Kolmen eri suunesteen tehokkuus plakin hallinnassa ja haavan varhaisessa paranemisessa

Materiaalit ja menetelmät

Potilaiden ilmoittautuminen ja kaikki kliiniset toimenpiteet suoritettiin Ateenan kansallisen ja Kapodistrian yliopiston hammaslääketieteen koulun periodontologian osastolla, Kreikassa.

Kliiniset toimenpiteet:

Kaikki kirurgiset toimenpiteet suorittivat ensimmäisen ja kolmannen vuoden jatko-opiskelijat. Supragingivaalinen debridement ja leikatun alueen kiillotus tehtiin välittömästi ennen leikkausta. Jäännös parodontaalitaskun eliminointi-/vähennysleikkauksissa tehtiin intrasulkulaariset viillot, joita seurasi papillasäilytysviillot hampaidenvälisillä alueilla. Kruunun pidennystapauksissa tehtiin resektiivisiä ienviilloita, kun keratinisoituneita kudoksia oli riittävästi (≥ 3 mm). Läpän kohotuksen jälkeen juuripinnat puhdistettiin perusteellisesti instrumenteilla ja ultraäänilaitteilla. Ostektomia/osteoplastia käytettiin karbidiporilla, kuten katsottiin sopivaksi. Bukkaali- ja suulaeläpät/lingual-läpät sovitettiin täysin toisiinsa ja ommeltiin yhteen monofilamenttisella hitaasti resorboituvalla ompeleella. Parodontaalisidoksia ei käytetty. Systeemisiä antibiootteja ei määrätty. Ibuprofeenia 400 mg, kolme kertaa päivässä 4 päivän ajan, ehdotettiin välittömästi leikkauksen jälkeen. Tupakoijia kehotettiin lopettamaan tupakointi ensimmäisen leikkauksen jälkeisen viikon ajan. Ompeleet poistettiin 7. leikkauksen jälkeisenä päivänä. Tänä aikana ei havaittu ompeleiden tahatonta menetystä.

Satunnaistaminen ja allokoinnin piilottaminen:

Koehenkilöt jaettiin satunnaisesti yhteen kolmesta ryhmästä käyttämällä tietokoneistettua määritysmenettelyä (Random Sequence Generator, www.random.org) kokeen vastaanottajan A.G. Jokaiselle koehenkilölle annettiin sama numero väliltä 1-42. Osallistujat saivat pulloja, joissa oli yksi kolmesta tutkittavasta ratkaisusta. Potilaille eikä kliinikoille (kirurgeille ja tutkija A.G.) ei kerrottu kussakin tapauksessa annetun suuveden identiteetistä (kaksoissokkomalli). Naamioituja pulloja antoi osallistujille kolmas riippumaton henkilö, joka ei ollut hammaslääkäri (jatkoklinikan avustushenkilöstön jäsen).

Leikkauksen jälkeinen huoltoprotokolla:

Ensimmäisen 14 leikkauksen jälkeisen päivän aikana osallistujia kehotettiin huuhtelemaan 15 ml:lla annettua liuosta yhden minuutin ajan kahdesti päivässä.

Saman ajanjakson aikana koehenkilöt pidättyivät mekaanisesta plakin poistamisesta leikatuilta alueilta.

Tutkijan sisäinen toistettavuus:

Ennen tutkimuksen alkua mittaukset suorittanut tutkija (A.G.) kalibroitiin tutkijan sisäisen toistettavuuden varmistamiseksi. Kalibroinnit suoritettiin kahdella koehenkilöllä, jotka eivät olleet mukana tutkimuksessa. Leikkauksen jälkeisen ylläpidon aikana, jossa käytettiin 0,12 % klooriheksidiiniä, 7. leikkauksen jälkeisenä päivänä varhaisen haavan paranemisindeksi (EHI) ja plakkiindeksi (PI) rekisteröitiin kahdessa eri yhteydessä saman päivän aikana, kuitenkin vähintään 8 tunnin välein. Luokan sisäistä korrelaatioanalyysiä käytettiin tutkijan sisäisen sopivuuden laskemiseen toistetuille mittauksille. Kalibrointi hyväksyttiin, jos molemmat mittaukset olivat samanlaisia ​​+/- 10 %:n poikkeamalla (luokan sisäinen korrelaatiokerroin > 0,9).

