Effektiviteten af ​​tre forskellige mundskylninger i tandplakskontrol og tidlig sårheling

Materialer og metoder

Patienternes indskrivning og alle kliniske procedurer blev udført på afdelingen for parodontologi, tandlægeskolen, det nationale og kapodistrian universitet i Athen, Grækenland.

Kliniske procedurer:

Alle kirurgiske indgreb blev udført af første og tredje års postgraduate beboere. Supragingival debridement og polering af det opererede område blev udført umiddelbart før operationen. I tilfælde af resterende periodontale lommeeliminering/-reduktionsoperationer blev der påført intrasulkulære snit efterfulgt af papillekonserveringssnit i interdentale områder. I tilfælde af kroneforlængelse blev der påført resektive tandkødssnit i nærværelse af tilstrækkelig bredde af keratiniseret væv (≥ 3 mm). Efter klaphøjde blev rodoverflader grundigt debrideret med instrumenter og ultralydsanordninger. Ostektomi / osteoplastik med hårdmetalbor blev udført, alt efter hvad der blev anset for hensigtsmæssigt. Bukkale og palatale/linguale flapper var fuldt tilpasset hinanden og sutureret sammen med monofilament langsomt resorberbar sutur. Parodontale bandager blev ikke brugt. Der blev ikke ordineret systemiske antibiotika. Ibuprofen 400 mg, tre gange dagligt i 4 dage, blev foreslået umiddelbart efter kirurgisk indgreb. Rygere blev rådet til at holde op med at ryge i den første postkirurgiske uge. Suturer blev fjernet på den 7. postoperative dag. I denne periode blev der ikke registreret noget utilsigtet tab af suturer.

Randomisering og tildelingsskjul:

Forsøgspersoner blev tilfældigt tildelt en af ​​tre grupper ved hjælp af en computeriseret tildelingsprocedure (Random Sequence Generator, www.random.org) genereret af eksaminator A.G. Hvert forsøgsperson fik et identisk tal mellem 1 og 42. Deltagerne modtog flasker med en af ​​de tre løsninger, der blev undersøgt. Hverken patienter eller klinikere (kirurger og undersøger A.G.) blev informeret om identiteten af ​​mundskyllemiddel, der blev administreret i hvert enkelt tilfælde (dobbelt - blindt design). Maskerede flasker blev givet til deltagerne af en tredje uafhængig person, som ikke var tandlæge (medlem af Postgraduate Clinics assistancestab).

Post-kirurgisk vedligeholdelsesprotokol:

I løbet af de første 14 postoperative dage blev deltagerne instrueret i at skylle med 15 ml af den administrerede opløsning i et minut, to gange dagligt.

I samme periode afstod forsøgspersonerne fra enhver mekanisk plakfjernelse på de opererede områder.

Intra-eksaminator reproducerbarhed:

Før undersøgelsens begyndelse blev den eksaminator (A.G.), der udførte målingerne, kalibreret for at etablere intra-eksaminator reproducerbarhed. Kalibreringer blev udført med to forsøgspersoner, der ikke var inkluderet i undersøgelsen. Under postoperativ vedligeholdelse med 0,12 % klorhexidin, på den 7. postkirurgiske dag, blev tidlig sårhelingsindeks (EHI) og plakindeks (PI) registreret ved to separate lejligheder i løbet af den samme dag, dog med mindst 8 timers mellemrum. Intra-klasse korrelationsanalyse blev brugt til at beregne intra-eksaminator overensstemmelse for gentagne målinger. Kalibreringen blev accepteret, hvis begge målinger var ens med en afvigelse på +/- 10 % (intra-klasse korrelationskoefficient > 0,9).

Mikrobiologisk vurdering:

Supragingival tandplak poolede prøver blev indsamlet på den 14. postoperative dag fra begge interproksimale tandoverflader henholdsvis til den interdentale papilla med den højeste EHI-værdi ved hjælp af curetter. Poolede prøver blev individuelt opsamlet i 150 μl TE-bufferopløsning. Prøver blev opbevaret ved -80°C indtil behandling, som blev udført på Laboratory of Cell and Matrix Pathobiology ved Institute of Biosciences and Applications, National Center for Scientific Research (N.C.S.R.), Athen, Grækenland. Bakteriel genomisk DNA blev isoleret og oprenset under anvendelse af PureLink® Genomic DNA Μini Kit, ifølge Gram (+) bakteriel cellelyse producentens protokol. Oprensede DNA-koncentrationer blev bestemt spektrofotometrisk (NanoDrop 1000). Prøver blev analyseret ved hjælp af kvantitativ realtids-PCR (qPCR) for at evaluere det samlede bakterietal i hver poolet prøve. qPCR blev udført med påføring af et sæt universelle primere (fremadgående primer: 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGT 3' og omvendt primer: 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3', med en amplikonstørrelse på 466 basepar), rapporteret at detektere DNA-sekvenser af 16S-kodende ribosomale underenhed af mindst 50 forskellige bakteriearter (aerobe og anaerobe grampositive og gramnegative) og SYBR Green Ι fluorescerende probe. Seriefortyndinger af DNA-ekstrakt af rene bakteriekulturer af Escherichia coli blev udført for at generere en standardkurve for qPCR. Reaktioner blev udført i 40 cykler ved 94 °C i 30 sekunder, 58 °C i 45 sekunder og 72 °C i 10 minutter i en Light Cycler 96 qPCR-enhed. Resultaterne blev analyseret under anvendelse af Light Cycler 96 1.1-softwaren. Det samlede bakterietal for hver prøve udtrykkes som samlet bakteriel DNA-masse (ng) og antal bakterielle kopier (x106).

Beregning af prøvestørrelse:

Prøvestørrelsen blev estimeret gennem envejs ANOVA-baserede beregninger, idet det antages, at den mindste klinisk signifikante forskel er én enhed i median EHI-værdier efter 14 dage mellem mindst et par grupper. 14 patienter for hver gruppe var nødvendige for at opnå 80 % effekt og til medianforskelle påvisning i parametre under evaluering blandt grupperne.

Statistisk analyse:

Demografiske og kliniske karakteristika for prøven er præsenteret efter gruppe i tabeller, der indeholder absolutte og relative (%) frekvenser for kategoriske variable og medianer og interkvartilintervaller (Median - IQR) for kvantitative variable. Mellem grupper forskelle i disse karakteristika blev vurderet gennem Fishers eksakte test for kategoriske variable og Kruskal-Wallis test for kvantitative. Fordelingerne af indekserne af interesse (Tidlig sårhelingsindeks - EHI, Plaque-indeks - PI, Plaque-arealindeks - PA%) blev opsummeret gennem medianer og IQR'er.

Indeksens data blev analyseret gennem lineære eller generaliserede lineære blandede modeller under hensyntagen til de potentielle korrelationer mellem flere målinger taget på det samme individ. Især til analysen af ​​EHI og PI blev ordinære logistiske regressionsmodeller brugt. For PA%-indekset, som var en andel varierende fra 0% til 100%, blev en lineær model brugt efter en logit-transformation af den afhængige variabel. Modelvalg, herunder kontrol for potentielle interaktionseffekter, for de endelige multivariable modeller var baseret på sandsynlighedsforholdstest.

Totale mikrobielle tællingsforskelle mellem grupper eller i forhold til andre prøvekarakteristika blev analyseret ved hjælp af lineær regressionsmodel efter log10-transformation. Resultater præsenteres som relative forskelle %.

P-værdier mindre end 0,05 blev betragtet som statistisk signifikante. Alle analyser blev udført under anvendelse af den statistiske pakke Stata 13.1 (Stata Corp., USA).