Оценка нового микробиологического диагностического теста на латентную микобактериальную туберкулезную инфекцию (MICRO-LTBI)

Цели:

i) Определить, можно ли обнаружить ДНК M.tuberculosis (Mtb) в CD34+ мононуклеарных клетках периферической крови (РВМС), выделенных из

• бессимптомные взрослые, проходящие скрининг на ЛТИ (участники скрининга ЛТИ)
• взрослые с впервые выявленным активным туберкулезом (активные случаи) ii) Определить, являются ли штаммы Mtb, выделенные из CD34+ PBMC недавних домашних контактов с туберкулезом, генетически идентичны штаммам, выделенным из мокроты индексных больных легочным туберкулезом, от которых они контактировали iii ) Охарактеризовать иммунологические, клинические и эпидемиологические корреляты способности обнаруживать Mtb в CD34+ РВМС в гетерогенной популяции IGRA-положительных и -отрицательные результаты скрининга на ЛТИ.

iv) Определить, связано ли присутствие ДНК Mtb в CD34+ PBMC IGRA-положительных участников скрининга на ЛТИ с наличием транскрипционной сигнатуры периферической крови, о которой недавно сообщалось, для прогнозирования риска прогрессирования в активный туберкулез. v) Оценить продольные изменения в результатах CD34+ ПЦР-анализа в

- Лица, прошедшие скрининг на ЛТИ, завершающие химиопрофилактику ЛТИ.

• Лица, прошедшие скрининг на ЛТИ, не получающие химиопрофилактику
• Пациенты, завершающие лечение от активного туберкулеза

4.1. Фон

Туберкулез (ТБ) — инфекционное заболевание, вызываемое микроорганизмами комплекса M. Tuberculosis (MTBC). Первичным возбудителем у человека является M.tuberculosis (Mtb). Туберкулез обычно поражает легкие и передается при вдыхании инфекционных капель, отхаркивающихся больным активным легочным туберкулезом. Туберкулез был основной причиной заболеваемости и смертности на протяжении всей истории человечества. В Европе и Северной Америке за всплеском заболеваемости туберкулезом в 17 и 18 веках последовало быстрое снижение, в первую очередь связанное с улучшением социально-экономических условий, применением мер общественного здравоохранения и изоляцией больных туберкулезом.1 К концу 19 века после тенденции к снижению заболеваемости и смертности от туберкулеза в Европе и Северной Америке два важных события – открытие Mtb и рентгена – стали ключевыми в диагностике и лечении туберкулеза.1 Впоследствии вакцинация M. bovis бацилла Кальметта-Герена (БЦЖ) и лечение антибиотиками в первой половине 20-го века породили глобальный оптимизм в отношении того, что контроль и ликвидация туберкулеза вполне достижимы. Тем не менее, туберкулез по сей день остается серьезной угрозой общественному здравоохранению и является второй по значимости инфекционной причиной смерти в мире. 2, 3 Согласно отчету ВОЗ за 2015 год, в 2014 году во всем мире произошло около 9,6 миллиона новых случаев туберкулеза (12% из которых были связаны с коинфекцией ВИЧ) и 1,5 миллиона случаев смерти (из которых 0,4 миллиона были среди людей с коинфекцией ВИЧ).4 Кроме того, по оценкам, одна треть населения мира страдает латентной инфекцией Mtb (LTBI), из которых около 10% в течение жизни разовьют активный туберкулез5.

