Evaluering af en ny mikrobiologisk diagnostisk test for latent mycobacterium tuberculosis-infektion (MICRO-LTBI)

Mål:

i) For at bestemme om M. tuberculosis (Mtb) DNA kan påvises i CD34+ perifere mononukleære blodceller (PBMC) isoleret fra

• asymptomatiske voksne, der screenes for LTBI (LTBI-screenede)
• voksne med nyligt diagnosticeret aktiv tuberkulose (aktive tilfælde) ii) At bestemme, om stammer af Mtb isoleret fra CD34+ PBMC fra nylige husholdnings-TB-kontakter er genetisk identiske med dem, der er isoleret fra opspyt fra indekstilfælde med lunge-TB, som de er blevet udsat for iii ) At karakterisere immunologiske, kliniske og epidemiologiske korrelater af evnen til at påvise Mtb i CD34+ PBMC i en heterogen population af IGRA-positive og -negative LTBI-screenede.

iv) For at bestemme, om tilstedeværelsen af ​​Mtb-DNA i CD34+ PBMC af IGRA-positive LTBI-screenede associerer med tilstedeværelsen af ​​en perifer blodtransskriptionel signatur, der for nylig er rapporteret for at forudsige risikoen for progression til aktiv TB v) At vurdere longitudinelle ændringer i CD34+ PCR-analyseresultater i

- LTBI screenees, der afslutter kemoprofylakse for LTBI

• LTBI-screenede, der ikke modtager kemoprofylakse
• Patienter, der afslutter behandling for aktiv TB

4.1. Baggrund

Tuberkulose (TB) er en infektionssygdom forårsaget af organismer af M. tuberculosis-komplekset (MTBC). Det primære patogen hos mennesker er M.tuberculosis (Mtb). TB påvirker almindeligvis lungerne og overføres gennem inhalation af infektiøse dråber opspytet af en patient med aktiv lunge-TB. Tuberkulose har været en væsentlig årsag til sygelighed og dødelighed gennem menneskehedens historie. I Europa og Nordamerika blev en stigning i TB-tilfælde i det 17. og 18. århundrede efterfulgt af et hurtigt fald, primært tilskrevet forbedrede socioøkonomiske forhold, anvendelse af folkesundhedsforanstaltninger og isolering af TB-patienter.1 Mod slutningen af ​​det 19. århundrede, efter den nedadgående tendens af TB-tilfælde og dødsfald i Europa og Nordamerika, blev to store begivenheder, opdagelsen af ​​Mtb og røntgen, nøglen til diagnosen og behandling af TB.1 Efterfølgende førte vaccination med M. bovis bacille Calmette-Guérin (BCG) og antibiotikabehandling i første halvdel af det 20. århundrede til global optimisme om, at TB-kontrol og -eliminering var inden for rækkevidde. Imidlertid er TB stadig en alvorlig trussel mod folkesundheden den dag i dag, og det er den næstførende smitsomme dødsårsag globalt. 2, 3 Ifølge WHO-rapporten fra 2015 forekom anslået 9,6 millioner nye TB-tilfælde (hvoraf 12 % var HIV co-inficerede) og 1,5 millioner dødsfald (hvoraf 0,4 millioner var blandt HIV co-inficerede mennesker) globalt i 2014.4 Derudover skønnes en tredjedel af den globale befolkning at have latent Mtb-infektion (LTBI), hvoraf omkring 10 % vil udvikle aktiv TB i deres levetid.5

Selvom kun 22 lav- eller mellemindkomstlande (LMIC'er) tegner sig for 80 % af den globale byrde, er TB stadig en vigtig sygdom blandt indvandrerbefolkninger i højindkomstlande. I Det Forenede Kongerige (UK) er reduktionerne i TB-forekomsten, der er opnået i det 20. århundrede, vendt med en stigning på 50 % i TB-meddelelser mellem 1998 og 2009.6 I 2013 blev der rapporteret i alt 7.892 TB-tilfælde svarende til en forekomst på 12,3 pr. 100.000 indbyggere om året, den højeste blandt højindkomstlande.7 En høj andel (37,8%) af TB-tilfælde i Storbritannien findes i London, hvor TB-incidensen er 35,5 pr. 100.000 indbyggere om året; indvandrere fra Indien (30 %), Pakistan (20 %) og Somalia (5 %) tegnede sig for størstedelen af ​​disse tilfælde.7

