Митохондриальная активность клеток кумулюса как неинвазивный маркер качества эмбриона (FLIM)

Это исследование направлено на проверку степени связи параметров FLIM клеток кумулюса с клиническими исходами (клиническая беременность, продолжающаяся беременность на сроке 12 недель и живорождение) эмбрионов, полученных из закрытых ооцитов.

Участники получат согласие и предварительно подпишутся в соответствии со стандартными схемами IVFMD, больницы My Duc и IVFMD PN, больницы My Duc Phu Nhuan. Стандартом являются пациенты с не менее чем 8 фолликулами ≥ 10 мм по данным УЗИ в день индуцированной овуляции.

Образцы кумулюса (CC) будут собираться в соответствии с протоколом в день отбора ооцитов (OPU), им присваивается тот же номер, что и ооциту, из которого он был взят, и они витрифицируются с помощью набора Cryotech до проведения измерений FLIM.

Осеменение проводят с помощью ИКСИ через 3-4 часа после извлечения ооцитов. Образец CC будет срезан из кумулюсной массы каждого ооцита, признанного зрелым на основании расположения кумулюсной массы (отсутствие плотных слоев короны). Оставшиеся клетки кумулюса будут удалены из OCC с помощью гиалуронидазы. Осеменяют только зрелые ооциты.

Проверка оплодотворения будет проводиться под инвертированным микроскопом в течение 16-18 часов после осеменения. На 3-й день оценка эмбриона будет проводиться в фиксированный момент времени через 66 ± 2 часа после оплодотворения, а для переноса на 5-й и 6-й день — через 116 ± 2 часа или 140 ± 2 часа, соответственно, с использованием Стамбульского консенсуса. Будет применяться стратегия замораживания всех эмбрионов на 5-й день, и первый цикл переноса замороженных эмбрионов — это перенос одного эмбриона.

С другой стороны, исследователи разделят эмбрионов на две группы на основе измеренных параметров FLIM из связанных с ними кумулюсных клеток, соответствующих «высоким» 35% и «низким» 65% метаболических показателей.

Исследователи стремятся к тому, чтобы у эмбрионов в группе с «высокой» метаболической оценкой уровень живорождения был на 10% выше, чем у контрольной группы. Если предположить, что текущий коэффициент рождаемости составляет 32%, это соответствует ожидаемому уровню рождаемости 42% в «высокой» группе (и 25% живорожденности в «низкой» группе). Всего требуется 450 пациентов, чтобы обнаружить эффект такого масштаба (мощность 0,90, двусторонняя альфа 5%).

Первичной конечной точкой исследования будет показатель живорождения после первого переноса эмбрионов в начатом цикле лечения.