Három különböző szájöblítő hatékonysága a foglepedék-szabályozásban és a korai sebgyógyulásban

Anyagok és metódusok

A betegek felvételét és az összes klinikai eljárást a görögországi Athén Nemzeti és Kapodisztriai Egyetem Fogorvosi Iskola Parodontológiai Osztályán végezték.

Klinikai eljárások:

Minden sebészeti beavatkozást első és harmadéves posztgraduális rezidensek végeztek. Közvetlenül a műtét előtt megtörtént a szupragingivális debridement és a műtött terület polírozása. A reziduális periodontális zseb eliminációs / redukciós műtétek esetén intrasulcularis bemetszések, majd a fogközi területeken papilla-megőrző bemetszések kerültek alkalmazásra. Koronahosszabbítás esetén megfelelő szélességű (≥ 3 mm) keratinizált szövet jelenlétében reszektív ínymetszéseket alkalmaztunk. A lebeny megemelése után a gyökérfelületeket műszerekkel és ultrahangos eszközökkel alaposan megtisztítottuk. A megfelelőnek ítélt módon csonteltávolítást/oszteoplasztikát alkalmaztak keményfém fúrókkal. A bukkális és palatális/nyelvi lebenyeket teljesen egymáshoz igazítottuk, és monofil, lassan felszívódó varrattal varrtuk össze. Parodontális kötszert nem használtak. Nem írtak fel szisztémás antibiotikumot. A sebészeti beavatkozás után azonnal 400 mg ibuprofént javasoltak naponta háromszor 4 napon keresztül. A dohányosoknak azt tanácsolták, hogy a műtét utáni első héten hagyják abba a dohányzást. A varratokat a műtét utáni 7. napon távolítottuk el. Ezalatt az időszak alatt nem jegyezték fel a varratok véletlen elvesztését.

Randomizálás és kiosztás elrejtése:

Az alanyokat véletlenszerűen besorolták a három csoport egyikébe számítógépes hozzárendelési eljárással (Random Sequence Generator, www.random.org) generálta a vizsgáló A.G. Minden alany azonos számot kapott 1 és 42 között. A résztvevők palackokat kaptak a három vizsgált megoldás egyikével. Sem a betegeket, sem a klinikusokat (a sebészek és a vizsgáló A.G.) nem tájékoztatták az egyes esetekben beadott szájöblítők azonosságáról (kettős - vak tervezés). Maszkos üvegeket adott a résztvevőknek egy harmadik független személy, aki nem volt fogorvos (a Posztgraduális Klinika segítő személyzetének tagja).

Műtét utáni karbantartási protokoll:

Az első 14 posztoperatív nap során a résztvevőket arra utasították, hogy naponta kétszer 15 ml-rel öblítsék le a beadott oldatot egy percig.

Ugyanebben az időszakban az alanyok tartózkodtak a mechanikus lepedék eltávolításától a műtött területeken.

A vizsgálón belüli reprodukálhatóság:

A vizsgálat megkezdése előtt a méréseket végző vizsgálót (A.G.) kalibrálták a vizsgálón belüli reprodukálhatóság megállapítása érdekében. A kalibrációkat két olyan alanyal végezték el, amelyek nem szerepeltek a vizsgálatban. A 0,12%-os klórhexidinnel végzett posztoperatív karbantartás során a 7. műtéti napon a korai sebgyógyulási indexet (EHI) és a plakk indexet (PI) ugyanazon a napon két alkalommal, de legalább 8 órás eltéréssel rögzítettük. Az osztályon belüli korrelációs analízis segítségével számítottuk ki az ismételt mérésekre vonatkozó intravizsgálói egyetértést. A kalibrációt akkor fogadtuk el, ha mindkét mérés hasonló volt +/- 10%-os eltéréssel (osztályon belüli korrelációs együttható > 0,9).

