Evaluering av en ny mikrobiologisk diagnostisk test for latent mycobacterium tuberculosis-infeksjon (MICRO-LTBI)

Mål:

i) For å bestemme om M. tuberculosis (Mtb) DNA kan påvises i CD34+ perifert blod mononukleære celler (PBMC) isolert fra

• asymptomatiske voksne blir screenet for LTBI (LTBI screenees)
• voksne med nylig diagnostisert aktiv tuberkulose (aktive tilfeller) ii) For å finne ut om stammer av Mtb isolert fra CD34+ PBMC fra nylige husholdnings-TB-kontakter er genetisk identiske med de som er isolert fra oppspytet til indekstilfeller med lunge-TB som de har blitt eksponert for iii ) Å karakterisere immunologiske, kliniske og epidemiologiske korrelater av evne til å oppdage Mtb i CD34+ PBMC i en heterogen populasjon av IGRA-positive og -negative LTBI-screenees.

iv) For å bestemme om tilstedeværelse av Mtb-DNA i CD34+ PBMC av IGRA-positive LTBI-screenees assosieres med tilstedeværelsen av en perifer blodtranskripsjonssignatur som nylig ble rapportert for å forutsi risiko for progresjon til aktiv TB v) For å vurdere longitudinell endring i CD34+ PCR-analyseresultater i

- LTBI screenees som fullfører kjemoprofylakse for LTBI

• LTBI screenees som ikke får kjemoprofylakse
• Pasienter som fullfører behandling for aktiv tuberkulose

4.1. Bakgrunn

Tuberkulose (TB) er en infeksjonssykdom forårsaket av organismer av M. tuberculosis-komplekset (MTBC). Det primære patogenet hos mennesker er M.tuberculosis (Mtb). TB påvirker vanligvis lungene og overføres gjennom inhalering av smittsomme dråper ekspektorert av en pasient med aktiv lunge-TB. Tuberkulose har vært en viktig årsak til sykelighet og dødelighet gjennom menneskets historie. I Europa og Nord-Amerika ble en økning i tuberkulosetilfeller på 1600- og 1700-tallet fulgt av en rask nedgang som først og fremst ble tilskrevet forbedrede sosioøkonomiske forhold, bruk av folkehelsetiltak og isolasjon av tuberkulosepasienter.1 Mot slutten av 1800-tallet. etter den nedadgående trenden av TB-tilfeller og dødsfall i Europa og Nord-Amerika, ble to store hendelser, oppdagelsen av Mtb og røntgen, nøkkelen i diagnosen og behandling av TB.1 Deretter førte vaksinasjon med M. bovis bacille Calmette-Guérin (BCG) og antibiotikabehandling i første halvdel av det 20. århundre til global optimisme om at TB-kontroll og eliminering var innen rekkevidde. Imidlertid er tuberkulose fortsatt en alvorlig folkehelsestrussel den dag i dag, og den er den nest ledende smittsomme dødsårsaken globalt. 2, 3 I følge WHO-rapporten fra 2015 skjedde det anslagsvis 9,6 millioner nye tuberkulosetilfeller (hvorav 12 % var HIV co-infisert) og 1,5 millioner dødsfall (hvorav 0,4 millioner var blant HIV co-infiserte personer) globalt i 2014.4 I tillegg anslås en tredjedel av den globale befolkningen å ha latent Mtb-infeksjon (LTBI), hvorav rundt 10 % vil utvikle aktiv tuberkulose i løpet av livet.5

Selv om bare 22 lav- eller mellominntektsland (LMIC) står for 80 % av den globale byrden, er tuberkulose fortsatt en viktig sykdom blant innvandrerbefolkninger i høyinntektsland. I Storbritannia (Storbritannia) har reduksjoner i TB-forekomst oppnådd på 1900-tallet snudd med en økning på 50 % i TB-varsler mellom 1998 og 2009.6 I 2013 ble det rapportert totalt 7 892 TB-tilfeller tilsvarende en forekomst på 12,3 per 100 000 innbyggere per år, den høyeste blant høyinntektsland.7 En høy andel (37,8 %) av TB-tilfellene i Storbritannia finnes i London, hvor TB-forekomsten er 35,5 per 100 000 innbyggere per år; innvandrere fra India (30 %), Pakistan (20 %) og Somalia (5 %) sto for flertallet av disse tilfellene.7