Хотя только на 22 страны с низким или средним уровнем дохода (LMIC) приходится 80% глобального бремени, туберкулез по-прежнему остается серьезным заболеванием среди иммигрантов в странах с высоким уровнем дохода. В Соединенном Королевстве (Великобритания) снижение заболеваемости туберкулезом, достигнутое в 20-м веке, обратилось вспять: количество случаев туберкулеза увеличилось на 50% в период с 1998 по 2009 год6. В 2013 году было зарегистрировано в общей сложности 7892 случая туберкулеза, что соответствует заболеваемости 12,3 на 100 000 населения в год, что является самым высоким показателем среди стран с высоким уровнем дохода7. Высокая доля (37,8%) случаев туберкулеза в Великобритании наблюдается в Лондоне, где уровень заболеваемости туберкулезом составляет 35,5 на 100 000 населения в год; Большинство этих случаев пришлось на иммигрантов из Индии (30%), Пакистана (20%) и Сомали (5%).7

В настоящее время ключевыми стратегиями борьбы с туберкулезом являются точная и быстрая диагностика активного заболевания вместе с эффективным лечением, позволяющим прервать передачу. Однако поздняя диагностика является серьезной проблемой, способствующей передаче вируса в сообществах8. Как правило, с момента появления симптомов до начала лечения больного туберкулезом проходит несколько месяцев. Например, в Великобритании почти треть больных туберкулезом легких начинают лечение через 4 месяца после появления симптомов7. Столь длительные задержки в сочетании с большим количеством случаев ЛТИ предполагают необходимость принятия мер по выявлению и лечению лиц с ЛТИ с целью достижения контроля над туберкулезом. Антимикробное лечение ЛТИ (химиопрофилактика) эффективно снижает риск реактивации и обычно проводится в странах с высоким уровнем дохода и низкой заболеваемостью. Однако реализация этой политики, особенно в условиях высокого бремени туберкулеза, затруднена из-за отсутствия диагностического теста для выявления подгруппы сенсибилизированных к Mtb лиц, которые подвержены риску развития активного туберкулеза, на которых должна быть нацелена химиопрофилактика.

В настоящее время диагноз ЛТИ ставится путем выявления адаптивного иммунного ответа на инфекцию Mtb либо in vivo (с использованием туберкулиновой кожной пробы), либо ex vivo (с использованием анализа высвобождения гамма-интерферона [IGRA]). Этот подход, который не выявляет Mtb напрямую, ограничен тем, что он не может отличить 10% сенсибилизированных людей, которые подвержены риску реактивации (у которых химиопрофилактика может быть полезна), от 90% иммунологически сенсибилизированных, но не имеющих прогрессирование до активной стадии заболевания (при котором химиопрофилактика не приносит пользы). Эта последняя группа потенциально неоднородна: некоторые, возможно, устранили инфекцию, в то время как у других может быть ЛТИ, но они могут сдерживать ее на неопределенный срок9. Инструменты для выявления этих возможных фенотипов могли бы позволить более точно нацелить химиопрофилактику, но в настоящее время они отсутствуют. В этом исследовании исследователи изучат, можно ли обнаружить Mtb в клетках CD34+, выделенных из периферической крови а) взрослых, проходящих скрининг на ЛТИ (участники скрининга ЛТИ), и б) взрослых с впервые диагностированным активным туберкулезом (активные случаи).

4.2. Обоснование исследования

Это исследование основано на недавнем наблюдении одного из соавторов (Стивена Риса), который входил в группу из Института биологии инфекций Макса Планка в Берлине, который обнаружил ДНК Mtb в CD34+ долговременно репопуляционных плюрипотентных гемопоэтических стволовых клетках. (LTpHSC), выделенные из 100 мл периферической крови семи здоровых взрослых с ЛТИ (положительный IGRA, исключен активный туберкулез); ДНК Mtb не была обнаружена в LTpHSC семи IGRA-негативных здоровых взрослых. 10 Если это замечательное открытие удастся повторить в других условиях, это может привести к разработке нового микробиологического теста («ПЦР-анализ CD34+») с несколькими потенциальными применениями:

а) выявлять лиц, латентно инфицированных устойчивыми к антибиотикам МТБ (что позволяет выбрать соответствующую схему химиопрофилактики), б) контролировать эффективность химиопрофилактики и мер, направленных на предотвращение заражения ЛТИ, таких как вакцины и программы добавок микроэлементов, в ) отслеживать распространение определенных штаммов среди населения (предоставляя инструмент для вмешательства в общественное здравоохранение), d) различать лиц, сенсибилизированных к Mtb, которые подвержены риску прогрессирования активное заболевание по сравнению с теми, у кого нет, что позволяет нацелить химиопрофилактику на группы населения, которым она может быть полезна, и д) обеспечить новое понимание иммунобиологии ЛТИ и патогенеза туберкулеза человека.

