Kunnen time-lapse-parameters worden gebruikt om de zwangerschap van menselijke embryo's te voorspellen?

Het doel is om te onderzoeken of een algoritme berekend op basis van time-lapse-fotografie van menselijke embryo's op zich de voorspelling van het voortplantingspotentieel van het embryo kan verbeteren in vergelijking met alleen de embryomorfologie.

METHODEN EN MATERIAAL IVF-procedure Oöcyten die 36 ± 1 uur na hCG-toediening worden gewonnen, zullen worden bevrucht door middel van standaardinseminatie of ICSI. De ochtend na het ophalen van de eicel (dag 1) worden de zygoten in time-lapse-objectglaasjes van het embryo geplaatst voor kweek tot de dag van overdracht (dag 5). Tijdens de kweekperiode worden de embryo's bewaard in in de handel verkrijgbare kweekmedia en worden ze pas op de dag van de overdracht uit de time-lapse-incubator verwijderd. Embryo's staan ​​in wisselwerking met de media en mogen het blastocyststadium (5-6 dagen kweek) ontwikkelen, waarna selectie voor overdracht zal worden gemaakt. Tijdens de in vitro-kweek zal een enkel beeld dat in de time-lapse-incubator is vastgelegd, worden gebruikt om routinematig morfologische classificatie van embryo's uit te voeren, volgens de consensus van Istanbul. Op dag 5 zullen zich ontwikkelende embryo's worden beoordeeld (volgens de criteria van studie vs. controlegroep) om het embryo te selecteren voor terugplaatsing in de patiënt. Overtallige GQE wordt ingevroren voor toekomstig gebruik.

Time-lapse-fotografie Alle embryo's worden volgens de instructies van de fabrikant in wells van time-lapse-kweekschalen (Embryoscope) geplaatst. Embryo's in beide groepen zullen worden gekweekt tot het blastocyststadium zonder mediaverandering. Het time-lapse-systeem bestaat uit een desktop-incubator die de omgeving (pH, CO2 en O2) regelt en foto's maakt in maximaal 11 brandpuntsvlakken gedurende de gehele kweekperiode.

Morfologische scores Embryomorfologie wordt gescoord volgens de Gardner-score en vervolgens vertaald naar het Istanbul-consensussysteem indien nodig voor publicatie.

Om ervoor te zorgen dat alle embryologen de embryo-ontwikkeling correct annoteren en de blastocysten op dezelfde manier scoren, zal er een validatieproces worden uitgevoerd vóór aanvang van het onderzoek. De standaardisatie zal tot stand worden gebracht door middel van een proces waarbij de embryologen 20 blastocysten scoren op dag 5 van de ontwikkelingsfase, die op een cd worden geleverd, waarmee wordt nagebootst dat de procedure routinematig in het laboratorium zal worden uitgevoerd. De embryologen zullen erkend moeten worden om embryo's te mogen scoren in het onderzoek.

Embryo-evaluatie (beide groepen). Embryo's worden tot dag 5 gekweekt in het Embryoscope time-lapse-systeem. Als zich twee of meer blastocysten van goede kwaliteit (GQB) ontwikkelen, d.w.z. die voldoen aan minimale morfologische criteria van 3BB of beter, wordt een voorlopige beslissing genomen over welk embryo moet worden geselecteerd voor terugplaatsing. Daarna wordt het paar gerandomiseerd in de controle- of de time-lapse-groep.

Besluitvorming in de time-lapse-groep Als het paar gerandomiseerd wordt in de time-lapse-groep, worden alle embryo's die het blastocyststadium hebben bereikt, geannoteerd. De blastocyst met de hoogste KID-score (dag 5) wordt gekozen voor overdracht. Om te zorgen voor een betrouwbare KID-score kunnen de morfologische gebeurtenissen worden behaald; tijd tot 2, 3, 4 en 5 cellen, tijd tot start van blastulatie (tSB) en TE-scores moeten worden geëvalueerd.

Besluitvorming in de controlegroep Als het paar gerandomiseerd wordt naar de controlegroep, blijft de voorlopige embryoselectiebeslissing behouden.

Studiebewaking. Er zal een Data Study Monitoring Board (DSMB)-groep worden aangesteld die tot taak heeft zowel veiligheidscontroles als een tussentijdse analyse uit te voeren (gepland wanneer ca. 50% van de patiënten is geworven).