Cumuluscelle mitokondriell aktivitet som en ikke-invasiv markør for embryokvalitet (FLIM)

Denne studien tar sikte på å teste graden av assosiasjon av FLIM-parametre til cumulusceller med kliniske utfall (klinisk graviditet, pågående graviditet ved 12 uker og levende fødsel) av embryoene som er et resultat av de lukkede oocyttene.

Deltakerne vil bli samtykket til og forhåndssignert etter standardregimer for IVFMD, My Duc Hospital og IVFMD PN, My Duc Phu Nhuan Hospital. Standarden er for pasienter med minst 8 follikler ≥ 10 mm på ultralyd ved den induserte eggløsningsdatoen.

Cumulusprøver (CC-er) vil bli samlet inn etter protokollen på dagen for oocytthenting (OPU), tildelt samme nummer som oocytten den ble samlet fra, og forglasset med et Cryotech-sett inntil FLIM-målinger er utført.

Inseminasjon vil bli utført ved bruk av ICSI, 3 - 4 timer etter oocyttuthenting. En prøve av CC-er vil bli kuttet av cumulusmassen til hver oocytt som vurderes til å være moden basert på cumulusmassedisponeringen (fravær av tette koronalag). De gjenværende cumuluscellene vil bli strippet fra OCCene ved å bruke hyaluronidase. Kun modne oocytter vil bli inseminert.

Befruktningskontrollen vil bli utført under omvendt mikroskop i en periode på 16-18 timer etter inseminering. På dag 3 vil embryoevaluering bli utført på et fast tidspunkt 66±2 timer etter befruktning og, for dag 5/6 overføringer ved henholdsvis 116±2 timer eller 140±2 timer, ved å bruke Istanbul-konsensus. Frys-alle-strategi for dag 5-embryo vil bli brukt, og den første frosne embryooverføringssyklusen er enkelt embryooverføring.

På den annen side vil etterforskerne stratifisere embryoer i to grupper basert på de målte FLIM-parametrene fra deres tilknyttede cumulusceller, tilsvarende de "høye" 35% og "lave" 65% av metabolske skårer.

Etterforskerne tar sikte på at embryoer i den "høye" metabolske skåringsgruppen skal ha en 10 % høyere fødselsrate enn kontroller. Forutsatt en nåværende fødselsrate på 32 %, tilsvarer dette en håpet på 42 % levendefødte i "høy"-gruppen (og en 25% levende fødselsrate i "lav"-gruppen). Det kreves totalt 450 pasienter for å oppdage en effekt av denne størrelsen (effekt 0,90, tosidig alfa 5%).

Det primære endepunktet for studien vil være antall levendefødte etter den første embryooverføringen av den påbegynte behandlingssyklusen.