4.3. Гипотезы

i) ДНК Mtb может быть обнаружена в CD34+ PBMC у бессимптомных IGRA-положительных взрослых и активных случаев туберкулеза на момент постановки диагноза, но не у IGRA-отрицательных взрослых.

ii) Штаммы Mtb, выделенные из CD34+ PBMC бессимптомных IGRA-положительных туберкулезных контактов, будут генетически идентичны штаммам, выделенным из мокроты индексных случаев легочного туберкулеза, которым они недавно подверглись воздействию.

iii) Способность обнаруживать ДНК Mtb в CD34+ РВМС пациентов, прошедших скрининг ЛТИ, связана с результатами IGRA, а также признанными клиническими и эпидемиологическими факторами риска ЛТИ Ранее было установлено, что это связано с прогрессированием активного туберкулеза. v) Антимикробная терапия эффективна для элиминации Mtb из CD34+ PBMC, выделенные от лиц с ЛТИ или активным туберкулезом, у которых он был обнаружен на исходном уровне; и что результаты ПЦР-анализа CD34+ воспроизводятся при повторении у лиц, прошедших скрининг на ЛТИ, которые не получали химиопрофилактику.

5. Цели

5.1. Основная цель

Определить, можно ли обнаружить ДНК M.tuberculosis (Mtb) в CD34+ мононуклеарных клетках периферической крови (РВМС), выделенных из

• бессимптомные взрослые, проходящие плановый скрининг на ЛТИ (участники скрининга ЛТИ)
• взрослые с впервые выявленным активным туберкулезом (активные случаи)

5.2. Вторичные цели

• Определить, являются ли штаммы Mtb, выделенные из CD34+ РВМС контактировавших с туберкулезом, генетически идентичными штаммам, выделенным из мокроты показательных больных туберкулезом легких, от которых они контактировали.
• Охарактеризовать иммунологические, клинические и эпидемиологические корреляты способности обнаруживать Mtb в CD34+ РВМС в гетерогенной популяции IGRA-положительных и -негативных участников скрининга на ЛТИ.
• Определить, связано ли присутствие ДНК Mtb в CD34+ РВМС IGRA-положительных участников скрининга с наличием транскрипционной сигнатуры периферической крови, о которой недавно сообщалось, для прогнозирования риска прогрессирования в активный ТБ11.
• Для оценки продольных изменений результатов ПЦР-анализа CD34+ в
• Лица, прошедшие скрининг на ЛТИ, завершающие химиопрофилактику ЛТИ
• Лица, прошедшие скрининг на ЛТИ, не получающие химиопрофилактику
• пациенты, завершающие лечение от активного туберкулеза

План исследования и учебные визиты

Следователи проведут лонгитюдное исследование. Будут набраны две группы участников: взрослые, проходящие обследование на ЛТБИ (участники скрининга ЛТБИ), и пациенты, собирающиеся начать лечение от активного туберкулеза (активные случаи). Скрининг на ЛТИ – это те, кто проходит скрининг на ЛТИ в рамках стандартной медицинской помощи: к ним относятся недавние контакты с больным туберкулезом с инфекционным индексом, новые прибывшие из стран с высоким уровнем заболеваемости туберкулезом, медицинские работники, проходящие медицинский скрининг, и пациенты, которым предстоит пройти иммуносупрессивную терапию. . Пациенты с активным туберкулезом – это те, у кого диагностирован активный туберкулез и кто собирается начать принимать противотуберкулезную терапию.