For tiden er nøkkelstrategiene i TB-kontroll nøyaktig og rask diagnostisering av aktiv sykdom sammen med effektiv behandling for å avbryte overføringen. Imidlertid er forsinket diagnose en stor utfordring som letter overføring i lokalsamfunn.8 Vanligvis tar det flere måneder fra symptomdebut til en TB-pasient starter behandling. For eksempel, i Storbritannia starter nesten en tredjedel av lunge-TB-pasienter behandling 4 måneder etter symptomdebut.7 Slike lange forsinkelser, kombinert med det store utvalget av LTBI, antyder behovet for intervensjoner for å identifisere og behandle individer med LTBI for å oppnå TB-kontroll. Antimikrobiell behandling av LTBI (kjemoprofylakse) er effektiv for å redusere risikoen for reaktivering og implementeres rutinemessig i høyinntekter og lav forekomst. Implementering av denne politikken, spesielt i miljøer med høy belastning, hemmes imidlertid av mangelen på en diagnostisk test for å identifisere undergruppen av Mtb-sensibiliserte individer som står i fare for å utvikle aktiv tuberkulose, som kjemoprofylakse bør rettes mot.

Foreløpig stilles diagnosen LTBI ved å oppdage en adaptiv immunrespons på Mtb-infeksjon, enten in vivo (ved hjelp av tuberkulin-hudtesten) eller ex vivo (ved å bruke Interferon-Gamma Release Assays [IGRAs]). Denne tilnærmingen, som ikke oppdager Mtb direkte, er begrenset ved at den ikke kan skille de 10 % av sensibiliserte individer som er i fare for reaktivering (hvor kjemoprofylakse kan være fordelaktig) fra de 90 % som er immunologisk sensibiliserte, men som ikke gjør det. fremgang til aktiv sykdom (hvor kjemoprofylakse ikke gir noen fordel). Denne sistnevnte gruppen er potensielt heterogen: noen kan ha eliminert infeksjonen, mens andre kan ha LTBI, men være i stand til å inneholde den på ubestemt tid.9 Verktøy for å dissekere ut disse mulige fenotypene kan tillate mer presis målretting av kjemoprofylakse, men de mangler for tiden. I denne studien vil etterforskerne undersøke om Mtb kan påvises i CD34+ celler isolert fra perifert blod fra a) voksne som screenes for LTBI (LTBI screenees), og b) voksne med nydiagnostisert aktiv TB (aktive tilfeller).

4.2. Begrunnelse for studien

Denne studien bygger på en nylig observasjon av en av medetterforskerne (Stephen Reece) som var en del av en gruppe ved Max Planck Institute for Infection Biology, Berlin, som har oppdaget Mtb DNA i CD34+ langsiktig repopulerende pluripotente hematopoietiske stamceller (LTpHSCs) isolert fra 100 ml perifert blod fra syv friske voksne med LTBI (positiv IGRA, aktiv TB ekskludert); Mtb-DNA ble ikke påvist i LTpHSC-er fra syv IGRA-negative friske voksne. 10 Hvis dette bemerkelsesverdige funnet kan replikeres i en annen setting, kan det føre til utvikling av en ny mikrobiologisk test ('CD34+ PCR-analysen') med flere potensielle bruksområder:

a) å identifisere individer som er latent infisert med antibiotika-resistente Mtb (som tillater valg av et passende kjemoprofylakse-regime), b) å overvåke effekten av kjemoprofylakse og intervensjoner designet for å forhindre tilegnelse av LTBI, slik som vaksiner og programmer for mikronæringstilskudd, c. ) å spore spredning av bestemte stammer gjennom en befolkning (tilveiebringe et verktøy for folkehelseintervensjon), d) å diskriminere mellom Mtb-sensibiliserte individer som er i fare for progresjon til aktiv sykdom kontra de som ikke er det, slik at kjemoprofylakse kan målrettes mot populasjoner som kan ha nytte av det, og e) for å gi ny innsikt i immunbiologien til LTBI og patogenesen av menneskelig tuberkulose.

