Immunhistokemisk vurdering af programmeret dødsligand1 og LC3B i GBM

Gliomer tegner sig for næsten 30 % af alle primære hjernetumorer og er ansvarlige for størstedelen af ​​dødsfaldene fra primære hjernetumorer.

Glioblastom er den mest almindelige primære maligne hjernetumor hos voksne, der tegner sig for 60-70% af gliomer og 15% af primære hjernetumorer. Glioblastom er den mest aggressive og udifferentierede type gliom og betegnes WHO Grade IV.

Programmeret celledød 1 (PD-1) er en proteinreceptor, der fungerer som et immunkontrolpunkt. Det formidler et hæmmende signal til T-celler. Ved kræft beskytter det tumorer mod cytotoksiske T-lymfocytter (CTL). Interaktionen af ​​PD1 med dens ligand PD-L1 på overfladen af ​​T-celler undertrykker deres funktion og hindrer genkendelsen af ​​tumorceller. PD-L1 ekspression er omvendt korreleret med tætheden af ​​intratumorale CD8+ (Cluster of Differentiation 8) T-celler .

Autofagi er en katabolisk proces, der fører til cellulær nedbrydning og genanvendelse ved lysosomal fordøjelse. På den måde tillader cellerne at tilpasse sig stress). Autophagy fremmer tumorudvikling, progression og terapiresistens på grund af sin pro-overlevelsesrolle under stress som stråling og kemoterapi. LC3B (mikrotubulusassocieret protein let kæde 3 B) er en almindeligt anvendt markør til at overvåge autofagi. PD-L1 er blevet relateret til autofagi. Nylige resultater fra eksperimenter med murine melanomceller og humane ovariecancerceller viste, at celler, der udtrykker høje niveauer af PD-L1, er mere følsomme over for autofagi-hæmmere end celler, der svagt udtrykker PD-L1. Dette fund giver potentielle muligheder for at bruge autofagi-hæmmere i PD-L1-overudtrykkende celler som en ny vej til kræftbehandling. Således ikke studeret i GBM før, vores undersøgelse er ren ny undersøgelse.

Forfatterne antager, at både PD-L1 og LC3B er højt udtrykt i GBM-celler, og høj PDL1-ekspression er forbundet med lavt CTL-tal. Det er muligt, at forhøjede niveauer af PD-L1- og LC3B-markører indikerer immunhæmning, øget autofagi og dårlig prognose, så deres hæmning vil have terapeutisk fordel.

Til dato og efter vores bedste overbevisning er denne hypotese ikke blevet fuldt testet, især på vores lokalitet. For at udforske vores hypotese er dette arbejde organiseret i tre specifikke mål:

1. At evaluere forholdet mellem PD-L1-ekspression og CTL-antal i GBM.
2. At evaluere ekspressionen af ​​PDL-1 og LC3B i GBM og vurdere deres forhold.
3. At udforske den prognostiske relevans af PDL-1 og LC3B i GBM ved at relatere niveauet af deres ekspression til nogle etablerede prognostiske faktorer (patientens alder, multifokal tumor, total eller subtotal excision, tumorgenvækst, karnofsky præstationsscore og histopatologiske træk som: nekrose) .

Formalin-fikseret-paraffin-indlejrede vævsprøver af omkring 61 tilfælde af GBM og nærliggende tilsyneladende normalt hjernevæv vil blive opnået fra privat laboratorium.

Histologisk diagnose af H&E-farvede snit vil blive gennemgået, og de histologiske prognostiske kriterier vil blive vurderet.

Immunhistokemisk farvning for PDL-1, CD8 og LC3B ved hjælp af muse monoklonale antistoffer med immunoperoxidasefarvning vil blive brugt som visualiseringsmetode. Antistoffortyndinger, antigenhentningsmetoder og inkubationstid vil alle blive udført i henhold til producentens instruktioner.

Prøvestørrelsesberegning blev udført ved hjælp af G*Power 3-software. En beregnet prøve på 61 glioblastompatienter vil være nødvendig for at detektere en effektstørrelse på 0,1 (HR varierede mellem 1,54 og 1,74 i den multivariate Cox Hazard Proportion Regression for PD-L1 ekspressionsniveauet), med en fejlsandsynlighed på 0,05 og 80 % effekt på en ensidet test.

Korrelation mellem PD-L1, CTL-tal og LC3B-ekspression og prognostiske kriterier for GBM vil blive udført ved hjælp af en computersoftware SPSS (Statistical Package for Social Sciences).