На исходном уровне (посещение 1) участникам, которые соответствуют критериям включения и дали письменное информированное согласие на участие в исследовании, будет предложено предоставить социально-демографическую информацию, включая подробную информацию о возрасте, поле и этническом происхождении, а также подробную информацию об истории заражения туберкулезом (включая конкретные случаи заражения). участникам с активным туберкулезом, включенным в исследование) и другие клинически значимые данные, все из которых будут записаны в форме истории болезни (CRF). Будет проведен серологический тест на ВИЧ, если он еще не проводится в рамках обычного ухода. Образец крови объемом 120 мл (117 мл, если тест на ВИЧ уже проведен в рамках планового ухода) будет взят для IGRA (QFT-Plus), посева крови на Mtb, сигнатурного анализа транскриптома периферической крови и ПЦР-анализа CD34+ на ДНК Mtb. на исходном уровне. IGRA-положительным участникам, у которых активный туберкулез был исключен с помощью клинического обследования и рентгенографии грудной клетки (часть стандартного лечения), будет предложен 3-месячный курс химиопрофилактики рифампицином и изониазидом, если они соответствуют критериям для этой терапии (также часть стандартной терапии). уход).12

Сообщение о положительных результатах теста на ВИЧ будет осуществляться в соответствии с рекомендациями Национального руководства Великобритании по тестированию на ВИЧ 2008 года. Положительные результаты теста на ВИЧ будут сообщены в ходе личного собеседования с врачом-исследователем в присутствии медсестры из клиники Barts Health NHS Trust Genito-Urinary Medicine (GUM) (местная служба ВИЧ). Участники с положительным результатом теста на ВИЧ будут направлены в ближайшую клинику ГУМ для подтверждения результатов и дальнейшего лечения в случае необходимости.

Через 3 месяца (Визит 2) будут записаны подробности назначения химиопрофилактики и соблюдения режима химиопрофилактики, а также будет взят второй образец крови (117 мл) для повторного IGRA (QFT-Plus), посева крови и ПЦР-анализа CD34+. У участников, проходивших химиопрофилактику, во время визита 2 также будет взята трубка Tempus.

На исходном уровне (Визит 1) участникам, которые соответствуют критериям включения и дали письменное информированное согласие на участие в исследовании, будет предложено предоставить основную социально-демографическую информацию, включая сведения о возрасте, поле и этническом происхождении, а также продолжительность их симптомов, контакты с любыми зарегистрированный участник обследования на ЛТИ и другие клинически значимые данные, все из которых будут записаны в ИРК. Серология ВИЧ, общий анализ крови, микроскопия мазков мокроты и исследование на M.tuberculosis проводятся в рамках обычного ухода за этой группой пациентов. На исходном уровне будет взят образец крови объемом 114 мл для IGRA (QFT-Plus), культуры крови на Mtb и ПЦР-анализа CD34+ на ДНК Mtb. Пациенты с туберкулезом будут лечиться от активного заболевания в соответствии с рекомендациями Великобритании. 12

После завершения химиотерапии (второй визит, обычно через 6 месяцев) будут записаны подробности назначения противотуберкулезного лечения и соблюдения режима лечения, а также будет взят второй образец крови (114 мл) для IGRA (QFT-Plus), посева крови. для Mtb и ПЦР-анализа CD34+.