Mikrobiológiai értékelés:

A 14. posztoperatív napon összegyűjtött szupragingivális fogplakk mintákat vettünk mindkét interproximális fogfelszínről a legmagasabb EHI értékű interdentális papilláig küret segítségével. Az egyesített mintákat egyenként gyűjtöttük 150 μl TE pufferoldatban. A mintákat -80 °C-on tároltuk a feldolgozásig, amelyet az athéni, görögországi National Center for Scientific Research (N.C.S.R.) Biosciences and Applications Institute of Cell and Matrix Pathobiology Laboratoryjában végeztek. A bakteriális genomi DNS-t a PureLink® Genomic DNA Μini Kit segítségével izoláltuk és tisztítottuk a Gram (+) bakteriális sejt lízis gyártójának protokollja szerint. A tisztított DNS koncentrációit spektrofotometriásan határoztuk meg (NanoDrop 1000). A mintákat kvantitatív valós idejű PCR-rel (qPCR) elemeztük annak érdekében, hogy minden egyesített mintában értékeljük a teljes baktériumszámot. A qPCR-t univerzális primerek készletének alkalmazásával végezték (forward primer: 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGT 3' és reverz primer: 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3', amplikonmérete 466 bázispár), amelyek kimutatták az 16en gén DNS-kódoló szekvenciáit. legalább 50 különböző baktériumfaj riboszomális alegysége (aerob és anaerob Gram-pozitív és Gram-negatív) és SYBR Green Ι fluoreszcens szonda. Az Escherichia coli tiszta bakteriális tenyészeteinek DNS-kivonatának sorozathígításait végeztük a qPCR standard görbéjének létrehozása érdekében. A reakciókat 40 cikluson keresztül végeztük 94 °C-on 30 másodpercig, 58 °C-on 45 másodpercig és 72 °C-on 10 percig egy Light Cycler 96 qPCR készülékben. Az eredményeket a Light Cycler 96 1.1 szoftverrel elemeztük. Az egyes minták teljes baktériumszámát a teljes bakteriális DNS tömegben (ng) és a bakteriális kópiaszámban (x106) fejezzük ki.

Mintaméret számítás:

A minta méretét egyirányú ANOVA alapú számításokkal becsültük meg, feltételezve, hogy a minimális klinikailag szignifikáns különbség egy egység a medián EHI értékekben 14 napon belül legalább egy csoportpár között. Csoportonként 14 betegre volt szükség a 80%-os teljesítmény eléréséhez és a csoportok közötti alulértékelési paraméterek medián eltéréseinek kimutatásához.

Statisztikai analízis:

A minta demográfiai és klinikai jellemzőit csoportonként mutatjuk be a kategorikus változók abszolút és relatív (%) gyakoriságát, a mennyiségi változóknál mediánokat és interkvartilis tartományokat (Median - IQR) tartalmazó táblázatokban. A csoportok közötti különbségeket ezekben a jellemzőkben Fisher-féle egzakt tesztekkel értékeltük a kategorikus változókra és Kruskal-Wallis tesztekkel a kvantitatív változókra. Az érdeklődésre számot tartó indexek (korai sebgyógyulási index - EHI, plakk index - PI, plakk területindex - PA%) eloszlását mediánokon és IQR-eken keresztül összegeztük.

Az indexek adatait lineáris vagy általánosított lineáris vegyes modellekkel elemeztük, figyelembe véve az ugyanazon egyeden végzett több mérés közötti lehetséges összefüggéseket. Különösen az EHI és PI elemzéséhez ordinális logisztikus regressziós modelleket használtunk. A PA% indexhez, amely 0% és 100% közötti arány volt, lineáris modellt alkalmaztunk a függő változó logit transzformációja után. A végső többváltozós modellek modellválasztása, beleértve a lehetséges interakciós hatások ellenőrzését, valószínűségi arány teszteken alapult.

A csoportok közötti, illetve a minta egyéb jellemzőihez viszonyított összes mikrobaszám különbséget lineáris regressziós modellel elemeztük log10 transzformáció után. Az eredményeket relatív különbségként mutatjuk be, %.

A 0,05-nél kisebb P-értékeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük. Valamennyi elemzést a Stata 13.1 (Stata Corp., USA) statisztikai csomag használatával végeztük.