치아 플라크 제어 및 조기 상처 치유에 있어 세 가지 다른 구강 세정제의 효과

재료 및 방법

환자 등록 및 모든 임상 절차는 그리스 아테네 국립 및 카포디스트리아 대학 치의학부 치주과에서 수행되었습니다.

임상 절차:

모든 외과 개입은 대학원 1학년과 3학년 레지던트에 의해 수행되었습니다. 수술 직전에 치은연상 변연조직 제거 및 수술 부위 연마를 시행하였다. 잔존 치주낭 제거/축소 수술의 경우 치간 부위에 유두 보존 절개를 한 후 열구내 절개를 시행하였다. 치관 연장의 경우 충분한 폭의 각화 조직(≥ 3mm)이 있는 상태에서 절제 치은 절개를 적용했습니다. 플랩 거상 후 치근 표면을 기기와 초음파 장치로 철저히 제거했습니다. 카바이드 버를 사용한 절골술/골성형술이 적절한 것으로 간주되어 적용되었습니다. 협측 및 구개측/설측 플랩은 서로 완전히 적응되었고 모노필라멘트 천천히 흡수되는 봉합사로 함께 봉합되었습니다. 치주 드레싱은 사용하지 않았습니다. 전신 항생제는 처방되지 않았다. Ibuprofen 400mg 1일 3회, 4일을 외과적 개입 직후에 제안하였다. 흡연자는 수술 후 첫 주 동안 흡연을 중단하도록 권고받았다. 수술 후 7일째 봉합사를 제거하였다. 그 기간 동안 우발적인 봉합 손실은 기록되지 않았습니다.

무작위화 및 할당 은폐:

피험자는 전산화된 할당 절차(Random Sequence Generator, www.random.org)를 사용하여 세 그룹 중 하나에 무작위로 할당되었습니다. 심사관 A.G. 각 과목에는 1에서 42 사이의 동일한 번호가 부여되었습니다. 참가자들은 조사 중인 세 가지 솔루션 중 하나가 담긴 병을 받았습니다. 환자나 임상의(외과의사 및 심사관 A.G.)는 각 경우에 투여된 구강청결제의 정체에 대해 알지 못했습니다(이중 맹검 설계). 가면을 쓴 병은 치과의사가 아닌 제3의 독립적인 사람(대학원 클리닉의 지원 직원)이 참가자에게 제공했습니다.

수술 후 유지 관리 프로토콜:

수술 후 처음 14일 동안 참가자들은 투여된 용액 15ml로 1분 동안 하루에 두 번 헹구도록 지시받았습니다.

같은 기간 동안 피험자는 수술 부위에서 기계적 플라크 제거를 자제했습니다.

심사관 내 재현성:

연구 시작 전에 측정을 수행한 검사자(A.G.)는 검사자 내 재현성을 확립하기 위해 보정되었습니다. 보정은 연구에 포함되지 않은 두 명의 피험자를 대상으로 수행되었습니다. 0.12% 클로르헥시딘을 사용하여 수술 후 유지 관리하는 동안 수술 후 7일째에 조기 상처 치유 지수(EHI)와 플라크 지수(PI)를 같은 날 두 차례에 걸쳐 기록했지만 최소 8시간 간격을 두었습니다. 반복 측정에 대한 검사관 내 일치도를 계산하기 위해 클래스 내 상관 분석을 사용했습니다. 두 측정값이 +/- 10%의 편차로 유사하면 보정이 허용되었습니다(클래스 내 상관 계수 > 0.9).