Процедуры исследования

Процедуры приглашения и информированного согласия

Приглашение

В Лондоне скрининг на ЛТИ с использованием IGRA обычно проводится в четырех группах: недавние контакты с больными активным туберкулезом; новые участники из стран с высоким уровнем заболеваемости туберкулезом; пациенты, которые собираются начать иммуносупрессивную терапию; и медицинские работники, проходящие проверку гигиены труда. Группы риска ЛТИ первоначально могут быть выявлены в различных учреждениях (туберкулезный диспансер, первичная медико-санитарная помощь, ревматологический диспансер, службы гигиены труда), но все они направляются либо в противотуберкулезный диспансер (контактные лица, новые поступившие, пациенты, собирающиеся начать иммуносупрессивную терапию). ) или в клинику гигиены труда (медицинские работники, проходящие медицинский осмотр) для проведения скрининга на ЛТИ. Таким образом, потенциально подходящие участники скрининга на ЛТБИ будут выявлены и привлечены для участия в исследовании в туберкулезных клиниках или клиниках гигиены труда. Пациенты с активным туберкулезом будут выявляться и набираться в противотуберкулезных клиниках Barts Health NHS Trust.

Потенциально подходящие лица будут проинформированы об исследовании медсестрами или врачами, работающими в туберкулезных клиниках или клиниках гигиены труда, которые проводят скрининг на туберкулез в рамках обычного клинического ухода. Тем, кто проявит интерес к исследованию, член группы клинической помощи предоставит информационный лист участника. В нем будут объяснены цели, методы, ожидаемые преимущества и потенциальные опасности исследования и будет представлено нетехническим языком либо на английском, либо на других языках, где это необходимо. Тем, кто берет информационный лист участника, будет предложено заполнить «Контактный лист», указав свои контактные данные и разрешив исследовательской группе связаться с ними, как только у них будет возможность прочитать информацию; этот «Контактный лист» будет отправлен исследовательской группе командой обычного ухода за участником.

Процедуры информированного согласия

Информированное согласие будет осуществляться в соответствии со стандартными операционными процедурами JRMO. Информированное согласие будет получено в отдельной палате персоналом, прошедшим специальную подготовку в области надлежащей клинической практики и получения информированного согласия, которым могут быть врачи, медсестры или научные сотрудники. В ходе процесса получения согласия участникам будет сообщено, что участие является добровольным и что они могут отказаться от участия в исследовании или выйти из него в любое время во время наблюдения по любой причине.

Участникам будет предложено выразить свое согласие на участие, подписав и распечатав свое имя. Беспристрастный свидетель должен будет подписать согласие для тех, кому требуется переводчик во время процесса получения согласия. Участникам будут финансово компенсированы транспортные расходы, связанные с каждым посещением.

Процедура регистрации и последующего наблюдения

Набор персонала на исходном уровне

Потенциальные участники будут оцениваться на соответствие критериям включения и исключения, указанным выше. После получения согласия и после того, как участник даст письменное информированное согласие на участие, ему будет присвоен уникальный идентификационный номер. Оценка права на участие будет проводиться соответствующим образом подготовленным персоналом, которым могут быть врачи, медсестры или научные сотрудники.

Процедура сбора данных

При использовании CRF во время визита 1 (V1) всем участникам будет предложено предоставить социально-демографическую информацию и историю болезни, включая историю приема лекарств. Участникам скрининга ЛТИ будет предложено предоставить подробную информацию о недавнем и предыдущем контакте с больными туберкулезом, истории болезни и других потенциальных детерминантах ЛТИ, таких как физическая близость к активным больным туберкулезом, средняя дневная продолжительность контакта, а также общая продолжительность контакта с индексными случаями. . ИРК также будут включать следующие данные: контрольный список критериев приемлемости, результаты исходных клинических обследований и лабораторных тестов, а также информацию, собранную в ходе последующего наблюдения, включая сведения об отказе от участия, если применимо. Члены проектной группы, ответственные за заполнение ИРК, которые могут быть научными сотрудниками или полевыми работниками, будут указаны в журнале делегирования.

