Lavagem da Cavidade Uterina para Diagnóstico de Carcinoma de Ovário e Tubária - Estudo de Sensibilidade e Especificidade (LUDOC II)

O câncer epitelial de ovário (EOC) é a principal causa de morte entre as malignidades ginecológicas nos países civilizados ocidentais, com uma prevalência estimada na Europa e nos EUA de 752.600 em 2007 e 59.828 mortes anualmente. O tratamento e a sobrevida dos pacientes dependem principalmente do estágio da doença. De todos os pacientes com EOC, apenas 25% são diagnosticados em estágio inicial, enquanto o tumor está confinado à pelve. Nestes casos, a taxa de sobrevivência de cinco anos é de 80% a 90% e a doença muitas vezes pode ser curada pela combinação de cirurgia e quimioterapia. Infelizmente, quase 75% das mulheres afetadas apresentam doença em estágio avançado com disseminação metastática por toda a cavidade abdominal ou para linfonodos retroperitoneais no momento do diagnóstico; as taxas de sobrevida em cinco anos caem para 10%-30% para doença avançada, apesar do esforço cirúrgico máximo e quimioterapia combinada.

Atualmente, o diagnóstico diferencial de última geração entre patologias ovarianas malignas e benignas suspeitas de EOC baseia-se predominantemente na ultrassonografia transvaginal e nas medições do antígeno sérico de câncer (CA-125). A especificidade dessas ferramentas de diagnóstico, no entanto, é baixa e ambos os testes não são eficazes o suficiente para diferenciar de forma confiável entre condições benignas e malignas. Mesmo em unidades altamente especializadas, de todas as pacientes submetidas a cirurgia por suspeita de câncer de ovário, apenas cerca de 20% terão uma doença maligna. Esses achados reforçam a necessidade de novos testes diagnósticos, capazes de diferenciar melhor entre alterações ovarianas benignas e malignas. Isso possivelmente livraria completamente muitos pacientes de cirurgias desnecessárias e melhoraria a triagem de pacientes com tumores ovarianos malignos para unidades de oncologia ginecológica altamente especializadas.

Uma abordagem promissora para melhorar o diagnóstico diferencial de alterações ovarianas suspeitas foi estabelecida por Paul Speiser e Robert Zeillinger (Grupo de Oncologia Molecular, Departamento de Ginecologia Geral e Oncologia Ginecológica, Universidade Médica de Viena, Áustria) (EK 1148/2011). Essa abordagem é chamada de técnica ALPINE (Austrian Lavage Procedure for the Detection of tubal Intraepitelial Neoplasms) (manuscrito em preparação). Inclui uma lavagem da cavidade uterina e das trompas de Falópio proximais e análise subsequente deste fluido de lavagem para a presença de células pré-malignas e malignas.

Para a prova do princípio de que as células tumorais são eliminadas do câncer de ovário e podem ser encontradas nas lavagens da cavidade uterina, as lavagens uterinas foram coletadas antes de uma intervenção cirúrgica para suspeita de malignidade ovariana na instituição dos investigadores e na Universidade Católica de Leuven, Departamento de Obstetrícia e Ginecologia. Após a confirmação da malignidade, as alterações genéticas no gene TP53 e KRAS foram determinadas no tecido tumoral. Em um conjunto de 9 pacientes com câncer epitelial de ovário (EOC) e 1 metástase ovariana de carcinoma em anel de sinete, a presença dessas alterações genéticas foi examinada em amostras de lavagem, usando PCR de gotículas digitais (ddPCR). Dez alterações genéticas foram identificadas no tecido tumoral desses pacientes e 9/10 (90%) dessas alterações também foram detectadas no espécime de lavagem correspondente. As taxas de mutação variaram entre 0,01% e 39,65% em pacientes com EOC. Além disso, uma abordagem de filtro, seguida de coloração de imunofluorescência p53, foi estabelecida, confirmando a presença de células tumorais na amostra de lavagem de um paciente adicional.

Em uma etapa seguinte, amostras de lavado de 22 pacientes com carcinoma de ovário e, se aplicável, tecido tumoral correspondente, foram analisadas por sequenciamento profundo pelo grupo de Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, EUA). A presença de alterações genéticas, indicativas de câncer de ovário, pôde ser confirmada em 16/22 (72,7%) amostras de lavado. De 18 pacientes, tecidos tumorais correspondentes estavam disponíveis, mostrando a mesma mutação.

Esses resultados são a prova de que as células de câncer de ovário são eliminadas nas trompas de falópio e na cavidade uterina e podem ser coletadas por meio de nossa técnica ALPINE. O fato de células de câncer de ovário terem sido detectadas com alta sensibilidade na lavagem da cavidade uterina e das trompas proximais mostra que essa abordagem tem grande potencial no diagnóstico diferencial de massas ovarianas.