I øjeblikket er nøglestrategierne i TB-kontrol nøjagtig og hurtig diagnosticering af aktiv sygdom sammen med effektiv behandling for at afbryde transmissionen. Men forsinket diagnose er en stor udfordring, der letter overførsel i lokalsamfund.8 Generelt tager det flere måneder fra symptomernes begyndelse, indtil en TB-patient starter behandlingen. For eksempel i Storbritannien starter næsten en tredjedel af lunge-TB-patienter behandlingen 4 måneder efter symptomernes begyndelse.7 Sådanne lange forsinkelser kombineret med den store pulje af LTBI tyder på behovet for interventioner til at identificere og behandle personer med LTBI for at opnå TB-kontrol. Antimikrobiel behandling af LTBI (kemoprofylakse) er effektiv til at reducere risikoen for reaktivering og implementeres rutinemæssigt i højindkomster med lav forekomst. Implementeringen af ​​denne politik, især i miljøer med høj belastning, er imidlertid hæmmet af manglen på en diagnostisk test til at identificere den undergruppe af Mtb-sensibiliserede individer, som er i risiko for at udvikle aktiv TB, som kemoprofylakse bør rettes mod.

I øjeblikket stilles diagnosen LTBI ved at detektere et adaptivt immunrespons på Mtb-infektion, enten in vivo (ved hjælp af tuberkulin-hudtesten) eller ex vivo (ved hjælp af Interferon-Gamma Release Assays [IGRAs]). Denne tilgang, som ikke detekterer Mtb direkte, er begrænset ved, at den ikke kan skelne de 10 % af sensibiliserede personer, der er i risiko for reaktivering (hvor kemoprofylakse kan være en fordel) fra de 90 %, der er immunologisk sensibiliserede, men som ikke gør det. fremgang til aktiv sygdom (hvor kemoprofylakse ikke giver nogen fordel). Denne sidstnævnte gruppe er potentielt heterogen: nogle kan have elimineret infektionen, mens andre kan have LTBI, men være i stand til at indeholde det på ubestemt tid.9 Værktøjer til at dissekere disse mulige fænotyper kunne tillade mere præcis målretning af kemoprofylakse, men de mangler i øjeblikket. I denne undersøgelse vil efterforskerne undersøge, om Mtb kan påvises i CD34+-celler isoleret fra perifert blod fra a) voksne, der screenes for LTBI (LTBI-screenede), og b) voksne med nydiagnosticeret aktiv TB (aktive tilfælde).

4.2. Begrundelse for undersøgelsen

Denne undersøgelse bygger på en nylig observation fra en af ​​medforskerne (Stephen Reece), som var en del af en gruppe ved Max Planck Institute for Infection Biology, Berlin, som har detekteret Mtb DNA i CD34+ langsigtede repopulerende pluripotente hæmatopoietiske stamceller (LTpHSC'er) isoleret fra 100 ml perifert blod fra syv raske voksne med LTBI (positivt IGRA, aktiv TB udelukket); Mtb-DNA blev ikke påvist i LTpHSC'er fra syv IGRA-negative raske voksne. 10 Hvis dette bemærkelsesværdige fund kan replikeres i en anden sammenhæng, kan det føre til udviklingen af ​​en ny mikrobiologisk test ('CD34+ PCR-analysen') med flere potentielle anvendelser:

a) at identificere individer, der er latent inficeret med antibiotika-resistente Mtb (hvilket gør det muligt at vælge et passende kemoprofylakse-regime), b) at overvåge effektiviteten af ​​kemoprofylakse og interventioner designet til at forhindre erhvervelse af LTBI, såsom vacciner og programmer for mikronæringsstoftilskud, c. ) at spore spredning af bestemte stammer gennem en befolkning (tilvejebringelse af et værktøj til folkesundhedsintervention), d) til skelne mellem Mtb-sensibiliserede individer, der er i risiko for progression til aktiv sygdom versus dem, der ikke er, hvilket gør det muligt at målrette kemoprofylakse mod befolkninger, der kan drage fordel af det, og e) at give ny indsigt i immunbiologien af ​​LTBI og patogenesen af menneskelig tuberkulose.

