Utskylling av livmorhulen for diagnostisering av ovarie- og tubalkarsinom - Studie av sensitivitet og spesifisitet (LUDOC II)

Epitelial eggstokkreft (EOC) er den ledende dødsårsaken blant gynekologiske maligniteter i vestlige siviliserte land, med en estimert prevalens i Europa og USA på 752 600 i 2007 og 59 828 dødsfall årlig. Behandling og overlevelse av pasientene avhenger først og fremst av sykdomsstadiet. Av alle EOC-pasienter blir bare 25 % diagnostisert på et tidlig stadium mens svulsten er begrenset til bekkenet. I disse tilfellene er femårsoverlevelsen 80 % til 90 %, og sykdommen kan ofte kureres ved kombinasjon av kirurgi og kjemoterapi. Dessverre har nesten 75 % av kvinnene som er rammet sykdom i avansert stadium med metastatisk spredning gjennom bukhulen eller til retroperitoneale lymfeknuter på diagnosetidspunktet; fem års overlevelsesrater faller til 10%-30% for avansert sykdom, til tross for maksimal kirurgisk innsats og kombinasjonskjemoterapi.

For tiden er den nyeste differensialdiagnosen mellom ondartede og godartede ovariepatologier som er mistenkelige for EOC hovedsakelig avhengig av transvaginal ultrasonografi og målinger av serumkreftantigen (CA-125). Spesifisiteten til disse diagnostiske verktøyene er imidlertid lav, og begge testene er ikke effektive nok til å pålitelig skille mellom benigne og ondartede tilstander. Selv i høyt spesialiserte enheter vil bare rundt 20 % av alle pasienter som blir operert for mistanke om eggstokkreft ha en ondartet sykdom. Disse funnene understreker behovet for nye diagnostiske tester, som bedre kan skille mellom benigne og ondartede eggstokkendringer. Dette ville muligens spydde mange pasienter fra unødvendig kirurgi fullstendig og forbedre triage av pasienter med ondartede eggstokksvulster til høyt spesialiserte gynekologiske onkologiske enheter.

En lovende tilnærming for forbedring av differensialdiagnose av mistenkelige eggstokkendringer er etablert av Paul Speiser og Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Department of General Gynecology and Gynaecologic Oncology, Medical University of Vienna, Austria) (EK 1148/2011). Denne tilnærmingen kalles ALPINE-teknikken (Austrian Lavage Procedure for the Detection of tubal Intraepithelial Neoplasms) (manuskript under utarbeidelse). Det inkluderer en skylling av livmorhulen og proksimale eggledere og påfølgende analyse av denne skyllevæsken for tilstedeværelse av pre-maligne og ondartede celler.

For å bevise prinsippet om at tumorceller utskilles fra eggstokkreft og kan finnes i skyllinger i livmorhulen, ble livmorskylling samlet inn før et kirurgisk inngrep for mistenkt eggstokkreft ved etterforskernes institusjon og ved det katolske universitetet i Leuven, avdelingen i obstetrikk og gynekologi. Etter at malignitet ble bekreftet, ble genetiske endringer i TP53- og KRAS-genet bestemt i tumorvev. I et sett med 9 pasienter med epitelial ovariecancer (EOC) og 1 eggstokmetastaser av et signetringkarsinom, ble tilstedeværelsen av disse genetiske endringene undersøkt i skylleprøver ved bruk av digital dråpe-PCR (ddPCR). Ti genetiske endringer ble identifisert i tumorvev hos disse pasientene, og 9/10 (90 %) av disse endringene ble også oppdaget i den tilsvarende skylleprøven. Mutasjonsratene var i området mellom 0,01 % og 39,65 % hos EOC-pasienter. Videre ble det etablert en filtertilnærming, etterfulgt av p53-immunfluorescensfarging, som bekrefter tilstedeværelsen av tumorceller i skylleprøven til en ekstra pasient.

I et neste trinn ble skylleprøver av 22 ovariekarsinompasienter, og eventuelt tilsvarende tumorvev, analysert gjennom dyp sekvensering av gruppen til Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, USA). Tilstedeværelsen av genetiske endringer, indikativ for eggstokkreft, kunne bekreftes i 16/22 (72,7 %) skylleprøver. Av 18 pasienter var tilsvarende tumorvev tilgjengelig, som viste samme mutasjon.

Disse resultatene er bevis på at eggstokkreftceller blir kastet inn i egglederne og livmorhulen, og kan samles inn gjennom vår ALPINE-teknikk. Det faktum at eggstokkreftceller ble påvist med høy følsomhet ved skylling av livmorhulen og proksimale rør viser at denne tilnærmingen har et stort potensiale i differensialdiagnose av eggstokkmasser.