Lavage van de baarmoederholte voor de diagnose van ovarium- en tubacarcinoom - Studie van gevoeligheid en specificiteit (LUDOC II)

Epitheliale eierstokkanker (EOC) is de belangrijkste doodsoorzaak onder gynaecologische maligniteiten in westerse geciviliseerde landen, met een geschatte prevalentie in Europa en de VS van 752.600 in 2007 en 59.828 sterfgevallen per jaar. Behandeling en overleving van de patiënten hangen voornamelijk af van het stadium van de ziekte. Van alle EOC-patiënten wordt slechts 25% in een vroeg stadium gediagnosticeerd terwijl de tumor beperkt is tot het bekken. In deze gevallen is het overlevingspercentage na vijf jaar 80% tot 90% en kan de ziekte vaak worden genezen door de combinatie van chirurgie en chemotherapie. Helaas heeft bijna 75% van de getroffen vrouwen een vergevorderd stadium van de ziekte met uitgezaaide verspreiding door de buikholte of naar retroperitoneale lymfeklieren op het moment van diagnose; overlevingspercentages na vijf jaar dalen tot 10% -30% voor gevorderde ziekte, ondanks maximale chirurgische inspanning en combinatiechemotherapie.

Momenteel berust de stand van de techniek differentiële diagnose tussen kwaadaardige en goedaardige ovariumpathologieën die verdacht zijn voor EOC voornamelijk op transvaginale echografie en serumkankerantigeen (CA-125) metingen. De specificiteit van deze diagnostische hulpmiddelen is echter laag en beide tests zijn niet effectief genoeg om betrouwbaar onderscheid te maken tussen goedaardige en kwaadaardige aandoeningen. Zelfs in zeer gespecialiseerde afdelingen zal slechts ongeveer 20% van alle patiënten die geopereerd worden voor vermoedelijke eierstokkanker een kwaadaardige ziekte hebben. Deze bevindingen onderstrepen de behoefte aan nieuwe diagnostische tests, die beter onderscheid kunnen maken tussen goedaardige en kwaadaardige ovariumveranderingen. Dit zou veel patiënten mogelijk volledig van onnodige operaties afhouden en de triage van patiënten met kwaadaardige ovariumtumoren naar zeer gespecialiseerde gynaecologische oncologieafdelingen verbeteren.

Paul Speiser en Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Department of General Gynaecology and Gynaecological Oncology, Medical University of Vienna, Oostenrijk) hebben een veelbelovende benadering ontwikkeld voor het verbeteren van de differentiële diagnose van verdachte ovariumveranderingen (EK 1148/2011). Deze benadering wordt de ALPINE-techniek genoemd (Austrian Lavage Procedure for the Detection of tubal Intraepithelial Neoplasms) (manuscript in voorbereiding). Het omvat een lavage van de baarmoederholte en proximale eileiders en daaropvolgende analyse van deze lavagevloeistof op de aanwezigheid van premaligne en kwaadaardige cellen.

Voor het principiële bewijs dat tumorcellen van eierstokkanker worden afgescheiden en in de baarmoederspoelingen kunnen worden teruggevonden, werden baarmoederspoelingen afgenomen vóór een chirurgische ingreep wegens vermoedelijke eierstokkanker in het onderzoeksinstituut en aan de Katholieke Universiteit Leuven, afdeling verloskunde en gynaecologie. Nadat maligniteit was bevestigd, werden genetische veranderingen in het TP53- en KRAS-gen bepaald in tumorweefsel. In een set van 9 epitheliale eierstokkankerpatiënten (EOC) en 1 eierstokmetastasen van een zegelringcarcinoom werd de aanwezigheid van deze genetische veranderingen onderzocht in lavagemonsters met behulp van digitale druppel-PCR (ddPCR). Er werden tien genetische veranderingen geïdentificeerd in het tumorweefsel van deze patiënten en 9/10 (90%) van deze veranderingen werden ook gedetecteerd in het overeenkomstige lavagemonster. Mutatiepercentages lagen tussen 0,01% en 39,65% bij EOC-patiënten. Verder werd een filterbenadering, gevolgd door p53-immunofluorescentiekleuring vastgesteld, waarmee de aanwezigheid van tumorcellen in het lavagemonster van één extra patiënt werd bevestigd.

In een volgende stap werden spoelmonsters van 22 patiënten met ovariumcarcinoom, en indien van toepassing corresponderend tumorweefsel, geanalyseerd door middel van deep sequencing door de groep van Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, VS). De aanwezigheid van genetische veranderingen, indicatief voor eierstokkanker, kon worden bevestigd in 16/22 (72,7%) lavagemonsters. Van 18 patiënten waren overeenkomstige tumorweefsels beschikbaar, die dezelfde mutatie vertoonden.

Deze resultaten zijn het bewijs dat eierstokkankercellen in de eileiders en de baarmoederholte terechtkomen en kunnen worden verzameld via onze ALPINE-techniek. Het feit dat eierstokkankercellen met hoge gevoeligheid werden gedetecteerd in de lavage van de baarmoederholte en de proximale eileiders, toont aan dat deze aanpak een groot potentieel heeft voor de differentiële diagnose van eierstokmassa's.