4.3. Hypoteser

i) Mtb DNA kan påvises i CD34+ PBMC hos asymptomatiske IGRA-positive voksne og aktive tilfælde af TB ved diagnose, men ikke hos IGRA-negative voksne.

ii) Mtb-stammer isoleret fra CD34+ PBMC af asymptomatiske IGRA-positive TB-kontakter vil være genetisk identiske med dem, der er isoleret fra sputum fra indekstilfælde af pulmonal TB, som de for nylig er blevet eksponeret for.

iii) Evne til at påvise Mtb-DNA i CD34+ PBMC fra LTBI-screenede associerede med IGRA-resultater samt anerkendte kliniske og epidemiologiske risikofaktorer for LTBI iv) Evne til at påvise Mtb-DNA i CD34+ PBMC fra IGRA-positive LTBI-screenede associerede med perifere blodtransskriptioner tidligere defineret til at være forbundet med progression til aktiv TB v) Antimikrobiel terapi er effektiv til at eliminere Mtb fra CD34+ PBMC isoleret fra individer med LTBI eller aktiv TB, hos hvem det var påviselig ved baseline; og at resultaterne af CD34+ PCR-analysen er reproducerbare ved gentagelse hos LTBI-screenede, som ikke har modtaget kemoprofylakse

5. Målsætninger

5.1. Primært mål

For at bestemme om M. tuberculosis (Mtb) DNA kan påvises i CD34+ mononukleære blodceller (PBMC) isoleret fra

• asymptomatiske voksne, der gennemgår rutinemæssig screening for LTBI (LTBI-screenede)
• voksne med nyligt diagnosticeret aktiv tuberkulose (aktive tilfælde)

5.2. Sekundære mål

• For at bestemme, om stammer af Mtb isoleret fra CD34+ PBMC af TB-kontakter er genetisk identiske med dem, der er isoleret fra sputum fra indekstilfælde med pulmonal TB, som de er blevet udsat for
• At karakterisere immunologiske, kliniske og epidemiologiske korrelater af evnen til at påvise Mtb i CD34+ PBMC i en heterogen population af IGRA-positive og -negative LTBI-screenede.
• For at bestemme, om tilstedeværelsen af ​​Mtb-DNA i CD34+ PBMC af IGRA-positive screenees associerer med tilstedeværelsen af ​​en perifer blodtransskriptionel signatur, der for nylig er rapporteret for at forudsige risikoen for progression til aktiv TB11
• For at vurdere longitudinelle ændring i CD34+ PCR-analyse resulterer i
• LTBI screenede, der afslutter kemoprofylakse for LTBI
• LTBI-screenede, der ikke modtager kemoprofylakse
• patienter, der afslutter behandling for aktiv TB

Studiedesign og Studiebesøg

Efterforskerne vil gennemføre en longitudinel undersøgelse. To grupper af deltagere vil blive rekrutteret: Voksne, der screenes for LTBI (LTBI-screenede), og patienter, der skal påbegynde behandling for aktiv TB (aktive tilfælde). LTBI-screenede er dem, der bliver screenet for LTBI som en del af standardbehandlingen: de omfatter nylige kontakter med et smitsomt indeks-TB-tilfælde, nye deltagere fra lande med høj TB-byrde, sundhedsarbejdere, der gennemgår arbejdsmiljøscreening og patienter, der er ved at gennemgå immunsuppressiv terapi. . Patienter med aktiv TB er dem, der er blevet diagnosticeret med aktiv TB, som er ved at begynde at tage anti-TB-terapi.

