Cumuluscelle mitokondriel aktivitet som en ikke-invasiv markør for embryokvalitet (FLIM)

Denne undersøgelse har til formål at teste omfanget af association af FLIM-parametre for cumulusceller med kliniske resultater (klinisk graviditet, igangværende graviditet ved 12 uger og levende fødsel) af embryoner, der stammer fra de lukkede oocytter.

Deltagerne vil få samtykke til og forhåndsunderskrevet efter standardregimer for IVFMD, My Duc Hospital og IVFMD PN, My Duc Phu Nhuan Hospital. Standarden er for patienter med mindst 8 follikler ≥ 10 mm på ultralyd på den inducerede ægløsningsdato.

Cumulus-prøver (CC'er) vil blive indsamlet efter protokollen på dagen for oocytopsamling (OPU), tildelt det samme nummer som oocytten, hvorfra den blev indsamlet, og forglasset med et Cryotech-kit, indtil FLIM-målinger udføres.

Insemination vil blive udført ved brug af ICSI, 3 - 4 timer efter oocytudtagning. En prøve af CC'er vil blive skåret af cumulusmassen af ​​hver oocyt, der vurderes at være moden baseret på cumulusmassedispositionen (fravær af tætte koronalag). De resterende cumulusceller vil blive strippet fra OCC'erne ved hjælp af hyaluronidase. Kun modne oocytter vil blive insemineret.

Befrugtningskontrollen vil blive udført under et omvendt mikroskop i en periode på 16-18 timer efter insemination. På dag 3 vil embryoevaluering blive udført på et fast tidspunkt 66±2 timer efter befrugtning og for dag 5/6 overførsler efter henholdsvis 116±2 timer eller 140±2 timer ved hjælp af Istanbul-konsensus. Frys-alt-strategi for dag 5 embryo vil blive anvendt, og den første frosne embryooverførselscyklus er enkelt embryooverførsel.

På den anden side vil efterforskerne stratificere embryoner i to grupper baseret på de målte FLIM-parametre fra deres tilknyttede cumulusceller, svarende til de "høje" 35% og "lave" 65% af metaboliske scores.

Efterforskerne sigter mod, at embryoner i den "høje" metaboliske scoregruppe skal have en 10% højere fødselsrate end kontroller. Hvis man antager en aktuel fødselsrate på 32 %, svarer dette til en håbet 42 % levende fødselsrate i den "høje" gruppe (og en 25% levende fødselsrate i den "lave" gruppe). I alt 450 patienter er nødvendige for at opdage en effekt af denne størrelse (power 0,90, tosidet alfa 5%).

Studiets primære endepunkt vil være den levende fødselsrate efter den første embryooverførsel af den påbegyndte behandlingscyklus.