健康志愿者的鼻 LPS 挑战

研究设计和方法这是一项单中心研究，将在伦敦帕丁顿圣玛丽医院的帝国临床呼吸研究所 (ICRRU) 进行。

招募 该研究将招募总共 15 名健康参与者。

研究访视 该研究将涉及总共 11 次门诊患者访视。 筛选访问是与参与者讨论研究并由 PI 或其指定人员获得书面知情同意书的初次访问。 这是在执行任何与研究相关的程序之前完成的。 参与者将在访问前至少 24 小时收到研究信息表。

访问将包括收集人口统计数据、身高和体重、医生体检、病史、生命体征、体温、12 导联心电图、实验室评估（安全血液）尿液药物滥用测试和女性妊娠测试。 还将要求参与者通过完成修改后的总鼻部症状评分表并执行峰值鼻吸气流量 (PNIF) 测试来表明是否存在任何鼻部症状。

如果符合条件，参与者将被要求返回进行进一步的研究访问。 参与者将以随机方式获得 4 种不同剂量的 LPS 和安慰剂。

总共有5个治疗期。 每个治疗期包括第一天 11 小时的访问和第二天的 20 分钟访问。 每次治疗期访问之间总共有 12-28 天的间隔。

在治疗期间访问期间，研究参与者将接受以下研究程序：

1. 对两个鼻孔进行鼻腔灌洗并用 5ml 0.9% 盐水丢弃，以便在鼻 LPS 攻击之前清洁鼻子。
2. 用 LPS 进行鼻腔刺激（安慰剂，每个鼻孔 1,10、30 或 100µg）
3. 鼻吸（右鼻孔）在 -30m、+30m、+1h，然后每小时至 10h 和 24h
4. -30m、+2h、+4h、+8h、+24h 洗鼻（左鼻孔）
5. -30m、+3h、+6h、+24h 鼻刮（左鼻孔）
6. 在 -30 米、+30 米、+1 小时，然后每小时到 10 小时和 24 小时进行改良的总鼻部症状评分 (TNSS)
7. -30m、+2h、+4h、+8h、24h 时的峰值鼻吸气流量 (PNIF)
8. 全身不良事件
9. -30m、+2h、+4h、+8h 温度（口腔）
10. -30米血压心率
11. 有生育潜力的女性将进行妊娠试验。

研究中的鼻腔手术

1. 洗鼻（洗鼻）：通过将少量盐水（生理盐水）液注入鼻子进行鼻腔清洗。 鼻孔内放置一个形状像橄榄的鼻适配器。 然后要求参与者向前坐，用盐水（盐水）在一分钟内冲洗进出鼻子。 该程序在初始研究访问时在两个鼻孔上进行以清洁鼻子，然后在每次治疗访问时仅在左鼻孔上重复。
2. 鼻内衬液吸收（鼻吸或 SAM）：一小条看起来和感觉都像软薄纸的吸收材料，用于吸收鼻孔内表面的水分。 将特制吸水纸置于鼻孔内，静置2分钟，吸收鼻粘膜液后取出，像吸水纸一样轻轻吸出。 将纸放入鼻子会发痒，并导致您的眼睛流泪。 然而，鼻吸不会造成伤害，研究人员的方法已被证明在婴儿、儿童和成人中具有良好的耐受性。 纸吸收鼻液，鼻细胞产生的许多物质可以从纸中提取并在实验室进行测量。
3. 鼻刮（鼻刮除术或 Rhinoprobe）：将一个小的无菌一次性塑料探针插入鼻子并轻轻按压鼻孔的内表面衬里。 3 英寸长的探头末端有一个小勺子，几乎看不到。 每个鼻孔的 24 个微小样本（针头，2 毫米组织）将从鼻子的神经供应减少的部分取出，以限制任何不适。 服用该样本不会引起出血，但可能会引起一些轻微的不适，并可能使眼睛轻微流泪。 探头将从鼻孔表面收集鼻腔细胞，然后将其送去分析。 这种方法已经在许多成人、儿童和婴儿身上进行过，并且耐受性非常好。

统计分析将使用适当的总结统计按剂量和时间描述性地总结每项测量。 如果合适，将转换响应变量（例如 对数转换）。 基因表达数据将由管家基因归一化。 TNSS 将通过将每个时间点的鼻塞、流鼻涕/流鼻涕、鼻灼痛/发痒/痛感和打喷嚏的分数相加来计算。 将在 0 到 10 小时的时间间隔内计算症状评分的加权平均值。

TNSS、鼻吸气压力、鼻吸收测量和来自鼻部刮擦的基因表达数据将分别相对于时间作图，每个受试者和测量有一个单独的图，并且 LPS 剂量和安慰剂在图上由单独的线表示。 汇总统计数据（例如 鼻腔灌洗和基因表达数据的平均值 +/- 95% 置信区间或中值和四分位数范围）将按剂量随时间绘制。

将使用散点图来探索以下措施的相关性：

• 加权平均 TNSS 与最大 TNF-α
• 加权平均 TNSS 与最大 IL-8
• 加权平均 TNSS 与最大 s-ICAM-1
• 最大 ICAM-1 表达与最大 TNF-α

将使用以下数据子集探索 ICAM-1 表达和 TNF-α 的鼻 LPS 挑战的再现性：

• 每个时期的给药前数据，以探索受试者内的变异性。 参数与周期数将为每个主题绘制一条单独的线，以探索是否存在周期效应。 盒须图也将用于按周期总结参数。
• 安慰剂期数据 - 参数与时间的关系将为每个受试者绘制一条单独的线，以探索是否存在时程效应。 盒须图也将用于总结随时间变化的参数。

将提供 ICAM-1 表达和 TNF-α 以及剂量和时间的盒须图，以研究这些措施是否在 24 小时后恢复到基线。

可以进行额外的探索性分析以进一步表征鼻 LPS 攻击后 ICAM 的表达谱。