Ved baseline (besøg 1) vil deltagere, der opfylder inklusionskriterier og giver skriftligt informeret samtykke til at deltage i undersøgelsen, blive bedt om at give sociodemografiske oplysninger, herunder detaljer om alder, køn og etnisk oprindelse samt detaljer om TB-eksponeringshistorie (herunder specifik eksponering til deltagere med aktiv TB, der er tilmeldt undersøgelsen) og andre klinisk relevante data, som alle vil blive registreret på en Case Report Form (CRF). En HIV-serologisk test vil blive udført, hvis dette ikke allerede udføres som en del af rutinemæssig behandling. En 120 ml (117 ml, hvis HIV-test allerede er udført som en del af rutinepleje) blodprøve vil blive indsamlet til IGRA (QFT-Plus), blodkultur for Mtb, risikosignaturanalyse for perifert blod transkriptom og CD34+ PCR-analysen for Mtb DNA ved baseline. IGRA-positive deltagere, hvor aktiv TB er blevet udelukket ved hjælp af klinisk evaluering og røntgen af ​​thorax (en del af standardbehandlingen), vil blive tilbudt et 3-måneders forløb med rifampicin og isoniazid kemoprofylakse, hvis de opfylder kriterierne for denne behandling (også en del af standarden). omsorg).12

Kommunikation af positive HIV-testresultater vil blive håndteret i overensstemmelse med anbefalingerne fra UK National Guidelines for HIV Testing 2008. Positive HIV-testresultater vil blive kommunikeret i et ansigt-til-ansigt interview med en undersøgelseslæge i nærværelse af en sygeplejerske fra Barts Health NHS Trust Genito-Urinary Medicine (GUM) klinik (den lokale HIV-tjeneste). Deltagere, der tester hiv-positive, vil blive henvist til deres nærmeste GUM-klinik for bekræftelse af deres resultater og yderligere behandling efter behov.

Efter 3 måneder (besøg 2) vil detaljer om ordination af og overholdelse af kemoprofylakse blive registreret, og en anden blodprøve (117 ml) vil blive taget til gentagen IGRA (QFT-Plus), bloddyrkning og CD34+ PCR-assay. For deltagere, der tog kemoprofylakse, vil der også blive taget et Tempus-rør ved besøg 2.

Ved baseline (besøg 1) vil deltagere, der opfylder inklusionskriterier og giver skriftligt informeret samtykke til at deltage i undersøgelsen, blive bedt om at give grundlæggende sociodemografiske oplysninger, herunder detaljer om alder, køn og etnisk oprindelse samt varigheden af ​​deres symptomer, kontakt med evt. tilmeldt LTBI-screenee og andre klinisk relevante data, som alle vil blive registreret på en CRF. HIV-serologi, fuldblodtælling og sputumsmear-mikroskopi og cutlure for M.tuberculosis udføres som en del af rutinebehandlingen i denne patientgruppe. En 114 ml blodprøve vil blive indsamlet til IGRA (QFT-Plus), blodkultur for Mtb og CD34+ PCR-analysen for Mtb DNA ved baseline. TB-patienter vil blive behandlet for aktiv sygdom i henhold til britiske retningslinjer. 12

Efter afslutning af kemoterapi (besøg 2, normalt efter 6 måneder), vil detaljer om ordination af og overholdelse af anti-TB-behandling blive registreret, og en anden blodprøve (114 ml) vil blive indsamlet til IGRA (QFT-Plus), blodkultur for Mtb og CD34+ PCR-assayet.

Studieprocedurer

Procedurer for invitation og informeret samtykke

Invitation

I London udføres screening for LTBI ved hjælp af en IGRA almindeligvis i fire grupper: nylige kontakter med aktive TB-patienter; nytilkomne fra lande med høj TB-byrde; patienter, der er ved at starte immunsuppressive terapier; og sundhedsarbejdere, der gennemgår arbejdsmiljøscreening. Grupper med risiko for LTBI kan indledningsvis identificeres i forskellige sammenhænge (TB-klinik, primærpleje, reumatologiske klinikker, bedriftssundhedstjenester), men de henvises alle enten til en TB-klinik (kontakter, nye deltagere, patienter, der skal i gang med immunsuppressiv behandling ) eller til Occupational Health Clinic (sundhedsarbejdere, der gennemgår arbejdsmiljøscreening) for at udføre LTBI-screening. Potentielt kvalificerede LTBI-screenees vil derfor blive identificeret og rekrutteret til undersøgelsen på TB-klinikker eller Arbejdsmiljøklinikken. Patienter med aktiv TB vil blive identificeret og rekrutteret på Barts Health NHS Trust TB Clinics.

