. periodenummer vil blive plottet med en separat linje for hvert emne for at undersøge, om der er en periodeeffekt. Box- og whiskerplot vil også blive brugt til at opsummere parameteren efter periode.
• Placeboperiodedata - Parameter vs. tid vil blive plottet med en separat linje for hvert individ for at undersøge, om der er en tidsforløbseffekt. Box- og whiskerplot vil også blive brugt til at opsummere parameteren over tid.

Boks- og whiskerplot for ICAM-1-ekspression og TNF-α og dosis og tid vil blive præsenteret for at undersøge, om disse mål vender tilbage til baseline efter 24 timer.

Yderligere eksplorative analyser kan udføres for yderligere at karakterisere ekspressionsprofilen af ​​ICAM efter nasal LPS-udfordring.