4.3. Hypoteser

i) Mtb DNA kan påvises i CD34+ PBMC hos asymptomatiske IGRA-positive voksne og aktive tilfeller av TB ved diagnose, men ikke hos IGRA-negative voksne.

ii) Mtb-stammer isolert fra CD34+ PBMC av asymptomatiske IGRA-positive TB-kontakter vil være genetisk identiske med de som er isolert fra sputum fra indekstilfeller av lunge-TB som de nylig har blitt eksponert for.

iii) Evne til å oppdage Mtb-DNA i CD34+ PBMC fra LTBI-screenees assosierer med IGRA-resultater samt anerkjente kliniske og epidemiologiske risikofaktorer for LTBI iv) Evne til å oppdage Mtb-DNA i CD34+ PBMC fra IGRA-positive LTBI-screenees assosierer med perifere blodtranskripsjoner tidligere definert til å være assosiert med progresjon til aktiv TB v) Antimikrobiell terapi er effektiv for å eliminere Mtb fra CD34+ PBMC isolert fra individer med LTBI eller aktiv TB hos hvem det var påviselig ved baseline; og at resultatene av CD34+ PCR-analysen er reproduserbare ved repetisjon hos LTBI-screene som ikke har mottatt kjemoprofylakse

5. Mål

5.1. Primært mål

For å bestemme om M. tuberculosis (Mtb) DNA kan påvises i CD34+ perifert blod mononukleære celler (PBMC) isolert fra

• asymptomatiske voksne som gjennomgår rutinemessig screening for LTBI (LTBI-screenees)
• voksne med nylig diagnostisert aktiv tuberkulose (aktive tilfeller)

5.2. Sekundære mål

• For å bestemme om stammer av Mtb isolert fra CD34+ PBMC av TB-kontakter er genetisk identiske med de som er isolert fra sputum fra indekstilfeller med lunge-TB som de har blitt eksponert for
• Å karakterisere immunologiske, kliniske og epidemiologiske korrelater av evne til å oppdage Mtb i CD34+ PBMC i en heterogen populasjon av IGRA-positive og -negative LTBI-screenees.
• For å bestemme om tilstedeværelse av Mtb DNA i CD34+ PBMC av IGRA-positive screenees assosieres med tilstedeværelsen av en transkripsjonssignatur fra perifert blod som nylig ble rapportert for å forutsi risiko for progresjon til aktiv TB11
• For å vurdere longitudinell endring i CD34+ PCR-analyse resulterer i
• LTBI screenees som fullfører kjemoprofylakse for LTBI
• LTBI screenees som ikke får kjemoprofylakse
• pasienter som fullfører behandling for aktiv tuberkulose

Studiedesign og studiebesøk

Etterforskerne vil gjennomføre en longitudinell studie. To grupper av deltakere vil bli rekruttert: voksne som screenes for LTBI (LTBI screenees), og pasienter som skal starte behandling for aktiv TB (aktive tilfeller). LTBI-screenees er de som blir screenet for LTBI som en del av standardbehandling: de inkluderer nylige kontakter av et smittsom indeks TB-tilfelle, nye deltakere fra land med høy TB-byrde, helsearbeidere som gjennomgår arbeidshelsescreening og pasienter som er i ferd med å gjennomgå immunsuppressiv terapi . Pasienter med aktiv tuberkulose er de som har blitt diagnostisert med aktiv tuberkulose som er i ferd med å begynne å ta anti-TB-behandling.

