Иммуногистохимическая оценка лиганда запрограммированной смерти 1 и LC3B при глиобластоме

Глиомы составляют почти 30% всех первичных опухолей головного мозга и являются причиной большинства смертей от первичных опухолей головного мозга.

Глиобластома является наиболее распространенной первичной злокачественной опухолью головного мозга у взрослых, на ее долю приходится 60-70% глиом и 15% первичных опухолей головного мозга. Глиобластома является наиболее агрессивным и недифференцированным типом глиомы и классифицируется ВОЗ как IV степень.

Запрограммированная гибель клеток 1 (PD-1) представляет собой белковый рецептор, который функционирует как иммунная контрольная точка. Он передает ингибирующий сигнал Т-клеткам. При раке он защищает опухоли от цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ). Взаимодействие PD1 с его лигандом PD-L1 на поверхности Т-клеток подавляет их функцию и препятствует распознаванию опухолевых клеток. Экспрессия PD-L1 обратно пропорциональна плотности внутриопухолевых CD8+ (кластер дифференцировки 8) Т-клеток. .

Аутофагия — это катаболический процесс, который приводит к деградации и рециркуляции клеток путем лизосомального пищеварения. Это позволяет клеткам адаптироваться к стрессу). Аутофагия способствует развитию опухоли, прогрессированию и резистентности к терапии из-за ее роли в выживании в условиях стресса, такого как лучевая и химиотерапия. LC3B (белок легкой цепи 3 B, ассоциированный с микротрубочками) является широко используемым маркером для мониторинга аутофагии. PD-L1 был связан с аутофагией. Недавние результаты экспериментов с клетками меланомы мышей и клетками рака яичников человека показали, что клетки, экспрессирующие высокие уровни PD-L1, более чувствительны к ингибиторам аутофагии, чем клетки, слабо экспрессирующие PD-L1. Это открытие открывает потенциальные возможности для использования ингибиторов аутофагии в клетках со сверхэкспрессией PD-L1 в качестве нового пути в лечении рака. Таким образом, наше исследование ранее не изучалось в GBM.

Авторы предполагают, что и PD-L1, и LC3B высоко экспрессируются в клетках GBM, а высокая экспрессия PDL1 связана с низким количеством ЦТЛ. Возможно, что повышенные уровни маркеров PD-L1 и LC3B указывают на подавление иммунитета, усиленную аутофагию и плохой прогноз, поэтому их ингибирование будет иметь терапевтический эффект.

На сегодняшний день и насколько нам известно, эта гипотеза не была полностью проверена, особенно в нашей местности. Чтобы исследовать нашу гипотезу, эта работа организована для достижения трех конкретных целей:

1. Оценить взаимосвязь между экспрессией PD-L1 и количеством CTL в GBM.
2. Оценить экспрессию PDL-1 и LC3B в ГБМ и оценить их взаимосвязь.
3. Изучить прогностическую значимость PDL-1 и LC3B при ГБМ, связав уровень их экспрессии с некоторыми установленными прогностическими факторами (возраст пациента, многоочаговая опухоль, полное или субтотальное иссечение, повторный рост опухоли, показатель эффективности Карновского и гистопатологические признаки, такие как: некроз). .

В частной лаборатории будут получены образцы тканей, фиксированных формалином и залитых парафином, примерно шестидесяти одного случая глиобластомы и близлежащая, по-видимому, нормальная мозговая ткань.

Будет пересмотрен гистологический диагноз срезов, окрашенных H&E, и будут оценены гистологические прогностические критерии.

В качестве метода визуализации будет использоваться иммуногистохимическое окрашивание PDL-1, CD8 и LC3B с использованием мышиных моноклональных антител с окрашиванием иммунопероксидазой. Разведение антител, методы извлечения антигена и время инкубации будут проводиться в соответствии с инструкциями производителя.

Расчет размера выборки проводился с использованием программного обеспечения G*Power 3. Расчетная выборка из 61 пациента с глиобластомой потребуется для определения размера эффекта 0,1 (HR варьировался от 1,54 до 1,74 в многомерной регрессии пропорции рисков Кокса для уровня экспрессии PD-L1) с вероятностью ошибки 0,05 и мощностью 80%. по одностороннему тесту.

Корреляция между PD-L1, количеством CTL и экспрессией LC3B и прогностическими критериями GBM будет выполняться с использованием компьютерного программного обеспечения SPSS (Статистический пакет для социальных наук).