GBM에서 Programmed Death ligand1 및 LC3B의 면역조직화학적 평가

신경아교종은 모든 원발성 뇌종양의 거의 30%를 차지하며 원발성 뇌종양으로 인한 사망의 대부분을 담당합니다.

교모세포종은 성인에서 가장 흔한 원발성 악성 뇌종양으로 신경교종의 60~70%, 원발성 뇌종양의 15%를 차지한다. 교모세포종은 가장 공격적이고 미분화 유형의 신경교종이며 WHO 등급 IV로 지정되었습니다.

프로그램화된 세포 사멸 1(PD-1)은 면역 체크포인트로 기능하는 단백질 수용체입니다. T 세포에 억제 신호를 전달합니다. 암에서는 세포 독성 T 림프구(CTL)로부터 종양을 보호합니다. PD1과 T 세포 표면의 리간드 PD-L1의 상호작용은 기능을 억제하고 종양 세포의 인식을 방해합니다. PD-L1 발현은 종양 내 CD8+(Cluster of Differentiation 8) T 세포의 밀도와 반비례 관계가 있습니다 .

Autophagy는 리소좀 소화에 의한 세포 분해 및 재활용으로 이어지는 이화 과정입니다. 따라서 세포가 스트레스에 적응하도록 허용). Autophagy는 방사선 및 화학 요법과 같은 스트레스 하에서 생존을 촉진하는 역할로 인해 종양 발달, 진행 및 치료 저항성을 촉진합니다. LC3B(microtubule Associated protein light chain 3 B)는 autophagy를 모니터링하는 데 일반적으로 사용되는 마커입니다. PD-L1은 autophagy와 관련이 있습니다. 뮤린 흑색종 세포와 인간 난소암 세포를 사용한 실험에서 최근 발견한 바에 따르면 높은 수준의 PD-L1을 발현하는 세포는 PD-L1을 약하게 발현하는 세포보다 자가포식 억제제에 더 민감합니다. 이 발견은 암 관리의 새로운 방법으로 PD-L1 과발현 세포에서 autophagy 억제제를 사용할 수 있는 잠재적인 기회를 제공합니다. 따라서 이전에 GBM에서 연구되지 않은 우리의 연구는 순수한 새로운 연구입니다.

저자는 PD-L1과 LC3B 모두 GBM 세포에서 높게 발현되고 높은 PDL1 발현은 낮은 CTL 수와 관련이 있다고 가정합니다. PD-L1 및 LC3B 마커의 상승된 수준은 면역 억제, 증가된 자가포식 및 불량한 예후를 나타내므로 이들의 억제가 치료적 이점을 가질 수 있습니다.

지금까지 우리가 아는 한, 이 가설은 특히 우리 지역에서 완전히 테스트되지 않았습니다. 우리의 가설을 탐구하기 위해 이 작업은 세 가지 특정 목표로 구성됩니다.

1. GBM에서 PD-L1 발현과 CTL 수 사이의 관계를 평가하기 위함.
2. GBM에서 PDL-1과 LC3B의 발현을 평가하고 이들의 관계를 평가합니다.
3. GBM에서 PDL-1 및 LC3B의 발현 수준을 일부 확립된 예후 인자(환자 연령, 다발성 종양, 전체 또는 부분절제, 종양 재성장, 카르노프스키 성능 점수 및 조직병리학적 특징: 괴사)와 관련시켜 예후 관련성을 탐색합니다. .

포르말린 고정 파라핀 포매 조직 표본 약 61건의 GBM 사례와 정상으로 보이는 인근 뇌 조직을 개인 실험실에서 확보할 것입니다.

H&E 염색 섹션의 조직학적 진단을 검토하고 조직학적 예후 기준을 평가합니다.

Immunoperoxidase 염색과 함께 마우스 단클론 항체를 사용하여 PDL-1, CD8 및 LC3B에 대한 면역조직화학 염색을 시각화 방법으로 사용합니다. 항체 희석, 항원 검색 방법 및 배양 시간은 모두 제조업체의 지침에 따라 수행됩니다.

샘플 크기 계산은 G*Power 3 소프트웨어를 사용하여 수행되었습니다. 0.05 및 80% 검정력의 오류 확률로 0.1의 효과 크기(PD-L1 발현 수준에 대한 다변량 Cox 위험 비율 회귀에서 HR 범위가 1.54에서 1.74 사이임)를 감지하려면 61명의 교모세포종 환자의 계산된 샘플이 필요합니다. 단측 테스트에서.

PD-L1, CTL 수와 LC3B 발현과 GBM의 예후 기준 간의 상관관계는 컴퓨터 소프트웨어 SPSS(Statistical Package for Social Sciences)를 사용하여 수행될 것이다.