미생물학적 평가:

수술 후 14일째 큐렛을 사용하여 양쪽 치간 치아 표면에서 EHI 값이 가장 높은 치간유두까지 치은연상 플라그 풀 샘플을 수집했습니다. 풀링된 샘플은 150μl TE 버퍼 용액에서 개별적으로 수집되었습니다. 샘플은 처리될 때까지 -80에 보관되었으며, 처리는 그리스 아테네에 있는 N.C.S.R.(National Center for Scientific Research) 생명과학 및 응용 연구소의 세포 및 매트릭스 병리학 실험실에서 수행되었습니다. 박테리아 게놈 DNA는 그람(+) 박테리아 세포 용해 제조업체의 프로토콜에 따라 PureLink® Genomic DNA Mini 키트를 사용하여 분리 및 정제되었습니다. 정제된 DNA 농도는 분광광도계로 측정되었습니다(NanoDrop 1000). 표본은 각각의 풀링된 샘플에서 총 박테리아 수를 평가하기 위해 정량적 실시간 PCR(qPCR)을 사용하여 분석되었습니다. qPCR은 범용 프라이머 세트(정방향 프라이머: 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGT 3' 및 역방향 프라이머: 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3', 앰플리콘 크기 466 염기쌍)를 적용하여 수행되었으며, 16S를 암호화하는 유전자의 DNA 서열을 검출하는 것으로 보고되었습니다. 최소 50종의 서로 다른 박테리아 종(호기성 및 혐기성 그람 양성 및 그람 음성)의 리보솜 서브유닛 및 SYBR Green Ⅰ 형광 프로브. qPCR에 대한 표준 곡선을 생성하기 위해 Escherichia coli의 순수 박테리아 배양물의 DNA 추출물의 연속 희석을 수행했습니다. Light Cycler 96 qPCR 장치에서 94°C에서 30초, 58°C에서 45초, 72°C에서 10분 동안 40주기 동안 반응을 수행했습니다. Light Cycler 96 1.1 소프트웨어를 사용하여 결과를 분석했습니다. 각 샘플의 총 박테리아 수는 총 박테리아 DNA 질량(ng) 및 박테리아 복제 수(x106)로 표시됩니다.

샘플 크기 계산:

최소 임상적으로 유의미한 차이가 적어도 한 쌍의 그룹 간에 14일에 EHI 중앙값의 한 단위라고 가정하여 일원 분산 분석 기반 계산을 통해 샘플 크기를 추정했습니다. 각 그룹에 대해 14명의 환자가 80%의 파워 달성과 그룹 간의 평가 매개변수에서 중앙값 차이 감지를 위해 필요했습니다.

통계 분석:

샘플의 인구통계학적 및 임상적 특성은 범주형 변수에 대한 절대 및 상대(%) 빈도와 정량적 변수에 대한 중앙값 및 사분위수 범위(중앙값 - IQR)를 포함하는 표에 그룹별로 표시됩니다. 이러한 특성의 그룹 간 차이는 범주형 변수에 대한 Fisher의 정확한 테스트와 양적 변수에 대한 Kruskal-Wallis 테스트를 통해 평가되었습니다. 관심 지수(Early wound healing index - EHI, Plaque index - PI, Plaque area index - PA%)의 분포를 중앙값과 IQR을 통해 요약하였다.

지수의 데이터는 동일한 개인에 대해 수행된 여러 측정 간의 잠재적 상관관계를 고려하여 선형 또는 일반화된 선형 혼합 모델을 통해 분석되었습니다. 특히 EHI와 PI의 분석은 순서형 로지스틱 회귀모형을 사용하였다. 0%에서 100%까지의 비율인 PA% 지수는 종속변수를 로짓변환한 후 선형모형을 사용하였다. 최종 다변수 모델에 대한 잠재적인 상호 작용 효과 확인을 포함한 모델 선택은 우도비 테스트를 기반으로 했습니다.

log10 변환 후 선형 회귀 모델을 사용하여 그룹 간 또는 다른 샘플 특성과 관련하여 총 미생물 수 차이를 분석했습니다. 결과는 상대적인 차이 %로 표시됩니다.

0.05 미만의 P-값은 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다. 모든 분석은 통계 패키지 Stata 13.1(Stata Corp., USA)을 사용하여 수행되었습니다.