歯垢のコントロールと初期の創傷治癒における 3 つの異なるマウスリンスの有効性

材料および方法

患者の登録およびすべての臨床処置は、ギリシャのアテネ国立カポディストリアン大学歯学部歯周病学科で実施されました。

臨床手順:

すべての外科的介入は、1 年生と 3 年生の大学院生によって行われました。 手術直前に歯肉縁上デブリードマンと手術部位の研磨を行った。 残存歯周ポケット除去・縮小手術の場合、歯溝内切開に続いて歯間部の乳頭温存切開を行います。 歯冠延長の症例では、十分な幅の角化組織 (≧ 3mm) が存在する状態で、歯肉の切除切開が適用されました。 皮弁を持ち上げた後、歯根表面を器具と超音波装置で徹底的に創面切除しました。 必要に応じて、カーバイドバーを使用した骨切除術/骨形成術が適用されました。 頬側および口蓋/舌側のフラップは互いに完全に適合し、モノフィラメントのゆっくりと再吸収可能な縫合糸で縫合されました。 歯周ドレッシングは使用しませんでした。 全身性抗生物質は処方されませんでした。 イブプロフェン 400mg を 1 日 3 回、4 日間投与することが、外科的介入の直後に提案されました。 喫煙者は、手術後最初の 1 週間は禁煙するように勧められました。 術後7日目に抜糸しました。 その間、偶発的な縫合糸の喪失は記録されませんでした。

ランダム化と割り当ての隠蔽:

被験者は、コンピュータ化された割り当て手順（Random Sequence Generator、www.random.org）を使用して、3 つのグループのうちの 1 つにランダムに割り当てられました。 審査官A.G.によって生成されました。 各被験者には、1 から 42 までの同じ番号が割り当てられました。 参加者は、調査中の 3 つのソリューションのいずれかが入ったボトルを受け取りました。 患者も臨床医 (外科医と検査官 A.G.) も、それぞれの場合に投与された洗口剤の正体について知らされませんでした (二重盲検法)。 マスクされたボトルは、歯科医ではない第 3 の独立した人 (大学院クリニックの補助スタッフのメンバー) から参加者に渡されました。

術後維持プロトコル：

手術後の最初の 14 日間、参加者は 1 日 2 回、投与された溶液 15ml で 1 分間すすぐように指示されました。

同じ期間中、被験者は手術部位で機械的なプラーク除去を控えました。

検査者内再現性:

研究の開始前に、測定を行った検査者 (A.G.) は、検査者内の再現性を確立するために較正されました。 キャリブレーションは、研究に含まれていない 2 人の被験者で実行されました。 0.12% クロルヘキシジンを使用した術後維持中、術後 7 日目に早期創傷治癒指数 (EHI) とプラーク指数 (PI) を同じ日に 2 回記録しましたが、少なくとも 8 時間間隔をあけて記録しました。 クラス内相関分析を使用して、繰り返し測定の試験官内合意を計算しました。 両方の測定値が +/- 10% (クラス内相関係数 > 0.9) の偏差で類似している場合、キャリブレーションは受け入れられました。

微生物学的評価:

キュレットを使用して、術後 14 日目に両方の近位歯表面からそれぞれ最高の EHI 値を持つ歯間乳頭まで、歯肉縁上の歯垢のプールされたサンプルを収集しました。 プールされたサンプルは、150μlのTE緩衝液に個別に収集されました。 サンプルは、ギリシャのアテネにある国立科学研究センター (N.C.S.R.) の生物科学および応用研究所の細胞およびマトリックス病理生物学研究所で行われる処理まで、-80 で保存されました。 細菌のゲノム DNA は、グラム (+) 細菌細胞溶解メーカーのプロトコルに従って、PureLink® Genomic DNA μini Kit を使用して分離および精製されました。 精製された DNA 濃度は、分光測光法 (NanoDrop 1000) で決定されました。 プールされた各サンプルの総細菌数を評価するために、定量的リアルタイム PCR (qPCR) を使用して標本を分析しました。 qPCR は、一連のユニバーサル プライマー (フォワード プライマー: 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGT 3' およびリバース プライマー: 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3'、466 塩基対のアンプリコン サイズ) を適用して実施され、16S をコードする遺伝子の DNA 配列を検出することが報告されています。少なくとも 50 の異なる細菌種 (好気性および嫌気性グラム陽性およびグラム陰性) のリボソーム サブユニットおよび SYBR Green I 蛍光プローブ。 qPCRの検量線を作成するために、大腸菌の純粋な細菌培養物のDNA抽出物の段階希釈を行いました。 Light Cycler 96 qPCR デバイスで、94 °C で 30 秒間、58 °C で 45 秒間、72 °C で 10 分間、40 サイクルの反応を行いました。 Light Cycler 96 1.1 ソフトウェアを使用して結果を分析しました。 各サンプルの総細菌数は、総細菌 DNA 質量 (ng) および細菌コピー数 (x106) として表されます。

サンプルサイズの計算:

最小の臨床的に有意な差は、少なくとも 1 対のグループ間の 14 日間の EHI 値の中央値の 1 単位であると仮定して、サンプル サイズは一方向 ANOVA ベースの計算によって推定されました。 各グループに 14 人の患者が必要で、80% の検出力を達成し、グループ間の評価パラメータの中央値差を検出しました。

統計分析：

サンプルの人口統計学的および臨床的特徴は、カテゴリ変数の絶対および相対 (%) 頻度と、量的変数の中央値および四分位範囲 (中央値 - IQR) を含む表にグループ別に表示されます。 これらの特性のグループ間の違いは、カテゴリ変数についてはフィッシャーの正確確率検定、量的変数についてはクルスカル・ウォリス検定によって評価されました。 関心のある指標 (早期創傷治癒指数 - EHI、プラーク指数 - PI、プラーク面積指数 - PA%) の分布は、中央値と IQR によって要約されました。

指標のデータは、同じ個人に対して行われた複数の測定値間の潜在的な相関関係を考慮して、線形または一般化線形混合モデルを通じて分析されました。 特に、EHI と PI の分析では、順序ロジスティック回帰モデルが使用されました。 0% から 100% の範囲の比率である PA% インデックスについては、従属変数のロジット変換後に線形モデルが使用されました。 潜在的な交互作用効果のチェックを含む、最終的な多変数モデルのモデル選択は、尤度比検定に基づいていました。

グループ間または他のサンプル特性に関連する総微生物数の違いは、log10 変換後に線形回帰モデルを使用して分析されました。 結果は相対差 % として表示されます。

0.05 未満の P 値は、統計的に有意であると見なされました。 すべての分析は、統計パッケージStata 13.1（Stata Corp.、USA）を使用して実行されました。