Ved baseline (besøk 1) vil deltakere som oppfyller inklusjonskriterier og gir skriftlig informert samtykke til å delta i studien bli bedt om å gi sosiodemografisk informasjon inkludert detaljer om alder, kjønn og etnisk opprinnelse samt detaljer om TB-eksponeringshistorie (inkludert spesifikk eksponering til deltakere med aktiv tuberkulose som er registrert i studien) og andre klinisk relevante data, som alle vil bli registrert på et Case Report Form (CRF). En HIV-serologisk test vil bli utført hvis dette ikke allerede gjøres som en del av rutinemessig behandling. En blodprøve på 120 ml (117 ml hvis HIV-test allerede er utført som en del av rutinemessig behandling) vil bli samlet inn for IGRA (QFT-Plus), blodkultur for Mtb, risikosignaturanalyse for perifert blodtranskriptom og CD34+ PCR-analyse for Mtb DNA ved baseline. IGRA-positive deltakere hvor aktiv tuberkulose har blitt ekskludert ved bruk av klinisk evaluering og røntgen av thorax (en del av standardbehandling) vil bli tilbudt en 3-måneders kurs med rifampicin og isoniazid kjemoprofylakse dersom de oppfyller kriteriene for denne behandlingen (også en del av standarden). omsorg).12

Kommunikasjon av positive HIV-testresultater vil bli håndtert i henhold til anbefalingene fra UK National Guidelines for HIV Testing 2008. Positive HIV-testresultater vil bli kommunisert i et ansikt-til-ansikt intervju med en studielege, i nærvær av en sykepleier fra Barts Health NHS Trust Genito-Urinary Medicine (GUM) klinikk (den lokale HIV-tjenesten). Deltakere som tester HIV-positive vil bli henvist til nærmeste GUM-klinikk for bekreftelse av resultatene og videre behandling etter behov.

Ved 3 måneder (besøk 2) vil detaljer om forskrivning av og overholdelse av kjemoprofylakse bli registrert, og en andre blodprøve (117 ml) vil bli tatt for gjentatt IGRA (QFT-Plus), blodkultur og CD34+ PCR-analyse. For deltakere som tok kjemoprofylakse, vil et Tempusrør også bli tatt ved besøk 2.

Ved baseline (besøk 1) vil deltakere som oppfyller inklusjonskriterier og gir skriftlig informert samtykke til å delta i studien bli bedt om å gi grunnleggende sosiodemografisk informasjon inkludert detaljer om alder, kjønn og etnisk opprinnelse samt varighet av symptomene deres, kontakt med evt. registrerte LTBI-screenee og andre klinisk relevante data, som alle vil bli registrert på en CRF. HIV-serologi, fullblodtelling og sputumsmear-mikroskopi og cutlure for M.tuberculosis utføres som en del av rutinemessig behandling i denne pasientgruppen. En 114 ml blodprøve vil bli samlet inn for IGRA (QFT-Plus), blodkultur for Mtb og CD34+ PCR-analysen for Mtb DNA ved baseline. TB-pasienter vil bli behandlet for aktiv sykdom i henhold til britiske retningslinjer. 12

Etter fullført kjemoterapi (besøk 2, vanligvis etter 6 måneder), vil detaljer om forskrivning av og etterlevelse av anti-TB-behandling bli registrert, og en ny blodprøve (114 ml) vil bli samlet inn for IGRA (QFT-Plus), blodkultur for Mtb og CD34+ PCR-analysen.

Studieprosedyrer

Prosedyrer for invitasjon og informert samtykke

Invitasjon

I London utføres screening for LTBI ved hjelp av en IGRA vanligvis i fire grupper: nylige kontakter med aktive TB-pasienter; nye deltakere fra land med høy tuberkulose; pasienter som er i ferd med å starte immunsuppressive terapier; og helsearbeidere som gjennomgår bedriftshelsescreening. Grupper med risiko for LTBI kan i utgangspunktet identifiseres i ulike miljøer (TB-klinikk, primærhelsetjenesten, revmatologiske klinikker, bedriftshelsetjenester), men de henvises alle enten til en TB-klinikk (kontakter, nye deltakere, pasienter som skal starte immunsuppressiv behandling ) eller til Occupational Health Clinic (helsearbeidere som gjennomgår bedriftshelsescreening) for LTBI-screening som skal utføres. Potensielt kvalifiserte LTBI-screenees vil derfor bli identifisert og rekruttert til studien ved TB-klinikker eller Arbeidshelseklinikken. Pasienter med aktiv TB vil bli identifisert og rekruttert ved Barts Health NHS Trust TB Clinics.

