Können Zeitrafferparameter verwendet werden, um die Schwangerschaft menschlicher Embryonen vorherzusagen?

Ziel ist es zu untersuchen, ob ein aus Zeitrafferaufnahmen menschlicher Embryonen berechneter Algorithmus per se die Vorhersage des Fortpflanzungspotenzials des Embryos im Vergleich zur Embryomorphologie allein verbessern kann.

METHODEN UND MATERIAL IVF-Verfahren Oozyten, die 36 ± 1 h nach der hCG-Verabreichung gewonnen werden, werden entweder durch Standard-Insemination oder ICSI befruchtet. Am Morgen nach der Oozytenentnahme (Tag 1) werden die Zygoten in Embryo-Zeitraffer-Objektträger für die Kultur bis zum Tag des Transfers (Tag 5) gelegt. Während der Kulturzeit werden die Embryonen in handelsüblichen Kulturmedien gehalten und erst am Tag des Transfers aus dem Zeitraffer-Inkubator entfernt. Embryonen interagieren mit den Medien und können das Blastozystenstadium entwickeln (5-6 Tage Kultur), zu welchem ​​Zeitpunkt eine Auswahl für den Transfer getroffen wird. Während der In-vitro-Kultur wird ein einzelnes Bild, das im Zeitraffer-Inkubator aufgenommen wurde, verwendet, um die Embryonen gemäß dem Konsens von Istanbul routinemäßig morphologisch einzustufen. An Tag 5 werden sich entwickelnde Embryonen bewertet (gemäß den Kriterien der Studie vs. der Kontrollgruppe), um den Embryo für den Transfer in den Patienten auszuwählen. Überzählige GQE werden für die zukünftige Verwendung kryokonserviert.

Zeitrafferfotografie Alle Embryonen werden gemäß den Anweisungen des Herstellers in Vertiefungen von Zeitrafferkulturschalen (Embryoskop) platziert. Embryonen in beiden Gruppen werden ohne Medienwechsel bis zum Blastozystenstadium kultiviert. Das Zeitraffersystem besteht aus einem Desktop-Inkubator, der seine Umgebung (pH, CO2 und O2) kontrolliert und während der gesamten Dauer der Kulturperioden Bilder in bis zu 11 Fokusebenen aufnimmt.

Morphologische Bewertung Die Embryomorphologie wird gemäß dem Gardner-Score bewertet und dann bei Bedarf für die Veröffentlichung in das Konsensussystem von Istanbul übersetzt.

Um sicherzustellen, dass alle Embryologen die Embryonalentwicklung korrekt kommentieren und die Blastozysten auf die gleiche Weise bewerten, wird vor Beginn der Studie ein Validierungsprozess durchgeführt. Die Standardisierung wird durch einen Prozess erreicht, bei dem die Embryologen 20 Blastozysten am Tag 5 der Entwicklungsphase bewerten, die auf einer CD bereitgestellt werden, wobei das Verfahren routinemäßig im Labor nachgeahmt wird. Die Embryologen müssen zugelassen werden, um Embryonen in der Studie bewerten zu dürfen.

Embryobewertung (beide Gruppen). Die Embryonen werden bis zum 5. Tag im Embryoscope-Zeitraffersystem kultiviert. Wenn sich zwei oder mehr Blastozysten von guter Qualität (GQB), d. h. die ein morphologisches Mindestkriterium von 3BB oder besser erfüllen, entwickeln, wird eine vorläufige Entscheidung darüber getroffen, welcher Embryo für den Transfer ausgewählt wird. Danach wird das Paar randomisiert entweder der Kontroll- oder der Zeitraffergruppe zugeteilt.

Entscheidungsfindung in der Zeitraffergruppe Wenn das Paar in die Zeitraffergruppe randomisiert wird, werden alle Embryonen, die das Blastozystenstadium erreicht haben, annotiert. Die Blastozyste mit dem höchsten KID-Score (Tag 5) wird für den Transfer ausgewählt. Um eine zuverlässige KID-Bewertung zu gewährleisten, können die morphologischen Ereignisse erreicht werden; Zeit bis 2, 3, 4 und 5 Zellen, Zeit bis zum Beginn der Blastulation (tSB) und TE-Scores müssen ausgewertet werden.

Entscheidungsfindung in der Kontrollgruppe Wenn das Paar in die Kontrollgruppe randomisiert wird, wird die vorläufige Entscheidung zur Embryonenauswahl beibehalten.

Studienüberwachung. Eine Data Study Monitoring Board (DSMB)-Gruppe wird zugewiesen und hat die Aufgabe, sowohl Sicherheitsüberprüfungen als auch eine Zwischenanalyse durchzuführen (geplant, wenn ca. 50 % der Patienten rekrutiert wurden).