Kan Time-lapse-parametre brukes til å forutsi graviditet av menneskelige embryoer?

Målet er å studere om algoritmer beregnet fra time-lapse fotografering av menneskelige embryoer i seg selv kan forbedre prediksjonen av embryoets reproduksjonspotensial sammenlignet med embryomorfologi alene.

METODER OG MATERIAL IVF-prosedyre Oocytter hentet 36±1 time etter hCG-administrasjon vil bli befruktet enten ved standard inseminasjon eller ICSI. Morgenen etter uthenting av oocytter (dag 1) vil zygoter bli plassert i embryo-time-lapse-glass for dyrking frem til overføringsdagen (dag 5). I løpet av dyrkingstiden vil embryoer holdes i kommersielt tilgjengelige kulturmedier og vil ikke bli fjernet fra time-lapse-inkubatoren før dagen for overføring. Embryoer samhandler med media og vil få lov til å utvikle blastocyststadiet (5-6 dagers kultur) på hvilket tidspunkt valg for overføring vil bli foretatt. Under in vitro-kulturen vil et enkelt bilde tatt i time-lapse-inkubatoren bli brukt til å rutinemessig morfologisk gradere embryoer, ifølge Istanbul-konsensus. På dag 5 vil utviklende embryoer bli vurdert (i henhold til studie versus kontrollgruppekriterier) for å velge embryoet for overføring til pasienten. Overflødig GQE vil bli kryokonservert for fremtidig bruk.

Time-lapse-fotografering Alle embryoer vil bli plassert i brønner med time-lapse-kulturskåler (embryoskop) i henhold til instruksjonene fra produsenten. Embryoer i begge grupper vil bli dyrket til blastocyststadiet uten medieendringer. Time-lapse-systemet består av en stasjonær inkubator som kontrollerer omgivelsene (pH, CO2 og O2) i tillegg til å ta bilder i opptil 11 fokalplan under hele kulturperioden.

Morfologisk skåring Embryomorfologi vil bli skåret i henhold til Gardner-skåren og deretter oversatt til Istanbul-konsensussystemet hvis nødvendig for publisering.

For å sikre at alle embryologer kommenterer embryoutviklingen riktig, samt skårer blastocystene på samme måte, vil en valideringsprosess bli utført før studien starter. Standardiseringen vil bli oppnådd gjennom en prosess der embryologene vil skåre 20 blastocyster på dag 5-utviklingsstadiet, som vil bli gitt på en CD, imiterende prosedyren vil bli utført rutinemessig i laboratoriet. Embryologene må godkjennes for å få lov til å score embryoer i studien.

Embryoevaluering (begge grupper). Embryoer vil bli dyrket i Embryoscope time-lapse-systemet frem til dag 5. Hvis to eller flere blastocyster av god kvalitet (GQB), dvs. oppfyller et morfologisk minimumskriterie på 3BB eller bedre, utvikles, tas en foreløpig beslutning om hvilket embryo som skal velges for overføring. Deretter blir paret randomisert til enten kontroll- eller time-lapse-gruppen.

Beslutningstaking i time-lapse-gruppen Hvis paret randomiseres til time-lapse-gruppen vil alle embryoer som har nådd blastocyststadiet bli kommentert. Blastocysten med høyest KID (dag 5) poengsum vil bli valgt for overføring. For å sikre en pålitelig KID-score kan de morfologiske hendelsene oppnås; tid til 2, 3, 4 og 5 celler, tid til start av blastulering (tSB), og TE-skåre må evalueres.

Beslutningstaking i kontrollgruppen Dersom paret blir randomisert til kontrollgruppen, vil den foreløpige embryoseleksjonsbeslutningen opprettholdes.

Studieovervåking. En Data Study Monitoring Board (DSMB) Group vil bli tildelt og ha som oppgave å gjennomføre både sikkerhetssjekker og en interimanalyse (planlagt når ca. 50 % av pasientene er rekruttert).