Potensielt kvalifiserte personer vil bli informert om studien av sykepleiere eller leger som jobber i TB-klinikker eller bedriftshelseklinikker, som utfører TB-screening som en del av vanlig klinisk behandling. De som viser interesse for studien vil få et deltakerinformasjonsark av et medlem av det kliniske omsorgsteamet. Dette vil forklare målene, metodene, forventede fordeler og potensielle farer ved studien, og vil bli presentert på ikke-teknisk språk enten på engelsk eller andre språk der det er nødvendig. De som tar et deltakerinformasjonsark vil bli bedt om å fylle ut en "kontaktseddel" som gir kontaktinformasjonen deres og autoriserer forskerteamet til å ta kontakt med dem når de har hatt mulighet til å lese informasjonen; denne 'kontaktseddelen' vil bli videresendt til forskerteamet av deltakerens vanlige omsorgsteam.

Prosedyrer for informert samtykke

Informert samtykke vil bli utført i henhold til JRMO standard driftsprosedyrer. Informert samtykke vil bli tatt i enerom av personell som har fått spesifikk opplæring i god klinisk praksis og innhenting av informert samtykke, som kan være leger, sykepleiere eller forskningsassistenter. Under samtykkeprosessen vil deltakerne bli informert om at deltakelse er frivillig og at de kan nekte å delta i studien eller trekke seg når som helst under oppfølgingen, uansett årsak.

Deltakerne vil bli bedt om å gi samtykke til å delta ved å signere og skrive ut navnet sitt. Et upartisk vitne vil bli pålagt å kontrasignere samtykke for de som trenger tolk under samtykkeprosessen. Deltakerne vil få økonomisk kompensasjon for reiseutgifter knyttet til hvert besøk.

Påmelding og oppfølgingsprosedyrer

Rekruttering ved baseline

Potensielle deltakere vil bli vurdert for kvalifisering basert på inkluderings- og eksklusjonskriteriene som er angitt ovenfor. Etter samtykkeprosessen og etter at en deltaker gir skriftlig informert samtykke til å delta, vil et unikt ID-nummer bli tildelt. Vurdering av kvalifikasjon til å delta vil bli utført av passende utdannet personell som kan være leger, sykepleiere eller forskningsassistenter.

Datainnsamlingsprosedyre

Ved å bruke en CRF, ved besøk 1 (V1), vil alle deltakere bli bedt om å gi sosiodemografisk informasjon og medisinsk historie inkludert medisinhistorie. LTBI screenees vil bli bedt om å oppgi detaljer om nylig og tidligere eksponering for TB-pasienter, historie med TB og andre potensielle determinanter for LTBI, slik som fysisk nærhet til aktive TB-pasienter, gjennomsnittlig daglig eksponeringsvarighet samt total varighet av eksponering for indekstilfeller . CRF-er vil også inkludere følgende data: sjekkliste over kvalifikasjonskriterier, resultater av kliniske undersøkelser og laboratorietester, og informasjon samlet inn under oppfølging, inkludert tilbaketrekningsdetaljer, hvis aktuelt. Medlemmene av prosjektgruppen som er ansvarlige for å fullføre CRF-er, som kan være stipendiater eller feltarbeidere, vil bli oppført i en delegasjonslogg.

Baseline prøveinnsamling og laboratorievurderinger

Prøver vil bli samlet inn som beskrevet i figur 1 og tabell 1 og 2, og laboratorieanalyser vil bli utført som beskrevet i tabell 3 og 4. Der tester utføres som en del av rutinemessig omsorg (f.eks. full blodtelling for pasienter med aktiv tuberkulose, HIV-serologi for pasienter med aktiv tuberkulose og IGRA-positive LTBI screenees), resultatene vil bli tilgjengelig via CRS og dokumentert på CRF. IGRA-negative LTBI screenees og ueksponerte deltakere vil bli tilbudt en HIV-test ved besøk 1.