Сбор базовых проб и лабораторные оценки

Образцы будут собираться, как указано на Рисунке 1 и в Таблицах 1 и 2, а лабораторные анализы будут проводиться, как подробно описано в Таблицах 3 и 4. Если тесты проводятся в рамках обычного ухода (например, общий анализ крови для пациентов с активным туберкулезом, серологическое исследование на ВИЧ для пациентов с активным туберкулезом и IGRA-положительный скрининг на ЛТИ), результаты будут доступны через CRS и задокументированы в CRF. Участникам скрининга на ЛТИ с отрицательным результатом IGRA и участникам, не подвергавшимся воздействию, будет предложен тест на ВИЧ во время визита 1.

Чтобы выяснить, совпадают ли штаммы Mtb, выделенные из CD34+ PBMC контактов с туберкулезом, со штаммами, выделенными из мокроты индексных больных, с которыми они контактировали, образцы мокроты будут собраны у 10 индексно-активных пациентов с туберкулезом, у которых есть контакты с положительным результатом ПЦР-теста CD34+, включенные в исследование. и анализ полногеномного секвенирования будет проводиться на изолятах, выращенных из этих образцов. На основе этого анализа будут разработаны праймеры для создания библиотек ампликонов Mtb с использованием биоинформатических подходов для выявления разнообразия штаммов. Эти праймеры затем будут использоваться для создания библиотек ампликонов Mtb из клеток CD34+, несущих геномную ДНК Mtb, выделенную от контактов с туберкулезом. Затем эти библиотеки будут секвенированы и сравнены с геномом Mtb индексного случая, чтобы определить, совпадают ли штаммы, выделенные из индексного случая и контактов.

Участники с положительными тестами на ВИЧ/IGRA будут направлены в клиники по лечению ВИЧ/ТБ соответственно для дальнейшего обследования. Если тесты на ВИЧ и IGRA проводились в исследовательских целях (т.е. если они не являются частью обычного ухода), исследовательский персонал сообщит эти результаты участникам, когда они станут доступны.

Последующие процедуры

• Участники скрининга ЛТИ: визиты и последующие оценки подробно описаны на Рисунке 1, Таблице 1 и Таблице 3. Участники будут посещать визит 2 через 3 месяца (визит 2, V2). Участники, завершившие химиопрофилактику, после завершения лечения пройдут плановое клиническое обследование. Те, кто не принимает химиопрофилактику, также будут находиться под наблюдением через 3 месяца после V1. Помимо заполнения ИРК с подробным описанием симптомов активного туберкулеза (все участники) и соблюдения режима химиопрофилактики (тех, кто получает химиопрофилактику), будет собран образец крови объемом 117 мл для иммунологического и молекулярного анализа, как подробно описано в разделе 13.3 ниже. По завершении второго визита участие в исследовании будет прекращено.
• Пациенты с активным туберкулезом: посещения и последующее наблюдение подробно описаны на Рисунке 1, Таблице 2 и Таблице 4. Участники, проходящие противотуберкулезное лечение, пройдут плановое клиническое обследование после завершения лечения, и во время лечения будет взят второй образец крови объемом 114 мл. это посещение для иммунологического и молекулярного анализа, как подробно описано в разделе 13.3 ниже. По завершении второго визита участие в исследовании будет прекращено.

Результаты теста CD34+ ПЦР не будут использоваться для руководства клиническим ведением, поскольку этот тест является исследовательским инструментом на ранних стадиях разработки, и его результаты не коррелируют с каким-либо клиническим исходом.

Выход участника

Участники будут отозваны, если они отзовут свое согласие на участие или если будет установлено, что отказ отвечает интересам участника. Участники также будут считаться выбывшими из участия, если они не смогут присутствовать на своем втором запланированном учебном визите, несмотря на письменные и телефонные напоминания. Если участник выходит из исследования, причина выхода будет записана в CRF.

Данные, собранные до момента выхода из участия, будут включены в анализ исследования, если участник не запросит иное. Любые клинические образцы, взятые до выхода участника из участия, будут использоваться для анализа исследования.

Определение окончания исследования

Исследование завершится, когда все клинические и лабораторные оценки будут завершены для всех участников, проходящих последующее наблюдение.

