Cumuluscell mitokondriell aktivitet som en icke-invasiv markör för embryokvalitet (FLIM)

Denna studie syftar till att testa graden av associering av FLIM-parametrar för cumulusceller med kliniska resultat (klinisk graviditet, pågående graviditet vid 12 veckor och levande födsel) av embryona som är resultatet av de inneslutna oocyterna.

Deltagarna kommer att samtyckas till och förundertecknas enligt standardregimer för IVFMD, My Duc Hospital och IVFMD PN, My Duc Phu Nhuan Hospital. Standarden är för patienter med minst 8 folliklar ≥ 10 mm vid ultraljud vid det inducerade ägglossningsdatumet.

Cumulusprover (CC) kommer att samlas in enligt protokollet på dagen för oocytupptagning (OPU), tilldelas samma nummer som oocyten från vilken den samlades in, och förglasade med ett Cryotech-kit tills FLIM-mätningar utförs.

Insemination kommer att utföras med hjälp av ICSI, 3 - 4 timmar efter oocythämtning. Ett prov av CC kommer att skäras av cumulusmassan av varje oocyt som bedöms vara mogen baserat på cumulusmassans disposition (frånvaro av täta koronalager). De återstående cumuluscellerna kommer att tas bort från OCC med hyaluronidas. Endast mogna oocyter kommer att insemineras.

Befruktningskontrollen kommer att utföras under ett inverterat mikroskop under en period av 16-18 timmar efter insemination. På dag 3 kommer embryoutvärdering att utföras vid en bestämd tidpunkt 66±2 timmar efter befruktning och, för dag 5/6 överföringar vid 116±2 timmar respektive 140±2 timmar, med hjälp av Istanbul-konsensus. Frys-allt-strategin för embryot på dag 5 kommer att tillämpas och den första frysta embryoöverföringscykeln är enstaka embryoöverföring.

Å andra sidan kommer utredarna att stratifiera embryon i två grupper baserat på de uppmätta FLIM-parametrarna från deras associerade cumulusceller, motsvarande de "höga" 35% och "låga" 65% av metabola poäng.

Utredarna strävar efter att embryon i den "höga" metaboliska poänggruppen ska ha en 10% högre födelsetal än kontroller. Om man antar en nuvarande födelsetal på 32 %, motsvarar detta en efterlängtad 42 % levande födelse i gruppen "höga" (och 25 % levande födelse i gruppen "låg"). Totalt krävs 450 patienter för att upptäcka en effekt av denna storlek (effekt 0,90, dubbelsidig alfa 5%).

Studiens primära effektmått kommer att vara antalet levande födslar efter den första embryoöverföringen av den påbörjade behandlingscykeln.