For å undersøke om Mtb-stammer isolert fra CD34+ PBMC av TB-kontakter samsvarer med de som er isolert fra sputum fra indekstilfeller som de har blitt eksponert for, vil sputumprøver samles inn fra 10 indeksaktive TB-pasienter som har CD34+ PCR-positive kontakter registrert i studien, og helgenomsekvenseringsanalyse vil bli utført på isolater dyrket fra disse prøvene. Basert på denne analysen, vil primere for å lage Mtb-amplikonbiblioteker bli designet ved bruk av bioinformatiske tilnærminger for å fange opp stammemangfold. Disse primerne vil deretter bli brukt til å generere Mtb-amplikonbiblioteker fra CD34+-celler som inneholder Mtb-genomisk DNA isolert fra TB-kontakter. Disse bibliotekene vil deretter bli sekvensert og sammenlignet med Mtb-genomet til indekstilfellet for å bestemme om stammer isolert fra indekstilfeller og kontakter samsvarer.

Deltakere med positive HIV-tester / IGRA-er vil bli henvist til henholdsvis HIV / TB-klinikker for videre vurdering. Der HIV-tester og IGRA-er har blitt utført for forskningsformål (dvs. der de ikke er en del av rutinemessig omsorg), vil forskningspersonell kommunisere disse resultatene til deltakerne når de blir tilgjengelige.

Oppfølgingsprosedyrer

• LTBI-screenees: Besøk og oppfølgingsvurderinger er beskrevet i figur 1, tabell 1 og tabell 3. Deltakerne vil delta på besøk 2 etter 3 måneder (besøk 2, V2). Deltakere som har fullført kjemoprofylakse vil ha en rutinemessig klinisk evaluering etter fullført behandling. De som ikke tar kjemoprofylakse vil også bli fulgt opp 3 måneder etter V1. I tillegg til å fullføre en CRF som beskriver symptomer på aktiv tuberkulose (alle deltakere) og overholdelse av kjemoprofylakse (de som mottar kjemoprofylakse), vil en 117 ml blodprøve bli samlet inn for immunologisk og molekylær analyse som beskrevet i avsnitt 13.3 nedenfor. Ved fullføring av det andre besøket vil deltakelsen i studien avsluttes.
• Pasienter med aktiv TB: Besøk og oppfølging er beskrevet i figur 1, tabell 2 og tabell 4. Deltakere som tar anti-TB-behandling vil ha en rutinemessig klinisk evaluering etter fullført behandling, og en andre 114 ml blodprøve vil bli tatt i løpet av dette besøket for immunologisk og molekylær analyse som beskrevet i avsnitt 13.3 nedenfor. Etter å ha fullført det andre besøket, avsluttes deltakelsen i studien.

Resultatene fra CD34+ PCR-testen vil ikke bli brukt til å veilede klinisk ledelse, da denne testen er et forskningsverktøy i de tidlige fasene av utviklingen, og resultatene har ikke blitt korrelert med noe klinisk utfall.

Deltakeruttak

Deltakere vil bli trukket tilbake dersom de trekker tilbake samtykket til å delta eller hvis det konkluderes med at uttak er i deltakerens beste. Deltakere vil også anses å ha trukket seg dersom de ikke møter til sitt andre planlagte studiebesøk til tross for skriftlige og telefoniske påminnelser. Hvis en deltaker trekker seg fra studien, vil årsaken til tilbaketrekkingen bli registrert i CRF.

Data samlet inn frem til tilbaketrekningstidspunktet vil bli inkludert i studieanalyser, med mindre annet er bedt om av en deltaker. Eventuelle kliniske prøver tatt før en deltaker trekker seg vil bli brukt til studieanalyser.

Definisjon av studieslutt

Studien vil avsluttes når alle kliniske og laboratorievurderinger er fullført for alle deltakere som deltar på oppfølging.

