Effektiviteten av tre forskjellige munnskyllinger i tannplakkkontroll og tidlig sårheling

Materialer og metoder

Pasientregistrering og alle kliniske prosedyrer ble utført ved Institutt for periodontologi, School of Dentistry, National and Kapodistrian University of Athens, Hellas.

Kliniske prosedyrer:

Alle kirurgiske inngrep ble utført av første- og tredjeårsstudenter. Supragingival debridement og polering av det opererte området ble utført rett før operasjonen. Ved gjenværende operasjoner for eliminering/reduksjon av periodontal lomme ble det påført intrasulkulære snitt etterfulgt av papillbevarende snitt ved interdentale områder. I tilfeller av kroneforlengelse ble resektive gingivalsnitt påført i nærvær av tilstrekkelig bredde av keratinisert vev (≥ 3 mm). Etter klaffheving ble rotoverflatene grundig debridert med instrumenter og ultralydenheter. Ostektomi / osteoplastikk med karbidbor ble utført, som ansett hensiktsmessig. Bukkale og palatale/linguale klaffer ble fullt tilpasset hverandre og suturert sammen med monofilament sakte resorberbar sutur. Periodontale bandasjer ble ikke brukt. Ingen systemiske antibiotika ble foreskrevet. Ibuprofen 400 mg, tre ganger daglig i 4 dager, ble foreslått umiddelbart etter kirurgisk inngrep. Røykere ble rådet til å slutte å røyke den første uken etter kirurgi. Suturer ble fjernet på den 7. postoperative dagen. I løpet av denne perioden ble det ikke registrert utilsiktet tap av suturer.

Randomisering og tildelingsskjul:

Forsøkspersonene ble tilfeldig tildelt en av tre grupper ved hjelp av en datastyrt tildelingsprosedyre (Random Sequence Generator, www.random.org) generert av sensor A.G. Hvert forsøksperson fikk et identisk tall mellom 1 og 42. Deltakerne fikk flasker med en av de tre løsningene som ble undersøkt. Verken pasienter eller klinikere (kirurger og undersøker A.G.) ble informert om identiteten til munnskyll som ble administrert i hvert enkelt tilfelle (dobbelt - blindt design). Maskerte flasker ble gitt til deltakerne av en tredje uavhengig person som ikke var tannlege (medlem av Postgraduate Clinics assistansepersonell).

Etter kirurgisk vedlikeholdsprotokoll:

I løpet av de første 14 postoperative dagene ble deltakerne instruert om å skylle med 15 ml av den administrerte løsningen i ett minutt, to ganger daglig.

I samme periode avstod forsøkspersonene fra mekanisk plakkfjerning ved de opererte områdene.

Reproduserbarhet for intra-eksaminator:

Før studiestart ble undersøkeren (A.G.) som utførte målingene kalibrert for å etablere intra-undersøker reproduserbarhet. Kalibreringer ble utført med to personer som ikke var inkludert i studien. Under postoperativt vedlikehold ved bruk av 0,12 % klorheksidin, på den 7. postkirurgiske dagen, ble tidlig sårhelingsindeks (EHI) og plakkindeks (PI) registrert ved to separate anledninger i løpet av samme dag, dog med minst 8 timers mellomrom. Intra-klasse korrelasjonsanalyse ble brukt for å beregne intra-eksaminator enighet for gjentatte målinger. Kalibreringen ble akseptert dersom begge målingene var like med et avvik på +/- 10 % (intra-klasse korrelasjonskoeffisient > 0,9).

Mikrobiologisk vurdering:

Supragingival dental plakk samleprøver ble samlet på den 14. postoperative dagen fra begge interproksimale tannoverflater henholdsvis til interdentalpapillen med den høyeste EHI-verdien, ved bruk av kyretter. Samlede prøver ble samlet inn individuelt i 150 μl TE-bufferløsning. Prøver ble lagret ved -80 til behandling, som ble utført ved Laboratory of Cell and Matrix Pathobiology ved Institute of Biosciences and Applications, National Center for Scientific Research (N.C.S.R.), Athen, Hellas. Bakteriell genomisk DNA ble isolert og renset ved bruk av PureLink® Genomic DNA Μini Kit, etter Gram (+) bakteriell cellelysis produsentens protokoll. Renset DNA-konsentrasjoner ble bestemt spektrofotometrisk (NanoDrop 1000). Prøver ble analysert ved bruk av kvantitativ sanntids-PCR (qPCR) for å evaluere det totale bakterietallet i hver samlet prøve. qPCR ble utført med påføring av et sett med universelle primere (fremover primer: 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGT 3' og revers primer: 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3', med en amplikonstørrelse på 466 basepar), rapportert å detektere DNA-sekvenser for 16S-kodende ribosomal underenhet av minst 50 forskjellige bakteriearter (aerob og anaerob Gram positiv og Gram negativ) og SYBR Green Ι fluorescerende sonde. Seriefortynninger av DNA-ekstrakt av rene bakteriekulturer av Escherichia coli ble utført for å generere en standardkurve for qPCR. Reaksjoner ble utført i 40 sykluser ved 94 °C i 30 sekunder, 58 °C i 45 sekunder og 72 °C i 10 minutter i en Light Cycler 96 qPCR-enhet. Resultatene ble analysert ved å bruke Light Cycler 96 1.1-programvaren. Totalt antall bakterier for hver prøve uttrykkes som total bakteriell DNA-masse (ng) og antall bakteriekopier (x106).

Eksempelstørrelsesberegning:

Prøvestørrelse ble estimert gjennom enveis ANOVA-baserte beregninger, forutsatt at den minste klinisk signifikante forskjellen er én enhet i median EHI-verdier etter 14 dager mellom minst ett par grupper. 14 pasienter for hver gruppe var nødvendig for 80 % kraftoppnåelse og for påvisning av medianforskjeller i under evalueringsparametere blant gruppene.

Statistisk analyse:

Demografiske og kliniske karakteristika for utvalget er presentert etter gruppe i tabeller som inneholder absolutte og relative (%) frekvenser for kategoriske variabler og medianer og interkvartilområder (Median - IQR) for kvantitative variabler. Mellom grupper forskjeller i disse egenskapene ble vurdert gjennom Fishers eksakte tester for kategoriske variabler og Kruskal-Wallis tester for kvantitative. Fordelingene av indeksene av interesse (Tidlig sårhelingsindeks - EHI, Plakkindeks - PI, Plakkarealindeks - PA%) ble oppsummert gjennom medianer og IQR.

Indeksens data ble analysert gjennom lineære eller generaliserte lineære blandede modeller som tok hensyn til potensielle korrelasjoner mellom flere målinger tatt på samme individ. Spesielt for analysen av EHI og PI ble ordinære logistiske regresjonsmodeller brukt. For PA%-indeksen, som var en andel fra 0% til 100%, ble en lineær modell brukt etter en logit-transformasjon av den avhengige variabelen. Modellvalg, inkludert kontroller for potensielle interaksjonseffekter, for de endelige multivariable modellene var basert på sannsynlighetsforholdstester.

Totale mikrobielle tellingsforskjeller mellom grupper eller i forhold til andre prøvekarakteristikker ble analysert ved bruk av lineær regresjonsmodell etter log10-transformasjon. Resultatene presenteres som relative forskjeller %.

P-verdier mindre enn 0,05 ble ansett som statistisk signifikante. Alle analyser ble utført ved bruk av statistisk pakke Stata 13.1 (Stata Corp., USA).