Lavage der Gebärmutterhöhle zur Diagnose von Eierstock- und Eileiterkarzinom - Untersuchung der Sensitivität und Spezifität (LUDOC II)

Epithelialer Ovarialkrebs (EOC) ist die häufigste Todesursache unter den gynäkologischen Malignomen in westlichen zivilisierten Ländern, mit einer geschätzten Prävalenz in Europa und den USA von 752.600 im Jahr 2007 und 59.828 Todesfällen jährlich. Behandlung und Überleben der Patienten hängen in erster Linie vom Stadium der Erkrankung ab. Von allen EOC-Patienten werden nur 25 % in einem frühen Stadium diagnostiziert, während der Tumor auf das Becken beschränkt ist. In diesen Fällen beträgt die 5-Jahres-Überlebensrate 80 % bis 90 % und die Krankheit kann oft durch die Kombination von Operation und Chemotherapie geheilt werden. Leider haben fast 75 % der betroffenen Frauen zum Zeitpunkt der Diagnose eine Erkrankung im fortgeschrittenen Stadium mit metastasierter Ausbreitung in der gesamten Bauchhöhle oder in retroperitonealen Lymphknoten; Die 5-Jahres-Überlebensraten sinken bei fortgeschrittener Erkrankung trotz maximaler chirurgischer Anstrengungen und kombinierter Chemotherapie auf 10–30 %.

Gegenwärtig stützt sich die hochmoderne Differenzialdiagnose zwischen bösartigen und gutartigen Ovarialpathologien, die EOC-verdächtig sind, hauptsächlich auf transvaginale Ultraschall- und Serum-Krebs-Antigen (CA-125)-Messungen. Die Spezifität dieser Diagnoseinstrumente ist jedoch gering, und beide Tests sind nicht effektiv genug, um zuverlässig zwischen gutartigen und bösartigen Erkrankungen zu unterscheiden. Selbst in hochspezialisierten Abteilungen werden von allen Patientinnen, die wegen Verdacht auf Eierstockkrebs operiert werden, nur etwa 20 % eine bösartige Erkrankung haben. Diese Ergebnisse unterstreichen die Notwendigkeit neuer diagnostischer Tests, die gutartige und bösartige Ovarialveränderungen besser unterscheiden können. Dies würde viele Patientinnen möglicherweise vollständig vor unnötigen Operationen bewahren und die Triage von Patientinnen mit bösartigen Ovarialtumoren zu hochspezialisierten gynäko-onkologischen Einheiten verbessern.

Ein vielversprechender Ansatz zur Verbesserung der Differenzialdiagnostik bei verdächtigen Ovarialveränderungen wurde von Paul Speiser und Robert Zeillinger (Arbeitsgruppe Molekulare Onkologie, Universitätsklinik für Allgemeine Gynäkologie und Gynäkologische Onkologie, Medizinische Universität Wien, Österreich) etabliert (EK 1148/2011). Dieser Ansatz wird als ALPINE-Technik (Austrian Lavage Procedure for the Detection of tubal Intraepithelial Neoplasms) bezeichnet (Manuskript in Vorbereitung). Es umfasst eine Spülung der Gebärmutterhöhle und der proximalen Eileiter und eine anschließende Analyse dieser Spülflüssigkeit auf das Vorhandensein von prämalignen und bösartigen Zellen.

Für den prinzipiellen Nachweis, dass Tumorzellen von Eierstockkrebs ausgeschieden werden und in den Lavagen der Gebärmutterhöhle zu finden sind, wurden vor einem chirurgischen Eingriff bei Verdacht auf ovarielle Malignität an der Untersuchungseinrichtung und an der Katholischen Universität Leuven, Abteilung, Uteruslavagen gesammelt für Geburtshilfe und Gynäkologie. Nach Bestätigung der Malignität wurden im Tumorgewebe genetische Veränderungen im TP53- und KRAS-Gen festgestellt. Bei einer Gruppe von 9 Patienten mit epithelialem Ovarialkarzinom (EOC) und 1 Ovarialmetastasen eines Siegelringkarzinoms wurde das Vorhandensein dieser genetischen Veränderungen in Lavage-Proben unter Verwendung von digitaler Tröpfchen-PCR (ddPCR) untersucht. Im Tumorgewebe dieser Patienten wurden zehn genetische Veränderungen identifiziert und 9/10 (90 %) dieser Veränderungen wurden auch in der entsprechenden Lavage-Probe nachgewiesen. Mutationsraten lagen bei EOC-Patienten im Bereich zwischen 0,01 % und 39,65 %. Darüber hinaus wurde ein Filteransatz, gefolgt von einer p53-Immunfluoreszenzfärbung etabliert, was das Vorhandensein von Tumorzellen in der Lavage-Probe eines weiteren Patienten bestätigte.

In einem nächsten Schritt wurden Lavage-Proben von 22 Ovarialkarzinom-Patientinnen und ggf. entsprechendes Tumorgewebe durch Tiefensequenzierung durch die Gruppe von Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, USA) analysiert. Das Vorhandensein genetischer Veränderungen, die auf Eierstockkrebs hindeuten, konnte in 16/22 (72,7 %) Lavage-Proben bestätigt werden. Von 18 Patienten lagen entsprechende Tumorgewebe vor, die die gleiche Mutation aufwiesen.

Diese Ergebnisse sind ein Beweis dafür, dass Eierstockkrebszellen in die Eileiter und die Gebärmutterhöhle abgegeben werden und mit unserer ALPINE-Technik gesammelt werden können. Die Tatsache, dass Ovarialkarzinomzellen mit hoher Sensitivität in der Lavage der Gebärmutterhöhle und der proximalen Tuben nachgewiesen wurden, zeigt, dass dieser Ansatz ein großes Potenzial in der Differentialdiagnose von Ovarialtumoren hat.