Nosní LPS výzva ve zdravých dobrovolnících

NÁVRH A METODOLOGIE STUDIE Toto je jednocentrová studie, která bude provedena na Imperial Clinical Respiratory Research Unit (ICRRU) v nemocnici St Mary's Hospital v Londýně Paddington.

NÁBOR Do studie bude přijato celkem 15 zdravých účastníků.

STUDIJNÍ NÁVŠTĚVY Studie bude zahrnovat celkem 11 ambulantních návštěv. Screeningová návštěva je úvodní návštěva, při které je studie prodiskutována s účastníkem a PI nebo jím pověřená osoba získá písemný informovaný souhlas. To se provádí před provedením jakýchkoli postupů souvisejících se studií. Účastník bude mít informační list o studiu minimálně 24 hodin před návštěvou.

Návštěva bude zahrnovat sběr demografických údajů, výšku a váhu, fyzikální vyšetření lékařem, anamnézu, vitální funkce, tělesnou teplotu, 12svodové EKG, laboratorní vyšetření (bezpečnostní krev), test na drogy v moči a těhotenské testy pro ženy. Účastník bude také požádán, aby označil přítomnost jakýchkoli nosních příznaků vyplněním upraveného celkového skóre nazálních příznaků a provedl test maximálního nasálního inspiračního průtoku (PNIF).

Pokud budou způsobilí, budou účastníci požádáni, aby se vrátili na další studijní návštěvy. Účastníkům budou náhodně podány 4 různé dávky LPS a placebo.

Celkem je 5 léčebných období. Každé léčebné období se skládá z 11hodinové návštěvy první den a 20minutové návštěvy následující den. Mezi jednotlivými návštěvami léčebného období je celkem 12-28denní interval.

Během návštěv v léčebném období podstoupí účastníci studie následující studijní postupy:

1. Vypláchněte nos do obou nosních dírek a zlikvidujte pomocí 5 ml 0,9% fyziologického roztoku, aby se nos vyčistil před nazální expozicí LPS.
2. Nosní provokace LPS (placebo, 1, 10, 30 nebo 100 µg na nosní dírku)
3. Nasorpce (pravá nosní dírka) při -30 m, +30 m, +1 h, poté každou hodinu až 10 h a 24 h
4. Výplach nosu (levá nosní dírka) v -30 m, +2h, +4h, +8h, +24h
5. Nosní škrábnutí (levá nosní dírka) při -30 m, +3h, +6h, +24h
6. Modifikované celkové skóre nosních příznaků (TNSS) v -30 m, +30 m, +1 h, poté každou hodinu až 10 h a 24 h
7. Maximální nosní inspirační průtok (PNIF) při -30 m, +2h, +4h, +8h, 24h
8. Systémové nežádoucí příhody
9. Teplota (orální) při -30m, +2h, +4h, +8h
10. Krevní tlak a tep v -30m
11. Ženám ve fertilním věku bude proveden těhotenský test.

