Mitochondriale Aktivität von Cumuluszellen als nicht-invasiver Marker der Embryoqualität (FLIM)

Ziel dieser Studie ist es, das Ausmaß der Assoziation der FLIM-Parameter von Cumuluszellen mit den klinischen Ergebnissen (klinische Schwangerschaft, laufende Schwangerschaft in der 12. Woche und Lebendgeburt) der Embryonen zu testen, die aus den eingeschlossenen Eizellen entstehen.

Den Teilnehmern wird die Einhaltung der Standardschemata von IVFMD, My Duc Hospital und IVFMD PN, My Duc Phu Nhuan Hospital, zugestimmt und vorab unterzeichnet. Der Standard gilt für Patienten mit mindestens 8 Follikeln ≥ 10 mm im Ultraschall zum Zeitpunkt des induzierten Eisprungs.

Cumulus-Proben (CCs) werden gemäß dem Protokoll am Tag der Eizellenentnahme (OPU) entnommen, mit der gleichen Nummer wie die Eizelle, aus der sie entnommen wurden, versehen und mit einem Cryotech-Kit vitrifiziert, bis FLIM-Messungen durchgeführt werden.

Die Befruchtung erfolgt mittels ICSI 3–4 Stunden nach der Eizellentnahme. Eine Probe von CCs wird von der Kumulusmasse jeder Eizelle abgeschnitten, die aufgrund der Kumulusmassenverteilung (Fehlen von dichten Koronaschichten) als reif beurteilt wird. Die verbleibenden Kumuluszellen werden mithilfe von Hyaluronidase von den OCCs befreit. Es werden nur reife Eizellen besamt.

Die Befruchtungskontrolle wird 16–18 Stunden nach der Befruchtung unter einem Umkehrmikroskop durchgeführt. Am dritten Tag wird die Embryonenbewertung zu einem festen Zeitpunkt 66 ± 2 Stunden nach der Befruchtung und für den Transfer am 5./6. Tag nach 116 ± 2 Stunden bzw. 140 ± 2 Stunden unter Verwendung des Istanbuler Konsenses durchgeführt. Es wird die Strategie „Alles einfrieren“ für Embryonen am 5. Tag angewendet und der erste Transferzyklus für eingefrorene Embryonen ist der Transfer einzelner Embryonen.

Andererseits werden die Forscher Embryonen auf der Grundlage der gemessenen FLIM-Parameter der zugehörigen Kumuluszellen in zwei Gruppen einteilen, was den „hohen“ 35 % und „niedrigen“ 65 % der Stoffwechselwerte entspricht.

Die Forscher streben an, dass Embryonen in der Gruppe mit „hoher“ Stoffwechselbewertung eine um 10 % höhere Lebendgeburtenrate aufweisen als die Kontrollen. Geht man von einer aktuellen Lebendgeburtenrate von 32 % aus, entspricht dies einer erhofften Lebendgeburtenrate von 42 % in der „hohen“ Gruppe (und einer Lebendgeburtenrate von 25 % in der „niedrigen“ Gruppe). Um einen Effekt dieser Größenordnung festzustellen (Power 0,90, zweiseitiges Alpha 5 %), sind insgesamt 450 Patienten erforderlich.

Der primäre Endpunkt der Studie wird die Lebendgeburtenrate nach dem ersten Embryotransfer des begonnenen Behandlungszyklus sein.