Efficacité de trois bains de bouche différents dans le contrôle de la plaque dentaire et la cicatrisation précoce des plaies

Matériels et méthodes

Le recrutement des patients et toutes les procédures cliniques ont été effectués au Département de parodontologie, École de médecine dentaire, Université nationale et kapodistrienne d'Athènes, Grèce.

Procédures cliniques :

Toutes les interventions chirurgicales ont été réalisées par des résidents de première et de troisième année de troisième cycle. Un débridement supragingival et un polissage de la zone opérée ont été réalisés juste avant l'intervention. Dans les cas de chirurgies d'élimination/réduction de poches parodontales résiduelles, des incisions intrasulculaires suivies d'incisions de préservation des papilles dans les zones interdentaires ont été appliquées. Dans les cas d'allongement de la couronne, des incisions gingivales résectrices ont été appliquées en présence d'une largeur suffisante de tissus kératinisés (≥ 3 mm). Après l'élévation du lambeau, les surfaces radiculaires ont été soigneusement débridées avec des instruments et des appareils à ultrasons. Une ostectomie / ostéoplastie avec des fraises en carbure a été appliquée, comme jugé approprié. Les lambeaux buccaux et palatins/linguaux ont été entièrement adaptés l'un à l'autre et suturés avec une suture monofilament lentement résorbable. Les pansements parodontaux n'ont pas été utilisés. Aucun antibiotique systémique n'a été prescrit. L'ibuprofène 400 mg, trois fois par jour pendant 4 jours, a été suggéré immédiatement après l'intervention chirurgicale. Les fumeurs ont été invités à cesser de fumer pendant la première semaine postopératoire. Les sutures ont été retirées au 7ème jour postopératoire. Au cours de cette période, aucune perte accidentelle de sutures n'a été enregistrée.

Randomisation et assignation secrète :

Les sujets ont été assignés au hasard à l'un des trois groupes à l'aide d'une procédure d'assignation informatisée (Random Sequence Generator, www.random.org) généré par l'examinateur A.G. Chaque sujet a reçu un nombre identique entre 1 et 42. Les participants ont reçu des bouteilles avec l'une des trois solutions à l'étude. Ni les patients ni les cliniciens (chirurgiens et examinateur A.G.) n'ont été informés de l'identité du rince-bouche administré dans chaque cas (conception en double aveugle). Des bouteilles masquées ont été remises aux participants par une troisième personne indépendante qui n'était pas dentiste (membre du personnel d'assistance de la clinique postdoctorale).

Protocole d'entretien post - chirurgical :

Au cours des 14 premiers jours postopératoires, les participants ont été invités à rincer avec 15 ml de la solution administrée pendant une minute, deux fois par jour.

Au cours de la même période, les sujets se sont abstenus de toute élimination mécanique de la plaque au niveau des zones opérées.

Reproductibilité intra-examinateur :

Avant le début de l'étude, l'examinateur (A.G.) qui a effectué les mesures a été calibré afin d'établir la reproductibilité intra-examinateur. Des calibrations ont été réalisées avec deux sujets non inclus dans l'étude. Au cours de la maintenance postopératoire à la chlorhexidine à 0,12 %, au 7e jour postopératoire, l'indice de cicatrisation précoce (EHI) et l'indice de plaque (IP) ont été enregistrés à deux reprises au cours de la même journée, mais à au moins 8 heures d'intervalle. L'analyse de corrélation intra-classe a été utilisée pour calculer la concordance intra-examinateur pour les mesures répétées. L'étalonnage était accepté si les deux mesures étaient similaires avec un écart de +/- 10 % (coefficient de corrélation intra-classe > 0,9).