9. Статистические соображения

9.1 Размер выборки

Основная цель этого исследования — подтвердить и расширить результаты другого исследования, в котором геномная ДНК Mtb была обнаружена в клетках CD34+, выделенных из периферической крови семи IGRA-положительных бессимптомных взрослых.10 Для достижения этой цели к перекрестному исследованию будут привлечены в общей сложности 100 участников скрининга ЛТИ (20 участников на каждую независимую переменную, которая будет проверена в регрессионном анализе). Ожидается, что примерно пятьдесят из этих участников будут IGRA-положительными, из которых примерно сороку будет назначена химиопрофилактика: последующее наблюдение за 25 из этих участников даст >80% мощности при уровне значимости 5%, чтобы продемонстрировать снижение доля CD34+ ПЦР-положительных лиц с 80% в начале исследования до 30% при последующем наблюдении.

10. Этические соображения

Перед началом исследования в РЭН Национальной службы здравоохранения будет запрошено одобрение протокола исследования, форм информированного согласия и других соответствующих документов. Исследование не начнется до тех пор, пока не будут получены необходимые разрешения от комитета по этике и не будет дан «зеленый свет» на активацию сайтов спонсором. CI обеспечит, чтобы это исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией (2013 г.) и этическими принципами, изложенными в «Системе управления исследованиями в области здравоохранения и социальной помощи», второе издание, 2005 г., и ее последующими поправками. Решение о том, является ли поправка незначительной или существенной, принимается спонсором. Существенные поправки, требующие рассмотрения РЭЦ, не будут реализованы до тех пор, пока они не будут одобрены соответствующим органом. Вся переписка со спонсором и REC будет храниться в мастер-файле исследования. CI уведомит РЭЦ и спонсора об окончании исследования.

Письменное информированное согласие будет получено от участников соответствующим образом подготовленным лицом (которым может быть врач, медсестра или научный сотрудник) до участия в этом исследовании. Информационные листы будут доступны на английском и других языках, где это необходимо. Потенциальным участникам будет предоставлен информационный листок, в котором будут объяснены цели, методы, ожидаемые преимущества и потенциальные опасности исследования. В ходе процесса получения согласия участникам разъяснят, что участие является добровольным, и они могут отказаться от участия в исследовании или выйти из него в любой момент во время наблюдения по любой причине.

Конфликт интересов

Никакие финансовые или другие конкурирующие интересы не были выявлены для CI или любого со-исследователя.

11. Соображения безопасности

Поскольку исследование является обсервационным, риск побочных эффектов, связанных с исследованием, незначителен. Однако о любых нежелательных явлениях, которые считаются связанными с исследованием, спонсору будет сообщено в течение 24 часов. Объем крови, который необходимо собрать (до 120 мл), может показаться некоторым участникам большим, но взрослые, сдающие кровь, обычно сдают 500 мл за раз, не страдая анемией. Таким образом, исследователи не ожидают каких-либо нежелательных явлений, связанных с взятием такого объема крови. Информация об объеме образца крови и о том, будет ли это иметь какие-либо нежелательные последствия для здоровья, будет разъяснена участникам в информационном листе. Все больные туберкулезом будут проверяться на анемию в рамках обычного клинического лечения, а те, у кого уровень гемоглобина ниже 10 г/дл при поступлении, будут исключены. Кроме того, будут приняты следующие меры для минимизации потенциальных неудобств, дискомфорта и риска, которые могут возникнуть у участников в ходе этого исследования:

- использование специально обученного персонала для выполнения кровопускания.

