Immunhistokjemisk vurdering av programmert dødsligand1 og LC3B i GBM

Gliomer utgjør nesten 30 % av alle primære hjernesvulster, og er ansvarlige for flertallet av dødsfallene fra primære hjernesvulster.

Glioblastom er den vanligste primære maligne hjernesvulsten hos voksne, og står for 60-70 % av gliomene og 15 % av primære hjernesvulster. Glioblastom er den mest aggressive og udifferensierte typen gliom og betegnet WHO grad IV.

Programmert celledød 1 (PD-1) er en proteinreseptor som fungerer som et immunkontrollpunkt. Det formidler et hemmende signal til T-celler. Ved kreft beskytter den svulster mot cytotoksiske T-lymfocytter (CTL). Interaksjonen mellom PD1 og liganden PD-L1 på overflaten av T-celler undertrykker deres funksjon og hindrer gjenkjennelsen av tumorceller. PD-L1-ekspresjon er omvendt korrelert med tettheten til intratumorale CD8+ (Differensieringsklynge 8) T-celler .

Autofagi er en katabolsk prosess som fører til cellulær nedbrytning og resirkulering ved lysosomal fordøyelse. Slik lar cellene tilpasse seg stress). Autophagy fremmer tumorutvikling, progresjon og terapiresistens på grunn av sin pro-overlevelsesrolle under stress som stråling og kjemoterapi. LC3B (mikrotubulær assosiert protein lett kjede 3 B) er en ofte brukt markør for å overvåke autofagi. PD-L1 har vært relatert til autofagi. Nylige funn fra eksperimenter med murine melanomceller og humane eggstokkreftceller indikerte at celler som uttrykker høye nivåer av PD-L1 er mer følsomme for autofagi-hemmere enn celler som uttrykker PD-L1 svakt. Dette funnet gir potensielle muligheter for å bruke autofagi-hemmere i PD-L1-overuttrykkende celler som en ny vei innen kreftbehandling. Dermed ikke studert i GBM før, vår studie er en ren ny studie.

Forfatterne antar at både PD-L1 og LC3B er sterkt uttrykt i GBM-celler og høyt PDL1-uttrykk er assosiert med lavt CTL-tall. Det er mulig at forhøyede nivåer av PD-L1- og LC3B-markører indikerer immunhemming, økt autofagi og dårlig prognose, og dermed vil hemmingen deres ha terapeutisk fordel.

Til dags dato og så vidt vi vet, har denne hypotesen ikke blitt fullstendig testet spesielt på vår lokalitet. For å utforske vår hypotese er dette arbeidet organisert i tre spesifikke mål:

1. For å evaluere forholdet mellom PD-L1-uttrykk og CTL-antall i GBM.
2. For å evaluere uttrykket av PDL-1 og LC3B i GBM og å vurdere forholdet deres.
3. Å utforske den prognostiske relevansen av PDL-1 og LC3B i GBM ved å relatere nivået av deres uttrykk til noen etablerte prognostiske faktorer (pasientens alder, multifokal svulst, total eller subtotal eksisjon, tumorgjenvekst, karnofsky ytelsesscore og histopatologiske egenskaper som: nekrose) .

Formalinfikserte-parafininnstøpte vevsprøver av omtrent sekstien tilfeller av GBM og nærliggende tilsynelatende normalt hjernevev vil bli hentet fra privat laboratorium.

Histologisk diagnose av H&E-fargede snitt vil bli gjennomgått og de histologiske prognostiske kriteriene vil bli vurdert.

Immunhistokjemisk farging for PDL-1, CD8 og LC3B ved bruk av musemonoklonale antistoffer med immunoperoksidasefarging vil bli brukt som visualiseringsmetode. Antistofffortynninger, antigenhentingsmetoder og inkubasjonstid vil alle bli utført i henhold til produsentens instruksjoner.

Prøvestørrelsesberegning ble utført ved å bruke G*Power 3-programvaren. En beregnet prøve på 61 glioblastompasienter vil være nødvendig for å oppdage en effektstørrelse på 0,1 (HR varierte mellom 1,54 og 1,74 i den multivariate Cox Hazard Proportion Regresjon for PD-L1-ekspresjonsnivået), med en feilsannsynlighet på 0,05 og 80 % kraft. på en ensidig test.

Korrelasjon mellom PD-L1, CTL-tall og LC3B-ekspresjon og prognostiske kriterier for GBM vil bli utført ved hjelp av en dataprogramvare SPSS (Statistical Package for Social Sciences).