Potentielt kvalificerede personer vil blive informeret om undersøgelsen af ​​sygeplejersker eller læger, der arbejder på TB-klinikker eller en arbejdsmiljøklinik, som udfører TB-screening som en del af sædvanlig klinisk pleje. De, der udtrykker interesse for undersøgelsen, vil blive forsynet med et deltagerinformationsark af et medlem af det kliniske plejeteam. Dette vil forklare målene, metoderne, de forventede fordele og potentielle farer ved undersøgelsen og vil blive præsenteret på ikke-teknisk sprog enten på engelsk eller andre sprog, hvor det er nødvendigt. De, der tager et deltagerinformationsark, vil blive bedt om at udfylde en 'Kontaktseddel' med deres kontaktoplysninger og bemyndige forskerholdet til at tage kontakt med dem, når de har haft mulighed for at læse oplysningerne; denne 'Kontaktseddel' vil blive videresendt til forskerteamet af deltagerens sædvanlige plejeteam.

Procedurer for informeret samtykke

Informeret samtykke vil blive udført i overensstemmelse med JRMOs standarddriftsprocedurer. Informeret samtykke vil blive taget i et privat rum af personale, der har modtaget specifik træning i god klinisk praksis og afgivelse af informeret samtykke, som kan være læger, sygeplejersker eller forskningsassistenter. Under samtykkeprocessen vil deltagerne blive informeret om, at deltagelse er frivillig, og at de kan nægte at deltage i undersøgelsen eller trække sig tilbage til enhver tid under opfølgningen, uanset årsag.

Deltagerne vil blive bedt om at give deres samtykke til at deltage ved at underskrive og udskrive deres navn. Et upartisk vidne vil være forpligtet til at medunderskrive samtykke for dem, der har brug for en tolk under samtykkeprocessen. Deltagerne vil blive økonomisk kompenseret for rejseudgifter forbundet med hvert besøg.

Tilmelding og opfølgningsprocedurer

Rekruttering ved baseline

Potentielle deltagere vil blive vurderet for berettigelse baseret på inklusions- og eksklusionskriterierne angivet ovenfor. Efter samtykkeprocessen og efter at en deltager har givet skriftligt informeret samtykke til at deltage, vil et unikt ID-nummer blive tildelt. Vurdering af berettigelse til at deltage vil blive udført af passende uddannet personale, som kan være læger, sygeplejersker eller forskningsassistenter.

Dataindsamlingsprocedure

Ved hjælp af en CRF vil alle deltagere ved besøg 1 (V1) blive bedt om at give sociodemografiske oplysninger og sygehistorie, herunder medicinhistorie. LTBI-screenede vil blive bedt om at give detaljer om nylig og tidligere eksponering for TB-patienter, historie med TB og andre potentielle determinanter for LTBI, såsom fysisk nærhed til aktive TB-patienter, gennemsnitlig daglig eksponeringsvarighed samt total varighed af eksponering for indekstilfælde . CRF'er vil også omfatte følgende data: tjekliste over berettigelseskriterier, resultater af baseline kliniske undersøgelser og laboratorietests og oplysninger indsamlet under opfølgning, herunder tilbagetrækningsdetaljer, hvis det er relevant. Medlemmerne af projektteamet, der er ansvarlige for at gennemføre CRF'er, som kan være forskningsstipendiater eller feltarbejdere, vil blive opført i en delegationslog.

Baseline prøveindsamling og laboratorievurderinger

Prøver vil blive indsamlet som beskrevet i figur 1 og tabel 1 og 2, og laboratorieanalyser vil blive udført som beskrevet i tabel 3 og 4. Hvor test udføres som en del af rutinepleje (f. fuld blodtælling for patienter med aktiv TB, HIV-serologi for patienter med aktiv TB og IGRA-positive LTBI-screenede), vil resultaterne blive tilgået via CRS og dokumenteret på CRF. IGRA-negative LTBI-screenede og ueksponerede deltagere vil blive tilbudt en HIV-test ved besøg 1.

