Lavage af livmoderhulen til diagnosticering af ovarie- og tubalcarcinom - undersøgelse af sensitivitet og specificitet (LUDOC II)

Epitelial ovariecancer (EOC) er den førende dødsårsag blandt gynækologiske maligniteter i vestlige civiliserede lande, med en estimeret prævalens i Europa og USA på 752.600 i 2007 og 59.828 dødsfald årligt. Behandling og overlevelse af patienterne afhænger primært af sygdomsstadiet. Af alle EOC-patienter er kun 25% diagnosticeret på et tidligt stadium, mens tumoren er begrænset til bækkenet. I disse tilfælde er den femårige overlevelsesrate 80% til 90%, og sygdommen kan ofte helbredes ved en kombination af kirurgi og kemoterapi. Desværre har næsten 75 % af de berørte kvinder sygdom i fremskreden stadium med metastatisk spredning gennem bughulen eller til retroperitoneale lymfeknuder på diagnosetidspunktet; fem-års overlevelse falder til 10%-30% for fremskreden sygdom, på trods af maksimal kirurgisk indsats og kombinationskemoterapi.

I øjeblikket er den nyeste differentialdiagnose mellem maligne og benigne ovariepatologier, der er mistænkelige for EOC, overvejende afhængige af transvaginal ultralyd og målinger af serumcancerantigen (CA-125). Specificiteten af ​​disse diagnostiske værktøjer er imidlertid lav, og begge tests er ikke effektive nok til pålideligt at skelne mellem benigne og ondartede tilstande. Selv i højt specialiserede enheder vil kun omkring 20 % af alle patienter, der bliver opereret for mistanke om ovariecancer, have en ondartet sygdom. Disse resultater understreger behovet for nye diagnostiske tests, der bedre kan skelne mellem benigne og ondartede ovarieforandringer. Dette ville muligvis udskyde mange patienter fra unødvendig operation fuldstændigt og forbedre triage af patienter med ondartede ovarietumorer til højt specialiserede gynækologiske onkologiske enheder.

En lovende tilgang til forbedring af differentialdiagnose af mistænkelige ovarieforandringer er blevet etableret af Paul Speiser og Robert Zeillinger (Molecular Oncology Group, Department of General Gynecology and Gynaecologic Oncology, Medical University of Vienna, Austria) (EK 1148/2011). Denne tilgang kaldes ALPINE-teknikken (østrigsk lavage-procedure til påvisning af tubale intraepiteliale neoplasmer) (manuskript under udarbejdelse). Det omfatter en skylning af livmoderhulen og de proksimale æggeledere og efterfølgende analyse af denne skyllevæske for tilstedeværelsen af ​​præ-maligne og ondartede celler.

For principielt bevis på, at tumorceller udskilles fra kræft i æggestokkene og kan findes i udskylninger af livmoderhulen, blev livmoderskylninger indsamlet før et kirurgisk indgreb for mistanke om ovarie-malignitet på efterforskernes institution og på det katolske universitet Leuven, afdeling for obstetrik og gynækologi. Efter at malignitet var bekræftet, blev genetiske ændringer i TP53- og KRAS-genet bestemt i tumorvæv. I et sæt af 9 epiteliale ovariecancerpatienter (EOC) og 1 ovariemetastaser af et signetringcarcinom blev tilstedeværelsen af ​​disse genetiske ændringer undersøgt i skylleprøver ved hjælp af digital dråbe-PCR (ddPCR). Ti genetiske ændringer blev identificeret i tumorvæv hos disse patienter, og 9/10 (90%) af disse ændringer blev også påvist i den tilsvarende skylleprøve. Mutationsraterne var i intervallet mellem 0,01 % og 39,65 % hos EOC-patienter. Endvidere blev der etableret en filtertilgang efterfulgt af p53-immunfluorescensfarvning, hvilket bekræfter tilstedeværelsen af ​​tumorceller i udskylningsprøven fra en yderligere patient.

I et næste trin blev skylleprøver af 22 ovariekarcinompatienter, og hvis relevant tilsvarende tumorvæv, analyseret gennem dyb sekventering af gruppen af ​​Bert Vogelstein (Johns Hopkins University, Baltimore, USA). Tilstedeværelsen af ​​genetiske ændringer, som er indikativ for ovariecancer, kunne bekræftes i 16/22 (72,7%) skylleprøver. Af 18 patienter var tilsvarende tumorvæv tilgængeligt, som viste den samme mutation.

Disse resultater er bevis på, at æggestokkræftceller kastes ind i æggelederne og livmoderhulen og kan opsamles gennem vores ALPINE-teknik. Det faktum, at ovariecancerceller blev påvist med høj følsomhed i udskylningen af ​​livmoderhulen og proksimale rør, viser, at denne tilgang har et stort potentiale i differentialdiagnosticering af ovariemasser.