Mikrobiologinen arviointi:

Supragingivaaliset hammasplakkiyhdistetyt näytteet otettiin 14. leikkauksen jälkeisenä päivänä molemmilta interproksimaalisilta hampaiden pinnoilta vastaavasti hampaidenväliseen papilaan, jolla oli korkein EHI-arvo, käyttämällä kyrettejä. Yhdistetyt näytteet kerättiin yksittäin 150 µl:aan TE-puskuriliuosta. Näytteitä säilytettiin -80 °C:ssa käsittelyyn asti, joka suoritettiin Laboratory of Cell and Matrix Pathobiologyssa Institute of Biosciences and Applicationsissa, National Center for Scientific Research (N.C.S.R.), Ateena, Kreikka. Bakteerigenominen DNA eristettiin ja puhdistettiin käyttämällä PureLink® Genomic DNA Μini Kit -sarjaa Gram (+) -bakteerisolulyysivalmistajan ohjetta noudattaen. Puhdistetun DNA:n pitoisuudet määritettiin spektrofotometrisesti (NanoDrop 1000). Näytteet analysoitiin käyttämällä kvantitatiivista reaaliaikaista PCR:ää (qPCR) bakteerien kokonaismäärän arvioimiseksi kussakin yhdistetyssä näytteessä. qPCR suoritettiin käyttämällä joukkoa universaaleja alukkeita (eteenpäin aluke: 5' TCCTACGGGAGGCAGCAGT 3' ja käänteinen aluke: 5' GGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTT 3', amplikonin koko 466 emäsparia), joiden raportoitu havaitsevan geenin 16S:n DNA:ta koodaavat sekvenssit. vähintään 50 eri bakteerilajin ribosomaalista alayksikköä (aerobinen ja anaerobinen grampositiivinen ja gramnegatiivinen) ja SYBR Green Ι fluoresoiva koetin. Escherichia colin puhtaiden bakteeriviljelmien DNA-uutteen sarjalaimennoksia suoritettiin standardikäyrän muodostamiseksi qPCR:lle. Reaktiot suoritettiin 40 sykliä 94 °C:ssa 30 sekuntia, 58 °C:ssa 45 sekuntia ja 72 °C:ssa 10 minuuttia Light Cycler 96 qPCR -laitteella. Tulokset analysoitiin Light Cycler 96 1.1 -ohjelmistolla. Kunkin näytteen bakteerien kokonaismäärä ilmaistaan ​​bakteerien DNA:n kokonaismassana (ng) ja bakteerikopiolukuina (x106).

Näytteen kokolaskenta:

Näytteen koko arvioitiin yksisuuntaisilla ANOVA-pohjaisilla laskelmilla olettaen, että kliinisesti merkitsevä pienin ero on yksi yksikkö EHI-arvojen mediaaniarvoissa 14 päivän kohdalla vähintään yhden ryhmäparin välillä. 14 potilasta kuhunkin ryhmään tarvittiin 80 % tehon saavuttamiseksi ja mediaanierojen havaitsemiseksi aliarviointiparametreissa ryhmien välillä.

Tilastollinen analyysi:

Otoksen demografiset ja kliiniset ominaisuudet on esitetty ryhmittäin taulukoissa, jotka sisältävät absoluuttiset ja suhteelliset (%) frekvenssit kategorisille muuttujille sekä mediaanit ja interkvartiilialueet (mediaani - IQR) kvantitatiivisille muuttujille. Ryhmien väliset erot näissä ominaisuuksissa arvioitiin Fisherin täsmällisillä testeillä kategorisille muuttujille ja Kruskal-Wallis -testeillä kvantitatiivisille muuttujille. Kiinnostavien indeksien jakaumat (Varhaisen haavan paranemisen indeksi - EHI, Plakkiindeksi - PI, Plakkialueindeksi - PA %) koottiin mediaanien ja IQR:ien kautta.

Indeksien tiedot analysoitiin lineaarisilla tai yleistetyillä lineaarisilla sekamalleilla ottaen huomioon mahdolliset korrelaatiot samasta yksilöstä tehtyjen useiden mittausten välillä. Erityisesti EHI:n ja PI:n analysointiin käytettiin ordinaalisia logistisia regressiomalleja. PA % -indeksille, jonka osuus vaihteli välillä 0 % - 100 %, käytettiin lineaarista mallia riippuvan muuttujan logit-muunnoksen jälkeen. Mallin valinta, mukaan lukien mahdollisten vuorovaikutusvaikutusten tarkistukset, lopullisille monimuuttujamalleille perustui todennäköisyyssuhdetesteihin.

Mikrobien kokonaismäärän erot ryhmien välillä tai suhteessa muihin näyteominaisuuksiin analysoitiin käyttämällä lineaarista regressiomallia log10-transformaation jälkeen. Tulokset on esitetty suhteellisina eroina %.

P-arvoja alle 0,05 pidettiin tilastollisesti merkittävinä. Kaikki analyysit suoritettiin käyttämällä tilastopakettia Stata 13.1 (Stata Corp., USA).