For at undersøge, om Mtb-stammer isoleret fra CD34+ PBMC af TB-kontakter matcher dem, der er isoleret fra sputum fra indekstilfælde, som de er blevet eksponeret for, vil der blive indsamlet sputumprøver fra 10 indeksaktive TB-patienter, som har CD34+ PCR-assay-positive kontakter, der er inkluderet i undersøgelsen, og helgenomsekventeringsanalyse vil blive udført på isolater dyrket fra disse prøver. Baseret på denne analyse vil primere til at skabe Mtb amplicon biblioteker blive designet ved hjælp af bioinformatiske tilgange til at fange stamme diversitet. Disse primere vil derefter blive brugt til at generere Mtb amplicon biblioteker fra CD34+ celler, der huser Mtb genomisk DNA isoleret fra TB kontakter. Disse biblioteker vil derefter blive sekventeret og sammenlignet med Mtb-genomet af indekstilfældet for at bestemme, om stammer isoleret fra indekstilfælde og kontakter matcher.

Deltagere med positive HIV-tests / IGRA'er vil blive henvist til henholdsvis HIV / TB-klinikker for yderligere vurdering. Hvor HIV-tests og IGRA'er er blevet udført til forskningsformål (dvs. hvor de ikke er en del af rutinemæssig behandling), vil forskningspersonalet formidle disse resultater til deltagerne, når de bliver tilgængelige.

Opfølgningsprocedurer

• LTBI screenees: Besøg og opfølgende vurderinger er beskrevet i figur 1, tabel 1 og tabel 3. Deltagerne vil deltage i besøg 2 efter 3 måneder (besøg 2, V2). Deltagere, der har afsluttet kemoprofylakse, vil få en rutinemæssig klinisk evaluering efter afslutning af deres behandling. De, der ikke tager kemoprofylakse, vil også blive fulgt op 3 måneder efter V1. Ud over at udfylde en CRF, der beskriver symptomer på aktiv TB (alle deltagere) og overholdelse af kemoprofylakse (dem, der modtager kemoprofylakse), vil en 117 ml blodprøve blive indsamlet til immunologisk og molekylær analyse som beskrevet i afsnit 13.3 nedenfor. Efter afslutningen af ​​det andet besøg ophører deltagelse i undersøgelsen.
• Patienter med aktiv TB: Besøg og opfølgning er beskrevet i figur 1, tabel 2 og tabel 4. Deltagere, der tager anti-TB-behandling, vil få en rutinemæssig klinisk evaluering efter afslutningen af ​​deres behandling, og en anden 114 ml blodprøve vil blive indsamlet i løbet af dette besøg til immunologisk og molekylær analyse som beskrevet i afsnit 13.3 nedenfor. Efter at have afsluttet det andet besøg, afsluttes deltagelse i undersøgelsen.

Resultaterne af CD34+ PCR-testen vil ikke blive brugt til at vejlede klinisk ledelse, da denne test er et forskningsværktøj i de tidlige faser af udviklingen, og dens resultater er ikke blevet korreleret med noget klinisk resultat.

Deltagerudmeldelse

Deltagere vil blive trukket tilbage, hvis de trækker deres samtykke til at deltage, eller hvis det konkluderes, at tilbagetrækning er i deltagerens bedste interesse. Deltagerne vil også blive anset for at have trukket sig, hvis de trods skriftlige og telefoniske påmindelser udebliver fra deres andet planlagte studiebesøg. Hvis en deltager trækker sig fra undersøgelsen, vil årsagen til tilbagetrækningen blive registreret i CRF.

Data indsamlet frem til tilbagetrækningstidspunktet vil blive inkluderet i undersøgelsesanalyser, medmindre andet anmodes af en deltager. Alle kliniske prøver taget før en deltagers tilbagetrækning vil blive brugt til undersøgelsesanalyser.

Definition af studieslut

Undersøgelsen afsluttes, når alle kliniske og laboratorievurderinger er færdige for alle deltagere, der deltager i opfølgningen.

