Kohdunontelon huuhtelu munasarja- ja munanjohtimen karsinooman diagnosointia varten – herkkyyden ja spesifisyyden tutkimus (LUDOC II)

Epiteliaalinen munasarjasyöpä (EOC) on yleisin kuolinsyy gynekologisten pahanlaatuisten kasvainten joukossa läntisissä sivistysmaissa, ja sen esiintyvyyden arvioidaan olevan Euroopassa ja Yhdysvalloissa 752 600 vuonna 2007 ja 59 828 kuolemaa vuosittain. Potilaiden hoito ja eloonjääminen riippuvat ensisijaisesti taudin vaiheesta. Kaikista EOC-potilaista vain 25 % diagnosoidaan varhaisessa vaiheessa, kun kasvain rajoittuu lantioon. Näissä tapauksissa viiden vuoden eloonjäämisaste on 80–90 prosenttia, ja sairaus voidaan usein parantaa leikkauksen ja kemoterapian yhdistelmällä. Valitettavasti lähes 75 prosentilla sairastuneista naisista on pitkälle edennyt sairaus, jossa etäpesäkkeet ovat levinneet koko vatsaonteloon tai retroperitoneaalisiin imusolmukkeisiin diagnoosin aikaan. viiden vuoden eloonjäämisluvut laskevat 10–30 prosenttiin edenneen taudin tapauksessa suurimmasta kirurgisesta vaivasta ja yhdistelmäkemoterapiasta huolimatta.

Tällä hetkellä EOC:sta epäiltyjen pahanlaatuisten ja hyvänlaatuisten munasarjapatologioiden välinen nykyaikainen erotusdiagnoosi perustuu pääasiassa transvaginaaliseen ultraäänitutkimukseen ja seerumin syöpäantigeenimittauksiin (CA-125). Näiden diagnostisten työkalujen spesifisyys on kuitenkin alhainen, eivätkä molemmat testit ole tarpeeksi tehokkaita erottamaan luotettavasti hyvänlaatuiset ja pahanlaatuiset tilat. Jopa pitkälle erikoistuneissa yksiköissä kaikista epäillyn munasarjasyövän vuoksi leikatuista potilaista vain noin 20 prosentilla on pahanlaatuinen sairaus. Nämä havainnot korostavat tarvetta uusille diagnostisille testeille, jotka pystyvät erottamaan paremmin hyvänlaatuiset ja pahanlaatuiset munasarjamuutokset. Tämä mahdollisesti poistaisi monet potilaat tarpeettomista leikkauksista kokonaan ja parantaisi pahanlaatuisia munasarjakasvareita sairastavien potilaiden jakamista pitkälle erikoistuneisiin gynekologisiin onkologian yksiköihin.

Paul Speiser ja Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Yleisen gynekologian ja gynekologisen onkologian osasto, Wienin lääketieteellinen yliopisto, Itävalta) ovat kehittäneet lupaavan lähestymistavan epäilyttävien munasarjamuutosten erotusdiagnoosin parantamiseksi (EK 1148/2011). Tätä lähestymistapaa kutsutaan ALPINE-tekniikaksi (Austrian Lavage Procedure for the Detection of munanjoen intraepiteliaaliset kasvaimet) (käsikirjoitus valmisteilla). Se sisältää kohdun ontelon ja proksimaalisten munanjohtimien huuhtelun ja tämän huuhtelunesteen myöhemmän analyysin pahanlaatuisten ja pahanlaatuisten solujen esiintymisen varalta.

Periaatteen osoittamiseksi, että kasvainsoluja erittyy munasarjasyövästä ja niitä löytyy kohdunontelon huuhtelunesteistä, kohdun huuhteluvedet kerättiin ennen kirurgista toimenpidettä epäillyn munasarjasyövän vuoksi tutkijalaitoksessa ja Leuvenin katolisen yliopiston osastolla. synnytys- ja gynekologiasta. Pahanlaatuisuuden vahvistamisen jälkeen kasvainkudoksessa määritettiin geneettiset muutokset TP53- ja KRAS-geenissä. Sarjassa, jossa oli 9 epiteelin munasarjasyöpäpotilasta (EOC) ja 1 sinettirengaskarsinooman munasarjaetäpesäke, näiden geneettisten muutosten läsnäoloa tutkittiin huuhtelunäytteissä käyttämällä digitaalista pisara-PCR:ää (ddPCR). Näiden potilaiden kasvainkudoksessa havaittiin kymmenen geneettistä muutosta ja 9/10 (90 %) näistä muutoksista havaittiin myös vastaavassa huuhtelunäytteessä. Mutaatioluvut olivat välillä 0,01–39,65 % EOC-potilailla. Lisäksi perustettiin suodatinlähestymistapa, jota seurasi p53-immunofluoresenssivärjäys, mikä vahvisti kasvainsolujen läsnäolon yhden lisäpotilaan huuhtelunäytteessä.

Seuraavassa vaiheessa Bert Vogelsteinin ryhmä (Johns Hopkins University, Baltimore, USA) analysoi 22 munasarjasyöpäpotilaan huuhtelunäytteet ja soveltuvin osin vastaavan kasvainkudoksen syväsekvensoinnilla. Geneettisten muutosten esiintyminen, jotka viittaavat munasarjasyöpään, voitiin vahvistaa 16/22 (72,7 %) huuhtelunäytteestä. 18 potilaasta oli saatavilla vastaavia kasvainkudoksia, joissa oli sama mutaatio.

Nämä tulokset ovat todiste siitä, että munasarjasyöpäsolut erittyvät munanjohtimiin ja kohdun onteloon, ja ne voidaan kerätä ALPINE-tekniikkamme avulla. Se tosiasia, että munasarjasyöpäsolut havaittiin erittäin herkästi kohdun ontelon ja proksimaalisten putkien huuhtelussa, osoittaa, että tällä lähestymistavalla on suuri potentiaali munasarjamassojen erotusdiagnoosissa.