NASÁLNÍ POSTUPY VE STUDII

1. Výplach nosu (výplach nosu): Výplach nosu v nose se provádí tak, že se do nosu vpustí malé množství slané vody (fyziologického roztoku). Uvnitř nosní dírky je umístěn nosní adaptér ve tvaru olivy. Účastník je poté požádán, aby se posadil dopředu, a roztok slané vody (fyziologický roztok) se použije k proplachování nosu a ven z nosu po dobu jedné minuty. Tento postup se provádí na obou nosních dírkách k vyčištění nosu při první studijní návštěvě a poté se opakuje pouze na levé nosní dírce při každé léčebné návštěvě.
2. Absorpce tekutiny z nosní výstelky (nasorpce nebo SAM): K absorbování vlhkosti z vnitřního povrchu nosní dírky bude použit malý proužek absorpčního materiálu, který vypadá a působí jako měkký hedvábný papír. Speciální absorpční papír bude umístěn do nosní dírky a ponechán po dobu 2 minut, aby absorboval tekutinu z nosní výstelky, než bude odstraněn, a jemně nasaje tekutinu jako savý papír. Vložení papíru do nosu může lechtat a způsobit trochu slzení očí. Nasosorpce však nebolí a vyšetřovatelská metoda se ukázala jako dobře snášená u kojenců, dětí i dospělých. Papír absorbuje nosní tekutinu a mnoho látek produkovaných nosními buňkami lze pak z papíru extrahovat a měřit v laboratoři.
3. Nosní škrábání (nosní kyretáž nebo Rhinoprobe): Malá sterilní plastová sonda na jedno použití bude vložena do nosu a bude jemně přitlačena k vnitřní povrchové výstelce nosní dírky. 3 palce dlouhá sonda má na konci malou lopatku, kterou lze sotva vidět. 24 malých vzorků z každé nosní dírky (špendlíková hlavička, 2 mm, tkáně) bude odebráno z části nosu, která má snížené nervové zásobení, aby se omezilo jakékoli nepohodlí. Odběr tohoto vzorku nezpůsobuje krvácení, ale může způsobit mírné nepohodlí a může způsobit mírné slzení očí. Sonda bude sbírat nosní buňky z povrchu nosní dírky, které pak budou odeslány k analýze. Tato metoda byla provedena u mnoha dospělých, dětí a kojenců a byla velmi dobře snášena.

STATISTICKÁ ANALÝZA Každé z opatření bude shrnuto popisně podle dávky a času pomocí příslušných souhrnných statistik. Je-li to vhodné, proměnné odezvy budou transformovány (např. log-transformované). Data genové exprese budou normalizována house-keeper genem. TNSS se vypočte sečtením skóre nosní blokády, výtoku z nosu/výtoku z nosu, pocitu pálení/svědění/bolesti v nose a kýchání v každém časovém bodě. Vážené průměry skóre symptomů budou vypočítány za časový interval 0 až 10 hodin.

TNSS, nazální tlaky čichání, měření nasosorpce a data genové exprese z nosních škrábanců budou vyneseny do grafu proti času, se samostatným grafem pro každý subjekt a měření a s dávkou LPS a placebem reprezentovanými samostatnými čarami na grafech. Souhrnné statistiky (např. průměrné +/- 95% intervaly spolehlivosti nebo medián a interkvartilní rozmezí) pro nazální výplach a data genové exprese budou vynesena do grafu podle dávky proti času.

Korelace budou zkoumány pomocí bodových grafů pro následující měření:

• Vážený průměr TNSS vs. maximální TNF-α
• Vážený průměr TNSS vs. maximální IL-8
• Vážené znamená TNSS vs. maximální s-ICAM-1
• Maximální exprese ICAM-1 vs. maximální TNF-a

Reprodukovatelnost nazálního LPS expozice pro expresi ICAM-1 a TNF-a bude zkoumána pomocí následujících podskupin dat:

• Předpokládejte data pro každé období, abyste prozkoumali variabilitu uvnitř subjektu. Parametr vs. číslo období bude vykresleno samostatnou čarou pro každý předmět, aby se zjistilo, zda existuje vliv období. Krabicové a whiskerové grafy budou také použity pro shrnutí parametru podle období.
• Údaje o periodě placeba – Parametr vs čas bude vykreslen pomocí samostatné čáry pro každý subjekt, aby se prozkoumalo, zda existuje efekt časového průběhu. Krabicové a vousaté grafy budou také použity pro shrnutí parametru v čase.

Budou prezentovány krabicové a whiskerové grafy pro expresi ICAM-1 a TNF-a a dávku a čas, aby se zjistilo, zda se tato měření vrátí na výchozí hodnotu po 24 hodinách.

Pro další charakterizaci expresního profilu ICAM po nazální expozici LPS mohou být provedeny další průzkumné analýzy.