9. Statistiske betragtninger

9.1 Prøvestørrelse

Hovedformålet med denne undersøgelse er at validere og udvide resultater fra et andet miljø, hvor genomisk DNA fra Mtb blev påvist i CD34+-celler isoleret fra det perifere blod fra syv IGRA-positive asymptomatiske voksne.10 For at nå dette mål vil i alt 100 LTBI-screene blive rekrutteret til tværsnitsundersøgelsen (20 deltagere pr. uafhængig variabel, der skal testes i regressionsanalysen). Det forventes, at ca. halvtreds af disse deltagere vil være IGRA-positive, hvoraf ca. fyrre vil blive ordineret kemoprofylakse: opfølgning af 25 af disse deltagere vil give >80 % effekt ved 5 % signifikansniveau for at påvise en reduktion i andel af CD34+ PCR-positive individer fra 80 % ved baseline til 30 % ved opfølgning.

10. Etiske overvejelser

Inden undersøgelsens start vil der blive anmodet om godkendelse fra NHS REC for undersøgelsesprotokollen, informerede samtykkeformularer og andre relevante dokumenter. Undersøgelsen vil ikke påbegyndes, før de nødvendige godkendelser er opnået fra den etiske komité, og der gives 'grønt lys' for at aktivere websteder af sponsoren. CI vil sikre, at denne undersøgelse udføres i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen (2013) og de etiske principper i Research Governance Framework for Health and Social Care, anden udgave, 2005 og dets efterfølgende ændringer. Beslutninger om, hvorvidt en ændring udgør en mindre eller væsentlig ændring, ligger hos sponsor. Væsentlige ændringer, der kræver gennemgang af REC, vil ikke blive implementeret, før de er godkendt af det relevante organ. Al korrespondance med sponsoren og REC vil blive opbevaret i undersøgelsens masterfil. CI vil underrette REC og sponsoren ved afslutningen af ​​undersøgelsen.

Der vil blive indhentet skriftligt informeret samtykke fra deltagerne af en passende uddannet person (som kan være en læge, en sygeplejerske eller en forskningsassistent) før deltagelse i denne undersøgelse. Informationsark vil blive gjort tilgængelige på engelsk og andre sprog, hvor det er nødvendigt. Potentielle deltagere vil blive forsynet med informationsarket, og undersøgelsens mål, metoder, forventede fordele og potentielle farer vil blive forklaret. Under samtykkeprocessen vil deltagerne blive forklaret, at deltagelse er frivillig, og de kan nægte at deltage i undersøgelsen eller trække sig tilbage på et hvilket som helst tidspunkt under opfølgningen, uanset årsag.

Interessekonflikt

Der er ikke identificeret nogen finansielle eller andre konkurrerende interesser for CI eller nogen medforsker.

11. Sikkerhedshensyn

Da undersøgelsen er observationel, er risikoen for undersøgelsesrelaterede uønskede hændelser ubetydelig. Imidlertid vil enhver uønsket hændelse, der anses for at være relateret til undersøgelsen, blive rapporteret til sponsoren inden for 24 timer. Blodvolumen, der skal opsamles (op til 120 ml) kan opfattes som stor af nogle deltagere, men voksne, der donerer blod, giver normalt 500 ml ad gangen uden at lide anæmi. Efterforskerne forventer derfor ikke nogen uønsket hændelse i forbindelse med udtagning af denne mængde blod. Oplysninger om mængden af ​​blodprøver, og om dette vil have uønskede helbredsmæssige konsekvenser, vil blive forklaret til deltagerne i informationsarket. Alle TB-patienter vil blive screenet for anæmi som en del af deres sædvanlige kliniske pleje, og dem med hæmoglobinniveau under 10 g/dl ved indtræden vil blive udelukket. Derudover vil følgende foranstaltninger blive taget for at minimere potentielle gener, ubehag og risiko, som deltagerne kan opleve i løbet af denne undersøgelse:

- brug af passende uddannet personale til at udføre phlebotomi

12. Datahåndtering og registrering

12.1. Fortrolighed

Protected Health Information (PHI), der er nødvendig for udførelsen og analysen af ​​undersøgelsen, vil blive indsamlet for alle deltagere, der screenes til undersøgelsen; disse oplysninger vil omfatte hver deltagers navn, fødselsdato, køn, adresse, telefonnummer, lægejournalnummer, hvis relevant, e-mailadresse, hvis relevant, og etnisk oprindelse. Studiepersonale, der kræver adgang til PHI for at udføre eller analysere undersøgelsen, vil blive opført i en delegationslog. PHI vil forblive fortrolig og vil blive håndteret, behandlet, opbevaret og destrueret i henhold til Data Protection Act 1998. Deltagerne vil bevare retten til at tilbagekalde deres tilladelse til brugen af ​​deres PHI på et hvilket som helst tidspunkt under undersøgelsen. Alle deltagere vil blive anonymiseret i publikationer, der udspringer af denne undersøgelse. Data vil blive pseudo-anonymiseret som følger. PHI vil blive opbevaret i en sikker database knyttet til en unik identifikationskode. Kliniske oplysninger vil blive opbevaret i en separat sikker database, knyttet til den samme unikke identifikationskode. CI og co-investigators vil have adgang til det pseudo-anonymiserede endelige undersøgelsesdatasæt.

I løbet af forskningen vil alle optegnelser være CI's ansvar og vil blive opbevaret under sikre forhold. Når undersøgelsen er afsluttet, er det sponsors krav, at journaler og data opbevares i yderligere 20 år. CI vil fungere som "Custodian" af forskningsdataene. Adgang til PHI vil være begrænset til det mindste antal personer, der er nødvendige for gennemførelse af undersøgelsen, kvalitetskontrol, audit og analyse. Følgende vil omfatte kildedokumenter: screeningslogfiler, informeret samtykke og papir-CRF. Alle kildedokumenter vil blive opbevaret sikkert i aflåste arkivskabe. Dataoverførsel og transport vil blive udført i overensstemmelse med UK Data Protection Act 1998. Personidentificerbare oplysninger vil ikke blive lagret, transporteret eller sendt til eller fra nogen bærbar enhed, medmindre den pågældende enhed er krypteret.

12.2. Dataindsamling, registrering og håndtering

Underskrevne samtykkeerklæringer og papirdokumenter, der indeholder kildedata, vil blive opbevaret sikkert. Undersøgelsesdata vil blive indtastet i en database i EpiData Entry-softwaren. Personalet vil modtage passende træning i at bruge databasen til dataindtastning. Laboratoriedata vil blive indtastet i databasen.

CI og co-investigatorerne vil have adgang til undersøgelsesdata under undersøgelsen. Studiepersonale, der har behov for en sådan adgang for at gennemføre undersøgelsen, vil også få den adgang, som er nødvendig. Adgang til undersøgelsesdata under undersøgelsen vil også blive givet til autoriserede repræsentanter fra sponsoren, værtsinstitutionen og de regulerende myndigheder efter behov.

12.3. Kvalitetskontrol og kvalitetssikring

Undersøgelsesdokumentation vil blive stillet til rådighed for repræsentanter for sponsoren og REC til kvalitetskontrol og kvalitetssikring efter anmodning.

13. Laboratorier

13.1. Prøveindsamling, mærkning og behandling

Blodprøver vil blive indsamlet af undersøgelsens personale, mærket med deltager-id og dateret. Tempus-rør vil blive rystet kraftigt umiddelbart efter opsamling i henhold til producentens anbefalinger. Prøver til blodkultur og HIV-serologi vil blive transporteret til Central Laboratories for behandling. Resterende blodprøver vil blive transporteret til The Blizard Institute, hvor dato og klokkeslæt for prøvemodtagelsen samt prøvens tilstand (f. ikke-koaguleret) vil blive registreret i en laboratorielog. Prøver til QFT-Plus-testen vil blive inkuberet ved 37 °C kort efter modtagelse af prøver i 18 timer før centrifugering og aspiration af supernatanter, som vil blive opbevaret ved -80 °C i afventning af analyse for IFN-gamma-koncentration. Blodprøver i Tempus-rør vil blive opbevaret ved -80 °C i et mærket stativ i afventning af transport til afdelingen for infektion og immunitet, University College London for RNA-ekstraktion og genekspressionsprofilering. PBMC vil blive adskilt fra den resterende prøve (100 ml), med efterfølgende isolering af CD34+ celler ved hjælp af magnetisk perlesortering. Renheden af ​​isolerede CD34+-celler vil blive kontrolleret ved flowcytometri.