12. Обработка данных и ведение учета

12.1. Конфиденциальность

Защищенная медицинская информация (PHI), необходимая для проведения и анализа исследования, будет собрана для всех участников, прошедших проверку для участия в исследовании; эта информация будет включать имя каждого участника, дату рождения, пол, адрес, номер телефона, номер медицинской карты, если применимо, адрес электронной почты, если применимо, и этническое происхождение. Сотрудники, проводящие исследование, которым требуется доступ к закрытой медицинской информации для проведения или анализа исследования, будут указаны в журнале делегирования. PHI останется конфиденциальной и будет обрабатываться, храниться и уничтожаться в соответствии с Законом о защите данных 1998 года. Участники сохранят за собой право отозвать свое разрешение на использование их ЗМИ в любой момент во время исследования. Все участники будут анонимизированы в публикациях, связанных с этим исследованием. Данные будут псевдоанонимизированы следующим образом. PHI будет храниться в защищенной базе данных, связанной с уникальным идентификационным кодом. Клиническая информация будет храниться в отдельной защищенной базе данных, связанной с тем же уникальным идентификационным кодом. CI и со-исследователи будут иметь доступ к псевдоанонимизированному окончательному набору данных исследования.

В ходе исследования все записи будут находиться в ведении CI и будут храниться в безопасных условиях. После завершения исследования спонсор требует, чтобы записи и данные хранились в течение следующих 20 лет. CI будет выступать в качестве «хранителя» исследовательских данных. Доступ к ЗМИ будет ограничен минимальным количеством лиц, необходимым для проведения исследования, контроля качества, аудита и анализа. Следующие документы будут включать первичные документы: журналы скрининга, информированное согласие и бумажный ИРК. Все исходные документы будут надежно храниться в закрытых картотечных шкафах. Передача и транспортировка данных будут осуществляться в соответствии с Законом Великобритании о защите данных 1998 года. Информация, позволяющая идентифицировать личность, не будет храниться, транспортироваться или отправляться на любое портативное устройство или с него, если это устройство не зашифровано.

12.2. Сбор, запись и обработка данных

Подписанные формы согласия и бумажные документы, содержащие исходные данные, будут надежно храниться. Данные исследования будут введены в базу данных программного обеспечения EpiData Entry. Сотрудники пройдут соответствующее обучение использованию базы данных для ввода данных. Лабораторные данные будут внесены в базу данных.

CI и со-исследователи будут иметь доступ к данным исследования во время исследования. Исследовательскому персоналу, которому требуется такой доступ для проведения исследования, также будет предоставлен такой доступ, который необходим. Доступ к данным исследования во время исследования также будет предоставлен уполномоченным представителям спонсора, принимающего учреждения и регулирующих органов по мере необходимости.

12.3. Контроль качества и обеспечение качества

Документация исследования будет предоставлена ​​представителям Спонсора и РЭЦ для контроля качества и обеспечения качества по запросу.

13. Лаборатории

13.1. Сбор проб, маркировка и обработка

Образцы крови будут собираться исследовательским персоналом с указанием идентификатора участника и датой. Пробирки Tempus следует энергично встряхивать сразу после сбора в соответствии с рекомендациями производителя. Образцы для посева крови и серологии ВИЧ будут доставлены в центральные лаборатории для обработки. Оставшиеся образцы крови будут доставлены в Институт Близард, где будут указаны дата и время получения образца, а также состояние образца (например. без сгустков) будут зафиксированы в лабораторном журнале. Образцы для теста QFT-Plus будут инкубироваться при 37 °C вскоре после получения образцов в течение 18 часов, а затем центрифугироваться и аспирироваться надосадочные жидкости, которые будут храниться при -80 °C до проведения анализа на концентрацию IFN-гамма. Образцы крови в пробирках Tempus будут храниться при температуре -80 °C в маркированном штативе в ожидании транспортировки в Отдел инфекций и иммунитета Университетского колледжа Лондона для экстракции РНК и определения профиля экспрессии генов. РВМС будут отделены от оставшегося образца (100 мл) с последующим выделением клеток CD34+ с использованием сортировки магнитными шариками. Чистоту выделенных клеток CD34+ проверят методом проточной цитометрии.