Évaluation microbiologique :

Des échantillons groupés de plaque dentaire supragingivale ont été prélevés au 14ème jour postopératoire des deux surfaces dentaires interproximales respectivement jusqu'à la papille interdentaire avec la valeur EHI la plus élevée, à l'aide de curettes. Les échantillons regroupés ont été collectés individuellement dans 150 μl de solution tampon TE. Les échantillons ont été stockés à -80 jusqu'au traitement, qui a été effectué au Laboratoire de pathobiologie cellulaire et matricielle de l'Institut des biosciences et des applications, Centre national de recherche scientifique (NCSR), Athènes, Grèce. L'ADN génomique bactérien a été isolé et purifié à l'aide du kit PureLink® Genomic DNA Μini, en suivant le protocole du fabricant de lyse de cellules bactériennes Gram (+). Les concentrations d'ADN purifié ont été déterminées par spectrophotométrie (NanoDrop 1000). Les échantillons ont été analysés par PCR quantitative en temps réel (qPCR) afin d'évaluer le nombre total de bactéries dans chaque échantillon regroupé. La qPCR a été réalisée avec l'application d'un ensemble d'amorces universelles (amorce directe : 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGGT 3' et amorce inverse : 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3', avec une taille d'amplicon de 466 paires de bases), signalée pour détecter les séquences d'ADN du gène codant pour 16S sous-unité ribosomique d'au moins 50 espèces bactériennes différentes (aérobies et anaérobies Gram positif et Gram négatif) et sonde fluorescente SYBR Green Ι. Des dilutions en série d'extrait d'ADN de cultures bactériennes pures d'Escherichia coli ont été réalisées afin de générer une courbe standard pour la qPCR. Les réactions ont été effectuées pendant 40 cycles à 94 ° C pendant 30 secondes, 58 ° C pendant 45 secondes et 72 ° C pendant 10 minutes dans un appareil Light Cycler 96 qPCR. Les résultats ont été analysés à l'aide du logiciel Light Cycler 96 1.1. Le nombre total de bactéries de chaque échantillon est exprimé en masse totale d'ADN bactérien (ng) et en nombre de copies bactériennes (x106).

Calcul de la taille de l'échantillon :

La taille de l'échantillon a été estimée par des calculs basés sur l'ANOVA unidirectionnelle, en supposant que la différence minimale cliniquement significative est d'une unité dans les valeurs médianes de l'EHI à 14 jours entre au moins une paire de groupes. 14 patients pour chaque groupe étaient nécessaires pour atteindre 80 % de puissance et pour la détection des différences médianes dans les paramètres sous-évalués entre les groupes.

Analyses statistiques:

Les caractéristiques démographiques et cliniques de l'échantillon sont présentées par groupe dans des tableaux contenant les fréquences absolues et relatives (%) pour les variables catégorielles et les médianes et les intervalles interquartiles (Médiane - IQR) pour les variables quantitatives. Les différences entre les groupes dans ces caractéristiques ont été évaluées par les tests exacts de Fisher pour les variables catégorielles et les tests de Kruskal-Wallis pour les variables quantitatives. Les distributions des indices d'intérêt (indice de cicatrisation précoce - EHI, indice de plaque - PI, indice de surface de plaque - PA %) ont été résumés par des médianes et des IQR.

Les données des indices ont été analysées à travers des modèles mixtes linéaires ou linéaires généralisés en tenant compte des corrélations potentielles entre plusieurs mesures prises sur le même individu. En particulier, pour l'analyse de l'EHI et de l'IP, des modèles de régression logistique ordinale ont été utilisés. Pour l'indice PA%, qui était une proportion allant de 0% à 100%, un modèle linéaire a été utilisé après une transformation logit de la variable dépendante. La sélection des modèles, y compris les vérifications des effets d'interaction potentiels, pour les modèles multivariables finaux était basée sur des tests de rapport de vraisemblance.

Les différences de numération microbienne totale entre les groupes ou par rapport à d'autres caractéristiques de l'échantillon ont été analysées à l'aide d'un modèle de régression linéaire après transformation log10. Les résultats sont présentés sous forme de différences relatives %.

Les valeurs de p inférieures à 0,05 ont été considérées comme statistiquement significatives. Toutes les analyses ont été effectuées à l'aide du progiciel statistique Stata 13.1 (Stata Corp., États-Unis).