Használhatók-e időzített paraméterek az emberi embriók terhességének előrejelzésére?

A cél annak tanulmányozása, hogy az emberi embriók időzített fényképezéséből számított algoritmus önmagában javíthatja-e az embrió szaporodási potenciáljának előrejelzését, összehasonlítva önmagában az embrió morfológiájával.

MÓDSZEREK ÉS ANYAG IVF eljárás A hCG beadása után 36±1 órával kinyert petesejteket standard termékenyítéssel vagy ICSI-vel megtermékenyítik. A petesejtek visszanyerését követő reggelen (1. nap) zigótákat helyezünk az embrió időzített tárgylemezeire a tenyésztéshez az átvitel napjáig (5. nap). A tenyésztés ideje alatt az embriókat a kereskedelemben kapható táptalajban tartják, és nem távolítják el az időzített inkubátorból az átvitel napjáig. Az embriók kölcsönhatásba lépnek a tápközeggel, és lehetővé teszik számukra a blasztociszta állapot kialakulását (5-6 napos tenyészet), amely időpontban kiválasztják az átvitelt. Az in vitro tenyésztés során az isztambuli konszenzusnak megfelelően egyetlen, az időzített inkubátorban rögzített képet használnak fel az embriók rutinszerű morfológiai osztályozására. Az 5. napon a fejlődő embriókat értékelik (a vizsgálati és kontrollcsoport kritériumai szerint), hogy kiválasszák az embriót a betegbe való átvitelhez. A szuperszámú GQE-t mélyhűtve tárolják a jövőbeni felhasználáshoz.

Időzített fotózás Minden embriót időzített tenyésztőedények (Embryoscope) lyukaiba kell helyezni a gyártó utasításai szerint. Mindkét csoport embrióit a blasztociszta stádiumig tenyésztik ki táptalajcsere nélkül. A time-lapse rendszer egy asztali inkubátorból áll, amely szabályozza a környezetét (pH, CO2 és O2), valamint akár 11 fókuszsíkban is készít képeket a tenyésztési periódusok teljes időtartama alatt.

Morfológiai pontozás Az embriók morfológiáját a Gardner-pontszám alapján értékeljük, majd szükség esetén az isztambuli konszenzusrendszerbe fordítjuk le a publikáláshoz.

Annak biztosítására, hogy minden embriológus helyesen jegyezze fel az embriófejlődést, és ugyanúgy pontozza a blasztocisztákat, a vizsgálat megkezdése előtt validálási folyamatot kell végrehajtani. A szabványosítás egy olyan folyamaton keresztül valósul meg, amelyben az embriológusok 20 blasztocisztát értékelnek az 5. napos fejlődési szakaszban, melyeket CD-n adnak át, az eljárást utánzó eljárást rutinszerűen elvégzik a laboratóriumban. Az embriológusoknak engedélyt kell kapniuk ahhoz, hogy embriókat értékelhessenek a vizsgálatban.

Embrióértékelés (mindkét csoport). Az embriókat az Embryoscope time-lapse rendszerben tenyésztik az 5. napig. Ha két vagy több jó minőségű blasztociszta (GQB), azaz legalább 3BB morfológiai kritériumot teljesít, előzetes döntés születik arról, hogy melyik embriót kell kiválasztani az átvitelre. Ezt követően a házaspárt véletlenszerűen besorolják a kontroll vagy az időzített csoportba.

Döntéshozatal a time-lapse csoportban Ha a házaspárt véletlenszerűen besorolják a time-lapse csoportba, minden embriót, amely elérte a blasztociszta stádiumot, annotáljuk. A legmagasabb KID (5. nap) pontszámmal rendelkező blasztociszta kerül kiválasztásra az átvitelre. A megbízható KID pontszámok elérése érdekében a morfológiai eseményeket; Ki kell értékelni a 2, 3, 4 és 5 sejtig eltelt időt, a blastuláció megkezdésének idejét (tSB), valamint a TE pontszámokat.

Döntéshozatal a kontrollcsoportban Ha a párokat véletlenszerűen besorolják a kontrollcsoportba, az előzetes embriószelekciós döntés megmarad.

Tanulmányfigyelés. Kijelölnek egy Data Study Monitoring Board (DSMB) csoportot, amelynek feladata a biztonsági ellenőrzések és az időközi elemzés elvégzése (a tervek szerint a betegek kb. 50%-ának felvételekor).