Можно ли использовать параметры покадровой съемки для прогнозирования беременности человеческих эмбрионов?

Цель состоит в том, чтобы изучить, может ли алгоритм, рассчитанный на основе покадровой фотографии человеческих эмбрионов, сам по себе улучшить предсказание репродуктивного потенциала эмбриона по сравнению только с морфологией эмбриона.

МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛ Процедура ЭКО Ооциты, полученные через 36 ± 1 час после введения ХГЧ, будут оплодотворены либо стандартной инсеминацией, либо ИКСИ. На следующее утро после извлечения ооцитов (день 1) зиготы будут помещены в слайды для покадровой съемки эмбрионов для культивирования до дня переноса (день 5). В течение времени культивирования эмбрионы будут храниться в коммерчески доступных питательных средах и не будут удалены из инкубатора покадровой съемки до дня переноса. Эмбрионы взаимодействуют со средой, и им будет позволено развиться на стадии бластоцисты (культура 5-6 дней), во время которой будет сделан выбор для переноса. Согласно Стамбульскому консенсусу, во время культивирования in vitro одно изображение, полученное в инкубаторе с интервальной съемкой, будет использоваться для стандартной морфологической оценки эмбрионов. На 5-й день будут оцениваться развивающиеся эмбрионы (в соответствии с критериями исследования и контрольной группы), чтобы выбрать эмбрион для переноса пациенту. Излишние GQE будут крионированы для использования в будущем.

Покадровая фотография Все эмбрионы будут помещены в лунки чашек для покадровой культуры (эмбриоскоп) в соответствии с инструкциями производителя. Эмбрионы в обеих группах будут культивироваться до стадии бластоцисты без смены среды. Система покадровой съемки состоит из настольного инкубатора, который контролирует окружающую среду (pH, CO2 и O2), а также делает снимки в 11 фокальных плоскостях на протяжении всего периода культивирования.

Морфологическая оценка Морфология эмбриона будет оцениваться по шкале Гарднера, а затем при необходимости для публикации будет переведена в Стамбульскую систему консенсуса.

Чтобы гарантировать, что все эмбриологи правильно аннотируют развитие эмбриона, а также одинаково оценивают бластоцисты, перед началом исследования будет проведен процесс проверки. Стандартизация будет осуществляться с помощью процесса, при котором эмбриологи подсчитывают 20 бластоцист на стадии развития 5-го дня, которые будут предоставлены на компакт-диске, имитируя процедуру, которая будет выполняться в лаборатории в обычном порядке. Эмбриологи должны быть одобрены, чтобы иметь возможность подсчитывать эмбрионы в исследовании.

Оценка эмбрионов (обе группы). Эмбрионы будут культивироваться в системе покадровой съемки Embryoscope до 5-го дня. Если развиваются две или более бластоцисты хорошего качества (GQB), то есть отвечающие минимальным морфологическим критериям 3BB или лучше, принимается предварительное решение о том, какой эмбрион выбрать для переноса. После этого пара случайным образом распределяется либо на контрольную, либо на временную группу.

Принятие решения в группе замедленной съемки Если пара будет рандомизирована в группу замедленной съемки, все эмбрионы, достигшие стадии бластоцисты, будут аннотированы. Для переноса будет выбрана бластоциста с наивысшим показателем KID (5-й день). Для обеспечения надежной оценки KID можно получить морфологические события; необходимо оценить время до 2, 3, 4 и 5 клеток, время до начала бластуляции (tSB) и показатели TE.

Принятие решения в контрольной группе Если пара будет рандомизирована в контрольную группу, предварительное решение о выборе эмбриона будет сохранено.

Мониторинг исследования. Будет назначена группа Совета по мониторингу исследования данных (DSMB), перед которой будет поставлена ​​задача проведения как проверок безопасности, так и промежуточного анализа (запланировано, когда будет набрано около 50% пациентов).