Effektiviteten av tre olika munsköljningar i tandplackkontroll och tidig sårläkning

Material och metoder

Patientregistrering och alla kliniska procedurer utfördes vid avdelningen för parodontologi, tandläkarhögskolan, National and Kapodistrian University of Athens, Grekland.

Kliniska procedurer:

Alla kirurgiska ingrepp utfördes av första- och tredjeårsstudenter. Supragingival debridering och polering av det opererade området utfördes omedelbart före operationen. I fall av resterande operationer för eliminering/reduktion av parodontala fickor, applicerades intrasulkulära snitt följt av papillbevarande snitt vid interdentala områden. I fall av kronförlängning applicerades resektiva gingivala snitt i närvaro av tillräcklig bredd av keratiniserade vävnader (≥ 3 mm). Efter flikförhöjning debriderades rotytorna noggrant med instrument och ultraljudsanordningar. Ostektomi / osteoplastik med hårdmetallborr utfördes, som bedömdes lämpligt. Buccala och palatal/linguala flikar var helt anpassade till varandra och suturerades tillsammans med monofilament långsamt resorberbar sutur. Parodontala förband användes inte. Inga systemiska antibiotika ordinerades. Ibuprofen 400 mg, tre gånger dagligen i 4 dagar, föreslogs omedelbart efter kirurgiskt ingrepp. Rökare rekommenderades att sluta röka under den första postoperativa veckan. Suturer avlägsnades vid den 7:e postoperativa dagen. Under den perioden registrerades ingen oavsiktlig förlust av suturer.

Randomisering och allokeringsdöljande:

Försökspersonerna tilldelades slumpmässigt en av tre grupper med hjälp av en datoriserad tilldelningsprocedur (Random Sequence Generator, www.random.org) genererad av examinator A.G. Varje försöksperson fick ett identiskt nummer mellan 1 och 42. Deltagarna fick flaskor med en av de tre lösningarna som undersöktes. Varken patienter eller läkare (kirurger och undersökare A.G.) informerades om identiteten för munskölj som administrerades i varje fall (dubbel - blind design). Maskerade flaskor gavs till deltagarna av en tredje oberoende person som inte var tandläkare (medlem i Postgraduate Clinics assistanspersonal).

Efterkirurgiskt underhållsprotokoll:

Under de första 14 dagarna efter operationen instruerades deltagarna att skölja med 15 ml av den administrerade lösningen i en minut, två gånger dagligen.

Under samma period avstod försökspersonerna från all mekanisk plackborttagning vid de opererade områdena.

Reproducerbarhet inom examinator:

Före början av studien kalibrerades den undersökare (A.G.) som utförde mätningarna för att fastställa intra-granskarens reproducerbarhet. Kalibreringar utfördes med två försökspersoner som inte ingick i studien. Under postoperativt underhåll med 0,12 % klorhexidin, på den 7:e postkirurgiska dagen, registrerades tidig sårläkningsindex (EHI) och plackindex (PI) vid två separata tillfällen under samma dag, dock med minst 8 timmars mellanrum. Intra-klass korrelationsanalys användes för att beräkna intra-granskarens överensstämmelse för upprepade mätningar. Kalibreringen accepterades om båda mätningarna var likartade med en avvikelse på +/- 10 % (intra-klasskorrelationskoefficient > 0,9).

Mikrobiologisk bedömning:

Supragingival tandplack poolade prover samlades in den 14:e postoperativa dagen från båda interproximala tandytorna respektive till interdentalpapillen med det högsta EHI-värdet, med hjälp av kyretter. Samlade prover samlades individuellt i 150 μl TE-buffertlösning. Prover lagrades vid -80°C tills bearbetning, som utfördes vid Laboratory of Cell and Matrix Pathobiology vid Institute of Biosciences and Applications, National Center for Scientific Research (N.C.S.R.), Aten, Grekland. Bakteriellt genomiskt DNA isolerades och renades med hjälp av PureLink® Genomic DNA Μini Kit, enligt Gram (+) bakteriecellslystillverkarens protokoll. Renade DNA-koncentrationer bestämdes spektrofotometriskt (NanoDrop 1000). Prover analyserades med kvantitativ realtids-PCR (qPCR) för att utvärdera det totala bakterieantalet i varje poolat prov. qPCR utfördes med applicering av en uppsättning universella primers (framåtriktad primer: 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGT 3' och omvänd primer: 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3', med en amplikonstorlek på 466 baspar), rapporterad att detektera DNA-sekvenser av 16S kodande gen ribosomal subenhet av minst 50 olika bakteriearter (aeroba och anaeroba grampositiva och gramnegativa) och SYBR Green Ι fluorescerande sond. Serieutspädningar av DNA-extrakt av rena bakteriekulturer av Escherichia coli utfördes för att generera en standardkurva för qPCR. Reaktioner utfördes under 40 cykler vid 94 °C i 30 sekunder, 58 °C i 45 sekunder och 72 °C i 10 minuter i en Light Cycler 96 qPCR-enhet. Resultaten analyserades med användning av Light Cycler 96 1.1 Software. Totalt bakterieantal för varje prov uttrycks som total bakteriell DNA-massa (ng) och antal bakteriekopior (x106).

Provstorleksberäkning:

Provstorleken uppskattades genom envägs ANOVA-baserade beräkningar, med antagande att den minsta kliniskt signifikanta skillnaden är en enhet i median EHI-värden efter 14 dagar mellan minst ett par grupper. 14 patienter för varje grupp behövdes för att uppnå 80 % effekt och för att upptäcka median skillnader i parametrar under utvärdering mellan grupperna.

Statistisk analys:

Demografiska och kliniska egenskaper hos urvalet presenteras gruppvis i tabeller som innehåller absoluta och relativa (%) frekvenser för kategoriska variabler och medianer och interkvartilintervall (Median - IQR) för kvantitativa variabler. Mellan grupperna utvärderades skillnader i dessa egenskaper genom Fishers exakta test för kategoriska variabler och Kruskal-Wallis tester för kvantitativa. Fördelningarna av de intressanta indexen (Tidig sårläkningsindex - EHI, Plackindex - PI, Plackareaindex - PA%) sammanfattades genom medianer och IQR.

Indexens data analyserades genom linjära eller generaliserade linjära blandade modeller med hänsyn till de potentiella korrelationerna mellan flera mätningar gjorda på samma individ. I synnerhet för analysen av EHI och PI användes ordinala logistiska regressionsmodeller. För PA%-indexet, som var en andel som sträckte sig från 0% till 100%, användes en linjär modell efter en logittransformation av den beroende variabeln. Modellval, inklusive kontroller för potentiella interaktionseffekter, för de slutliga multivariabla modellerna baserades på sannolikhetsförhållandetester.

Totalt antal mikrobiella skillnader mellan grupper eller i relation till andra provegenskaper analyserades med hjälp av linjär regressionsmodell efter log10-transformation. Resultaten presenteras som relativa skillnader %.

P-värden mindre än 0,05 ansågs vara statistiskt signifikanta. Alla analyser utfördes med användning av det statistiska paketet Stata 13.1 (Stata Corp., USA).