Actividad mitocondrial de células del cúmulo como marcador no invasivo de la calidad del embrión (FLIM)

Este estudio tiene como objetivo probar el grado de asociación de los parámetros FLIM de las células del cúmulo con los resultados clínicos (embarazo clínico, embarazo en curso a las 12 semanas y nacido vivo) de los embriones que resultan de los ovocitos encerrados.

Los participantes serán consentidos y prefirmados siguiendo los regímenes estándar de IVFMD, My Duc Hospital y IVFMD PN, My Duc Phu Nhuan Hospital. El estándar es para pacientes con al menos 8 folículos ≥ 10 mm en la ecografía en la fecha de ovulación inducida.

Las muestras de cúmulos (CC) se recolectarán siguiendo el protocolo el día de la recogida de ovocitos (OPU), se les asignará el mismo número que el ovocito del que se recolectaron y se vitrificarán con un kit Cryotech hasta que se realicen las mediciones de FLIM.

La inseminación se realizará mediante ICSI, 3 - 4 horas después de la recuperación de los ovocitos. Se cortará una muestra de CC de la masa del cúmulo de cada ovocito que se considere maduro en función de la disposición de la masa del cúmulo (ausencia de capas corona apretadas). Las células del cúmulo restantes se eliminarán de los OCC utilizando hialuronidasa. Solo se inseminarán ovocitos maduros.

El control de fecundación se realizará bajo microscopio invertido durante un periodo de 16-18 horas después de la inseminación. El día 3, la evaluación del embrión se realizará en un punto de tiempo fijo 66±2 horas después de la fertilización y, para las transferencias del día 5/6 a las 116±2 horas o 140±2 horas, respectivamente, usando el consenso de Estambul. Se aplicará la estrategia de congelación completa para el embrión del día 5 y el primer ciclo de transferencia de embriones congelados es la transferencia de un solo embrión.

Por otro lado, los investigadores estratificarán los embriones en dos grupos según los parámetros FLIM medidos de sus células del cúmulo asociadas, correspondientes al 35 % "alto" y al 65 % "bajo" de las puntuaciones metabólicas.

El objetivo de los investigadores es que los embriones del grupo de puntuación metabólica "alta" tengan una tasa de nacidos vivos un 10 % más alta que los controles. Suponiendo una tasa de nacidos vivos actual del 32 %, esto corresponde a una tasa de nacidos vivos esperada del 42 % en el grupo "alto" (y una tasa de nacidos vivos del 25 % en el grupo "bajo"). Se requiere un total de 450 pacientes para detectar un efecto de este tamaño (potencia 0,90, alfa bilateral 5%).

El criterio principal de valoración del estudio será la tasa de nacidos vivos después de la primera transferencia de embriones del ciclo de tratamiento iniciado.