Evaluación inmunohistoquímica del ligando 1 de muerte programada y LC3B en GBM

Los gliomas representan casi el 30% de todos los tumores cerebrales primarios y son responsables de la mayoría de las muertes por tumores cerebrales primarios.

El glioblastoma es el tumor cerebral maligno primario más frecuente en adultos y representa el 60-70 % de los gliomas y el 15 % de los tumores cerebrales primarios. El glioblastoma es el tipo de glioma más agresivo e indiferenciado y se designa como Grado IV de la OMS.

La muerte celular programada 1 (PD-1) es un receptor de proteínas que funciona como un punto de control inmunitario. Transmite una señal inhibidora a las células T. En el cáncer, protege a los tumores de los linfocitos T citotóxicos (CTL). La interacción de PD1 con su ligando PD-L1 en la superficie de las células T suprime su función y dificulta el reconocimiento de las células tumorales. La expresión de PD-L1 está inversamente correlacionada con la densidad de células T CD8+ intratumorales (grupo de diferenciación 8). .

La autofagia es un proceso catabólico que conduce a la degradación celular y al reciclaje por digestión lisosomal. Permitiendo así que las células se adapten al estrés). La autofagia promueve el desarrollo tumoral, la progresión y la resistencia a la terapia debido a su papel favorable a la supervivencia bajo estrés como la radiación y la quimioterapia. LC3B (cadena ligera 3 B de proteína asociada a microtúbulos) es un marcador comúnmente utilizado para controlar la autofagia. PD-L1 se ha relacionado con la autofagia. Hallazgos recientes de experimentos con células de melanoma murino y células de cáncer de ovario humano indicaron que las células que expresan altos niveles de PD-L1 son más sensibles a los inhibidores de la autofagia que las células que expresan débilmente PD-L1. Este hallazgo brinda oportunidades potenciales para el uso de inhibidores de la autofagia en células que sobreexpresan PD-L1 como una nueva vía en el tratamiento del cáncer. Por lo tanto, no estudiado en GBM antes, nuestro estudio es puro estudio de novela.

Los autores plantean la hipótesis de que tanto PD-L1 como LC3B se expresan mucho en las células GBM y que la expresión alta de PDL1 se asocia con un recuento bajo de CTL. Es posible que los niveles elevados de los marcadores PD-L1 y LC3B indiquen una inhibición inmunitaria, un aumento de la autofagia y un mal pronóstico, por lo que su inhibición tendrá un beneficio terapéutico.

Hasta la fecha y hasta donde sabemos, esta hipótesis no ha sido completamente probada, especialmente en nuestra localidad. Para explorar nuestra hipótesis, este trabajo se organiza en torno a tres objetivos específicos:

1. Evaluar la relación entre la expresión de PD-L1 y el recuento de CTL en GBM.
2. Evaluar la expresión de PDL-1 y LC3B en GBM y evaluar su relación.
3. Explorar la relevancia pronóstica de PDL-1 y LC3B en GBM al relacionar el nivel de su expresión con algunos factores pronósticos establecidos (edad del paciente, tumor multifocal, escisión total o subtotal, recrecimiento del tumor, puntuación de rendimiento de Karnofsky y características histopatológicas como: necrosis) .

Se obtendrán muestras de tejido fijadas en formalina e incluidas en parafina de aproximadamente sesenta y un casos de GBM y tejido cerebral aparentemente normal cercano de un laboratorio privado.

Se revisará el diagnóstico histológico de las secciones teñidas con H&E y se evaluarán los criterios de pronóstico histológicos.

La tinción inmunohistoquímica para PDL-1, CD8 y LC3B utilizando anticuerpos monoclonales de ratón con tinción de inmunoperoxidasa se utilizará como método de visualización. Las diluciones de anticuerpos, los métodos de recuperación de antígenos y el tiempo de incubación se realizarán de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

El cálculo del tamaño de la muestra se realizó con el software G*Power 3. Se necesitará una muestra calculada de 61 pacientes con glioblastoma para detectar un tamaño del efecto de 0,1 (el HR osciló entre 1,54 y 1,74 en la regresión multivariable de la proporción de riesgos de Cox para el nivel de expresión de PD-L1), con una probabilidad de error de 0,05 y una potencia del 80 %. en una prueba de una cola.

La correlación entre PD-L1, el recuento de CTL y la expresión de LC3B y los criterios de pronóstico de GBM se realizarán utilizando un software informático SPSS (paquete estadístico para ciencias sociales).