Kan Time-lapse-parametrar användas för att förutsäga graviditet hos mänskliga embryon?

Syftet är att studera om algoritmer beräknade från time-lapse-fotografering av mänskliga embryon i sig kan förbättra förutsägelsen av embryots reproduktionspotential jämfört med enbart embryomorfologi.

METODER OCH MATERIAL IVF-procedur Oocyter som hämtas 36±1 timme efter hCG-administrering kommer att befruktas med antingen standardinsemination eller ICSI. Morgonen efter oocythämtning (dag 1) kommer zygoter att placeras i embryo-time-lapse-objektglas för odling fram till överföringsdagen (dag 5). Under odlingstiden kommer embryon att förvaras i kommersiellt tillgängliga odlingsmedier och kommer inte att tas bort från time-lapse-inkubatorn förrän dagen för överföringen. Embryon interagerar med media och kommer att tillåtas utveckla blastocyststadiet (5-6 dagars odling) vid vilken tidpunkt val för överföring kommer att göras. Under in vitro-odlingen kommer en enda bild som tagits i time-lapse-inkubatorn att användas för att rutinmässigt morfologiskt gradera embryon, enligt Istanbuls konsensus. På dag 5 kommer embryon som utvecklas att bedömas (enligt kriterierna för studien kontra kontrollgruppen) för att välja embryot för överföring till patienten. Överflödiga GQE kommer att kryokonserveras för framtida användning.

Time-lapse-fotografering Alla embryon kommer att placeras i brunnar med time-lapse-odlingsskålar (Embryoscope) enligt tillverkarens instruktioner. Embryon i båda grupperna kommer att odlas till blastocyststadiet utan någon medieförändring. Time-lapse-systemet består av en stationär inkubator som kontrollerar sin miljö (pH, CO2 och O2) samt tar bilder i upp till 11 fokalplan under hela odlingsperioderna.

Morfologisk poängsättning Embryomorfologi kommer att bedömas enligt Gardner-poängen och sedan översättas till Istanbuls konsensussystem om det behövs för publicering.

För att säkerställa att alla embryologer kommenterar embryots utveckling korrekt samt poängsätter blastocysterna på samma sätt, kommer en valideringsprocess att utföras innan studien påbörjas. Standardiseringen kommer att åstadkommas genom en process där embryologerna kommer att få 20 blastocyster på dag 5-utvecklingsstadiet, som kommer att tillhandahållas på en CD, imiterande proceduren kommer att utföras rutinmässigt i laboratoriet. Embryologerna måste godkännas för att få poängsätta embryon i studien.

Embryoutvärdering (båda grupperna). Embryon kommer att odlas i Embryoscope time-lapse-systemet fram till dag 5. Om två eller flera blastocyster av god kvalitet (GQB), d.v.s. som uppfyller ett minsta morfologiskt kriterium på 3BB eller bättre, utvecklas, fattas ett preliminärt beslut om vilket embryo som ska väljas för överföring. Därefter randomiseras paret till antingen kontroll- eller time-lapse-gruppen.

Beslutsfattande i time-lapse-gruppen Om paret randomiseras till time-lapse-gruppen kommer alla embryon som har nått blastocyststadiet att kommenteras. Blastocysten med högsta KID-poäng (dag 5) kommer att väljas för överföring. För att säkerställa en tillförlitlig KID-poäng kan de morfologiska händelserna uppnås; tid till 2, 3, 4 och 5 celler, tid till start av blastulation (tSB) och TE-poäng måste utvärderas.

Beslutsfattande i kontrollgruppen Om paret randomiseras till kontrollgruppen kommer det preliminära embryoselektionsbeslutet att upprätthållas.

Studieuppföljning. En Data Study Monitoring Board (DSMB) Group kommer att tillsättas och har till uppgift att genomföra både säkerhetskontroller och en interimsanalys (planerad när ca 50% av patienterna har rekryterats).