Czy można wykorzystać parametry poklatkowe do przewidywania ciąży ludzkich zarodków?

Celem jest zbadanie, czy algorytm obliczony na podstawie fotografii poklatkowej embrionów ludzkich per se może poprawić przewidywanie potencjału reprodukcyjnego zarodka w porównaniu z samą morfologią zarodka.

METODY I MATERIAŁY Procedura IVF Oocyty pobrane 36±1h po podaniu hCG zostaną zapłodnione poprzez standardową inseminację lub ICSI. Rano po pobraniu oocytów (dzień 1) zygoty zostaną umieszczone na szkiełkach poklatkowych zarodków w celu hodowli aż do dnia transferu (dzień 5). W czasie hodowli zarodki będą przechowywane w dostępnych w handlu pożywkach hodowlanych i nie będą wyjmowane z inkubatora poklatkowego do dnia transferu. Zarodki wchodzą w interakcję z pożywką i będą mogły rozwinąć stadium blastocysty (hodowla 5-6 dni), w którym to czasie zostanie przeprowadzona selekcja do transferu. Zgodnie z konsensusem w Stambule, podczas hodowli in vitro pojedynczy obraz zarejestrowany w inkubatorze poklatkowym zostanie wykorzystany do rutynowej oceny morfologicznej zarodków. W dniu 5 rozwijające się zarodki zostaną ocenione (zgodnie z kryteriami badania i grupy kontrolnej) w celu wybrania zarodka do przeniesienia do organizmu pacjenta. Nadliczbowe GQE zostaną poddane kriokonserwacji do wykorzystania w przyszłości.

Zdjęcia poklatkowe Wszystkie zarodki zostaną umieszczone w studzienkach szalek do hodowli poklatkowych (Embrioskop) zgodnie z instrukcjami producenta. Zarodki w obu grupach będą hodowane do stadium blastocysty bez żadnej zmiany pożywki. System poklatkowy składa się z biurkowego inkubatora, który kontroluje swoje środowisko (pH, CO2 i O2), a także robi zdjęcia w maksymalnie 11 płaszczyznach ogniskowych przez cały czas trwania okresów hodowli.

Ocena morfologiczna Morfologia zarodka zostanie oceniona zgodnie z oceną Gardnera, a następnie przetłumaczona na system konsensusu w Stambule, jeśli będzie to potrzebne do publikacji.

Aby upewnić się, że wszyscy embriolodzy poprawnie opisują rozwój zarodka, a także oceniają blastocysty w ten sam sposób, przed rozpoczęciem badania zostanie przeprowadzony proces walidacji. Standaryzacja zostanie przeprowadzona w procesie, w którym embriolodzy ocenią 20 blastocyst w piątym dniu rozwoju, co zostanie dostarczone na płycie CD, imitując procedurę wykonywaną rutynowo w laboratorium. Embriolodzy będą musieli zostać zatwierdzeni, aby móc oceniać zarodki w badaniu.

Ocena zarodków (obie grupy). Zarodki będą hodowane w systemie poklatkowym Embrioscope do 5 dnia. W przypadku rozwinięcia się dwóch lub więcej blastocyst dobrej jakości (GQB), tj. spełniających minimalne kryteria morfologiczne 3BB lub lepsze, podejmowana jest wstępna decyzja, który zarodek wybrać do transferu. Następnie para jest losowo przydzielana do grupy kontrolnej lub grupy poklatkowej.

Podejmowanie decyzji w grupie poklatkowej Jeśli para zostanie losowo przydzielona do grupy poklatkowej, wszystkie zarodki, które osiągnęły stadium blastocysty, zostaną opisane. Do transferu wybrana zostanie blastocysta z najwyższym wynikiem KID (dzień 5). Aby zapewnić wiarygodne wyniki KID, można uzyskać zdarzenia morfologiczne; należy ocenić czas do 2, 3, 4 i 5 komórek, czas do rozpoczęcia blastulacji (tSB) i wyniki TE.

Podejmowanie decyzji w grupie kontrolnej Jeśli para zostanie losowo przydzielona do grupy kontrolnej, podtrzymana zostanie wstępna decyzja o selekcji zarodków.

Monitorowanie badania. Zostanie przydzielona Grupa Rady Monitorującej Badania Danych (DSMB), której zadaniem będzie przeprowadzanie zarówno kontroli bezpieczeństwa, jak i tymczasowej analizy (planowanej po zrekrutowaniu około 50% pacjentów).