9. Statistiske betraktninger

9.1 Prøvestørrelse

Hovedmålet med denne studien er å validere og utvide funn fra en annen setting der genomisk DNA av Mtb ble påvist i CD34+-celler isolert fra det perifere blodet til syv IGRA-positive asymptomatiske voksne.10 For å nå dette målet vil totalt 100 LTBI-screenees rekrutteres til tverrsnittsstudien (20 deltakere per uavhengig variabel som skal testes i regresjonsanalysen). Det forventes at omtrent femti av disse deltakerne vil være IGRA-positive, hvorav omtrent førti vil bli foreskrevet kjemoprofylakse: oppfølging av 25 av disse deltakerne vil gi >80 % kraft ved 5 % signifikansnivå for å demonstrere en reduksjon i andel CD34+ PCR-positive individer fra 80 % ved baseline til 30 % ved oppfølging.

10. Etiske hensyn

Før studiestart vil det bli søkt om godkjenning fra NHS REC for studieprotokollen, skjemaer for informert samtykke og andre relevante dokumenter. Studien vil ikke starte før nødvendige godkjenninger er innhentet fra etikkkomiteen og et "grønt lys" gis for å aktivere nettsteder av sponsor. CI vil sikre at denne studien utføres i samsvar med Helsinki-erklæringen (2013) og de etiske prinsippene i Research Governance Framework for Health and Social Care, Second Edition, 2005 og dens påfølgende endringer. Avgjørelser om en endring utgjør en mindre eller vesentlig endring vil ligge hos sponsor. Vesentlige endringer som krever gjennomgang av REC vil ikke bli implementert før de er godkjent av det relevante organet. All korrespondanse med sponsoren og REC vil bli oppbevart i studiens masterfil. CI vil varsle REC og sponsoren ved slutten av studien.

Skriftlig informert samtykke vil bli innhentet fra deltakerne av en person med passende opplæring (som kan være en lege, en sykepleier eller en forskningsassistent) før deltakelse i denne studien. Informasjonsark vil bli gjort tilgjengelig på engelsk og andre språk der det er nødvendig. Potensielle deltakere vil bli gitt informasjonsarket og målene, metodene, forventede fordeler og potensielle farer med studien vil bli forklart. Under samtykkeprosessen vil deltakerne bli forklart at deltakelse er frivillig og de kan nekte å delta i studien eller trekke seg når som helst under oppfølgingen, uansett årsak.

Interessekonflikt

Ingen økonomiske eller andre konkurrerende interesser er identifisert for CI eller noen medetterforsker.

11. Sikkerhetshensyn

Siden studien er observasjonsbasert, er risikoen for studierelaterte uønskede hendelser ubetydelig. Imidlertid vil enhver uønsket hendelse som anses å være relatert til studien rapporteres til sponsor innen 24 timer. Blodvolumet som skal samles (opptil 120 ml) kan oppfattes som stort av noen deltakere, men voksne som donerer blod gir vanligvis 500 ml om gangen uten å lide av anemi. Etterforskerne forventer derfor ingen uønskede hendelser knyttet til uttak av dette blodvolumet. Informasjon om mengden blodprøve og om dette vil ha uønskede helsekonsekvenser vil bli forklart til deltakerne i informasjonsarket. Alle TB-pasienter vil bli screenet for anemi som en del av deres vanlige kliniske behandling, og de med hemoglobinnivå under 10 g/dl ved innreise vil bli ekskludert. I tillegg vil følgende tiltak bli tatt for å minimere potensielle ulemper, ubehag og risiko som deltakerne kan oppleve i løpet av denne studien:

- bruk av passende opplært personale for å utføre flebotomi

12. Datahåndtering og journalføring

12.1. Konfidensialitet

Beskyttet helseinformasjon (PHI) som er nødvendig for gjennomføringen og analysen av studien vil bli samlet inn for alle deltakere som screenes for studien; denne informasjonen vil inkludere hver deltakers navn, fødselsdato, kjønn, adresse, telefonnummer, journalnummer hvis aktuelt, e-postadresse hvis aktuelt, og etnisk opprinnelse. Studiepersonell som trenger tilgang til PHI for å gjennomføre eller analysere studien vil bli oppført i en delegasjonslogg. PHI vil forbli konfidensiell, og vil bli håndtert, behandlet, lagret og ødelagt i henhold til Data Protection Act 1998. Deltakerne vil beholde retten til å tilbakekalle autorisasjonen for bruk av PHI når som helst under studien. Alle deltakere vil bli anonymisert i publikasjoner som kommer fra denne studien. Data vil bli pseudo-anonymisert som følger. PHI vil bli holdt i en sikker database knyttet til en unik identifikasjonskode. Klinisk informasjon vil bli lagret i en egen sikker database, knyttet til den samme unike identifikasjonskoden. CI og co-etterforskerne vil ha tilgang til det pseudo-anonymiserte siste studiedatasettet.

I løpet av forskningen vil alle opptegnelser være CIs ansvar og vil bli oppbevart under sikre forhold. Når studien er ferdig, er det sponsors krav at journaler og data oppbevares i ytterligere 20 år. CI vil fungere som "Custodian" av forskningsdataene. Tilgang til PHI vil være begrenset til det minste antallet personer som er nødvendig for gjennomføring av studien, kvalitetskontroll, revisjon og analyse. Følgende vil omfatte kildedokumenter: screeninglogger, informert samtykke og papir-CRF. Alle kildedokumenter vil bli oppbevart trygt i låste arkivskap. Dataoverføring og transport vil bli utført i samsvar med UK Data Protection Act 1998. Personidentifiserbar informasjon vil ikke bli lagret, transportert eller sendt til eller fra noen bærbar enhet med mindre enheten er kryptert.

12.2. Datainnsamling, registrering og håndtering

Signerte samtykkeskjemaer og papirdokumenter som inneholder kildedata vil bli trygt lagret. Studiedata vil bli lagt inn i en database i EpiData Entry-programvaren. Personalet vil få passende opplæring for å bruke databasen for dataregistrering. Laboratoriedata vil bli lagt inn i databasen.

CI og co-etterforskerne vil ha tilgang til studiedata under studien. Studiepersonell som trenger slik tilgang for å gjennomføre studien, vil også gis slik tilgang som er nødvendig. Tilgang til studiedata under studiet vil også bli gitt til autoriserte representanter fra sponsoren, vertsinstitusjonen og regulatoriske myndigheter etter behov.

12.3. Kvalitetskontroll og kvalitetssikring

Studiedokumentasjon vil bli gjort tilgjengelig for representanter for sponsoren og REC for kvalitetskontroll og kvalitetssikring etter forespørsel.

13. Laboratorier

13.1. Prøveinnsamling, merking og behandling

Blodprøver vil bli samlet inn av studiepersonell, merket med deltaker-ID og datert. Tempus-rør vil bli ristet kraftig umiddelbart etter oppsamling i henhold til produsentens anbefalinger. Prøver for blodkultur og HIV-serologi vil bli fraktet til Sentrallaboratoriene for behandling. Gjenværende blodprøver vil bli transportert til The Blizard Institute, hvor dato og klokkeslett for prøvemottak samt prøvetilstanden (f. ikke-koagulert) vil bli registrert i en laboratorielogg. Prøver for QFT-Plus-testen vil bli inkubert ved 37 °C kort tid etter mottak av prøver i 18 timer, før sentrifugering og aspirasjon av supernatanter som vil bli lagret ved -80C i påvente av analyse for IFN-gammakonsentrasjon. Blodprøver i Tempus-rør vil bli lagret ved -80 °C i et merket stativ i påvente av transport til avdelingen for infeksjon og immunitet, University College London for RNA-ekstraksjon og genekspresjonsprofilering. PBMC vil bli separert fra den gjenværende prøven (100 ml), med påfølgende isolering av CD34+-celler ved hjelp av magnetisk perlesortering. Renheten til isolerte CD34+-celler vil bli kontrollert ved hjelp av flowcytometri.